汤大鸣
- 作品数：7 被引量：34H指数：3
- 供职机构：上海第二医科大学附属仁济医院更多>>
- 发文基金：上海市青年科技启明星计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- VEGF对人血单核细胞基质金属蛋白酶表达及活性的影响被引量：9
- 2004年
- 目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)对人单核细胞源巨噬细胞 (HMDM)基质金属蛋白酶 (MMPs)的表达及其活性的影响。方法 :分别应用 RT- PCR和 Western blot检测 MMPs(MMP- 2和 MMP- 9)基因和蛋白表达 ,Zym ography活性分析检测 MMPs活性。结果 :VEGF可明显增加人单核细胞源巨噬细胞 (HMDM) MMP- 2、MMP- 9m RNA及其蛋白表达和活性。结论 :VEGF可刺激 HMDM MMP- 2、MMP- 9m RNA及其蛋白的表达 ,增强其活性 ,因而有可能促进动脉粥样硬化斑块内基质降解 ,进而引起粥样硬化斑块破裂。
- 王长谦汤大鸣王利民谢秀兰徐依敏丁泓毅宋伟王彬尧黄定九
- 关键词：血管内皮生长因子基质金属蛋白酶动脉粥样硬化
- pcDNA3-TIMP-2的构建与表达被引量：1
- 2004年
- 目的构建TIMP-2基因的真核表达载体pcDNA3-TIMP-2,并探讨其体外表达效果。方法应用已克隆得到的人TIMP-2基因和分子克隆技术构建pcDNA3-TIMP-2,酶切鉴定,并用体外培养人THP-1细胞,电穿孔转入pcDNA3-TIMP-2,RT-PCR和Western blotting分别检测外源基因转染效果,Zymography检测培养上清MMPs活性。结果构建pcDNA3-TIMP-2经酶切和测序鉴定正确,电穿孔法导入体外培养人THP-1细胞后,TIMP-2 mRNA约增加2.8倍,TIMP-2蛋白表达增加约2.7倍,MMP-2和MMP-9的活性分别约为对照组的32％和28％。结论成功构建了pcDNA3-TIMP-2,且证实有良好的体外转染和表达效果,为进行转移TIMPs基因抑制MMPs及探讨其与动脉粥样硬化等多种病理过程的关系奠定基础。
- 王长谦王顺汤大鸣林旭丁弘毅谢秀兰徐依敏王彬尧黄定九
- 关键词：基因表达基因转染基因克隆MMPS
- PPAR_γ配体对人血单核细胞MMPs和TIMPs表达及活性的影响被引量：4
- 2002年
- 目的探讨过氧化物酶体增生物激活受体-γ（PPARγ）配体15d-PGJ2对人血单核细胞基质金属蛋白酶及其内源性抑制物（MMPs和TIMPs）表达及活性的影响。方法 应用RT-PCR和Western blotting测定MMPs、TIMPs的基因和蛋白表达,Zymography测定MMPs活性。结果PPARγ配体15d-PGJ2可明显抑制人血单核细胞MMP-9的表达及其活性,但不影响MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达。结论 PPARγ配对15d-PGJ2可抑制人血单核细胞MMP—9的表达及其活性,对减少动脉粥样硬化斑块局部细胞外基质降解、增强斑块稳定性可能起到有益作用。
- 王长谦汤大鸣丁弘毅谢秀兰徐依敏王利民王彬尧黄定九
- 关键词：PPARΓ配体人血单核细胞MMPSTIMPS过氧化物酶体增生物激活受体-Γ
- 氧化型低密度脂蛋白对人血单核细胞基质金属蛋白酶表达及活性的影响被引量：18
- 2003年
