陈锴
- 作品数：29 被引量：45H指数：4
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划“十一五”国家科技支撑计划引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪瘟兔化弱毒疫苗荧光定量RT-PCR检测试剂盒
- 本发明涉及猪瘟兔化弱毒疫苗荧光定量RT-PCR检测试剂盒。利用猪瘟兔化弱毒疫苗株（HCLV株）的基因序列，设计了特异性的HCLV荧光探针和引物。经过对反应条件的优化，研发了猪瘟兔化弱毒疫苗荧光定量RT-PCR检测试剂盒。...
- 王琴徐璐赵启祖范学政邹兴启朱元源陈锴
- 文献传递
- 猪瘟病毒中等致病力毒株在体内的动态分布被引量：1
- 2018年
- 【目的】目前我国猪瘟的感染类型主要是亚急性感染及慢性感染,研究猪瘟亚急性感染后体内病毒RNA和蛋白的分布情况,有助于阐述亚急性病程猪瘟病毒的复制分布规律,为猪瘟的早期诊断和预防奠定重要基础。【方法】成功以中等致病力毒株(HeBHH1/95)构建了亚急性猪瘟感染动物模型,分别采集感染后第1、3、6、10、13、20、24、28天感染猪的十二指肠、脾脏、肾脏、肺脏、胰、回盲瓣6种组织器官并进行连续切片。应用建立的猪瘟病毒可视化原位杂交技术(ViewRNA ISH)研究感染组织中病毒RNA动态分布,同时采用免疫组化(IHC)、H.E染色分别检测感染组织中蛋白的分布情况及其组织损伤位置,从而在病毒核酸和蛋白水平系统性的观察病毒的分布情况。【结果】采用Mittelholzer方法进行临床计分发现感染后6—10 d感染猪猪瘟临床症状记分迅速增加,11—26 d感染猪临床记分一直维持在15分左右,直到28 d临床记分达到最高值20分。感染后8—10 d感染猪体温呈上升趋势;13—24 d感染猪体温呈现稽留热,持续在40℃左右;此后体温开始回落,至濒死前体温回落至39.5℃左右。应用CSFV ViewRNA ISH感染后第1天在十二指肠绒毛杯状细胞及胰腺的腺泡、回盲瓣的固有层、肾脏的肾小管等这些具有分泌功能的结构组织周围检测到病毒RNA阳性信号;感染后第3天在肺脏的细支气管和脾脏的椭圆体周围检测到病毒RNA阳性信号;第13天阳性信号富集显著,至第28天病毒RNA广泛分布在脾脏动脉周围淋巴鞘及胰腺腺泡和肾小管等组织周围。采用IHC和H.E染色法在连续切片的相似视野下验证ViewRNA ISH检测结果,发现感染后第1天十二指肠、胰腺、肾脏亦可检测到病毒蛋白阳性信号和相应组织的病理变化,但回盲瓣在第3天检测到病毒蛋白阳性信号和组织的病理变化,在之后的病程中各组织中病毒RNA、蛋白定位情况�
- 孙骏翔张乾义徐和敏王团结徐璐邹兴启朱元源李翠夏应菊徐嫄陈锴张玉杰赵启祖王琴
- 关键词：猪瘟病毒RNA
- 采用RNA可视化原位杂交技术对感染细胞中猪瘟病毒RNA定位与分布的研究
- 研究猪瘟病毒RNA在体外感染细胞中的分布及定位,本研究建立了一种准确、敏感的RNA可视化原位杂交技术。并对其强致病力毒株在细胞中的RNA定位分布进行了研究,发现病毒RNA吸附和进入靶细胞的时间早于0.Shpi。
- 张玉杰赵燕徐璐张乾义陈锴孙永芳邹兴启朱元源赵启祖宁宜宝王琴
- 原位杂交技术在兽医微生物研究中的应用
- 原位杂交(in situ hybridization)技术是80年代发展起来的一种把重组DNA技术与组织学定位技术结合起来的新技术。本文对从80年代至今原位杂交技术的发展历程以及各阶段不同技术的原理,在兽医微生物中的应用...
- 赵燕陈锴范学政徐璐郑然王琴
- 文献传递
- 牛病毒性腹泻病毒荧光定量RT-PCR检测试剂盒
- 本发明涉及牛病毒性腹泻病毒荧光定量RT-PCR检测试剂盒。根据GenBank公布的21条BVDV-Ⅰ和6条BVDV-Ⅱ基因组全序列及34条CSFV全长序列，利用DANMAN、Primer Express3.0等软件，在B...
- 徐璐王琴范学政赵启祖朱元源邹兴启陈锴
- 文献传递
- 牛病毒性腹泻病毒荧光定量RT-PCR检测试剂盒
- 本发明涉及牛病毒性腹泻病毒荧光定量RT-PCR检测试剂盒。根据GenBank公布的21条BVDV-Ⅰ和6条BVDV-Ⅱ基因组全序列及34条CSFV全长序列，利用DANMAN、Primer Express3.0等软件，在B...
- 徐璐王琴范学政赵启祖朱元源邹兴启陈锴
- 文献传递
- 猪瘟病毒持续性感染的组织病理学变化研究
- 猪瘟是由猪瘟病毒引起的猪的高度致死性、接触性传染病。持续感染是猪瘟感染的主要方式之一。本研究通过建立猪瘟病毒中低致病力毒株体内持续感染模型，定期采集感染猪的心、肝、脾、肺、肾、扁桃体、淋巴结等器官，观察不同时期各组织器官...
- 朱长康陈锴张正兴范学政徐璐郑然王琴
- 关键词：猪瘟病毒组织病理学病毒感染致病机理
- 国内部分猪瘟病毒流行株抗原性分析被引量：2
- 2012年
- 为分析我国猪瘟病毒(CSFV)流行株的抗原性差异及其与特异性单克隆抗体(MAb)反应性之间的关系,本研究采用CSFV强弱毒鉴别MAb通过ELISA方法对我国流行的29株分离株进行抗原反应性研究,结果显示针对弱毒株MAb(MAb11)除3株为阳性外,其余均为阴性;而这些分离株可以被强毒MAb(MAb56)分为强反应和弱反应两组。同时对29株分离株E2基因的190 nt进行同源性分析,并将其分为3个亚群,即1.1、2.1和2.2;氨基酸序列具有一致独特的位点差异规律,强反应组(761G、764L)和弱反应组(761R或K、764P)分别具有2个独特的差异位点。推测761G和764L是针对MAb56与CSFV抗原结合的关键位点。
- 王琴赵耘范学政徐璐张正兴陈锴宁宜宝丘惠深王在时
- 关键词：猪瘟病毒单克隆抗体抗原性ELISA
- 2011年我国部分地区猪瘟病毒分子流行病学研究被引量：4
- 2014年
- 本研究对2011年我国部分地区养猪场采集的疑似猪瘟病料组织样本209份,分别用FQ-RT-PCR和RT-nPCR两种方法检测猪瘟病毒（CSw）.结果FQ-RT-PCR检测出55份猪瘟阳性,RT-nPCR检测出53份阳性,2种方法符合率达96.3％.将53份阳性产物进行测序及同源性分析,显示这53份流行株均为2.1基因亚型.所分离的流行株与疫苗株（HCLV）和石门株（SM）的核营酸同源性分别为79.4％～83