- 探讨氧化修饰低密度脂蛋白对人单核细胞源巨噬细胞基质金属蛋白酶的表达及其活性的影响。采用体外培养人单核细胞源巨噬细胞 ,分别应用逆转录聚合酶链式反应和蛋白印迹检测基质金属蛋白酶 2和基质金属蛋白酶 9基因和蛋白表达 ,酶谱法检测基质金属蛋白酶活性。结果发现 ,不同浓度 (10、2 0、4 0mg/L)氧化修饰低密度脂蛋白对人单核细胞源巨噬细胞基质金属蛋白酶 2和基质金属蛋白酶 9基因表达的影响均明显高于相应浓度低密度脂蛋白组 ;基质金属蛋白酶 2和基质金属蛋白酶 9蛋白表达也明显高于相应浓度低密度脂蛋白组 ;基质金属蛋白酶 2和基质金属蛋白酶 9的活性明显高于相应剂量低密度脂蛋白组 ,且随剂量增加而增高。提示氧化修饰低密度脂蛋白可刺激人单核细胞源巨噬细胞基质金属蛋白酶 2、基质金属蛋白酶 9基因及蛋白的表达 ,增强其活性 ,因而有可能促进动脉粥样硬化斑块内基质降解 ,形成易损斑块 。
- 王长谦汤大鸣谢秀兰徐依敏丁弘毅王利民王彬尧黄定九
- 关键词：低密度脂蛋白氧化修饰基质金属蛋白酶免疫印迹
- VEGF对人血单核细胞TIMPs表达的影响被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)对人单核细胞源巨噬细胞(HMDM)组织基质金属蛋白酶抑制物(TIMPs)的基因和蛋白表达的影响。 方法 分别应用RT-PCR和Western blot检测TIMP(TIMP-1和TIMP-2)基因和蛋白表达。结果 VEGF可明显抑制HMDM TIMP-1 mRNA、TIMP-2 mRNA及其蛋白表达。 结论 VEGF可抑制HMDM TIMP-1 mRNA、TIMP-2 mRNA及其蛋白的表达,可能间接增强基质金属蛋白酶(MMPs)活性,因而有可能促进动脉粥样硬化斑块内基质降解,进而引起粥样硬化斑块破裂。
- 王长谦汤大鸣黄定九王彬尧王利民宋伟
- 关键词：血管内皮生长因子单核细胞巨噬细胞细胞培养
- 基质金属蛋白酶抑制物-2基因转移对家兔动脉粥样硬化斑块的影响被引量：1
- 2005年
- 目的探讨局部转染金属蛋白酶抑制物(pcDNA3TIMP2)基因对动脉粥样硬化斑块的影响。方法内皮剥脱加高脂饮食建立兔动脉粥样硬化动物模型,基因球囊局部转染pcDNA3TIMP2,RT PCR和Westernblot分别检测动脉粥样硬化斑块局部外源基因转移效果,Zymography检测动脉粥样硬化斑块局部基质金属蛋白酶(MMPs)活性,病变股动脉组织行HE和苦味酸酸性品红染色,全自动图像分析仪行图像处理,测量血管腔面积、胶原成分含量。结果基因转染组术后2周动脉粥样硬化局部TIMP2基因表达即明显高于空白载体对照组(P<0.01),术后4周达高峰;术后2、4、8周TIMP2蛋白表达也明显高于空白载体对照组(P<0.01),MMP2和MMP9活性低于对照组。局部转染TIMP2基因组动物,动脉粥样硬化斑块纤维帽厚度和病变局部胶原含量均明显高于对照组,但病变血管腔面积与对照组差异则无统计学意义。结论动脉粥样硬化局部转移TIMP2基因可明显抑制病变局部MMP2和MMP9活性,增加动脉粥样硬化斑块纤维帽厚度和病变局部胶原含量,但对动脉粥样硬化所致血管腔狭窄程度无明显影响。
- 王长谦王顺汤大鸣林旭丁弘毅谢秀兰徐依敏王彬尧黄定九
- 关键词：动脉粥样硬化斑块基质金属蛋白酶抑制物MMP-9活性TIMP-2基因家兔内皮剥脱
- 基质金属蛋白酶活性与动脉粥样硬化斑块稳定性关系的实验研究
- 王长谦黄定九王彬尧汤大鸣谢秀兰丁弘毅徐依敏杨爱芳董波
- 该课题研究克隆人TIMP-1和TIMP-2全长cDNA，电泳和测序鉴定正确。将TIMP-2基因插入到真核表达载体pcDNA3上，得到真核表达质粒pcDNA3-TIMP-2。pcDNA3-TIMP-2电穿孔法转染培养的人单...
- 关键词：
- 关键词：动脉粥样硬化斑块基因治疗
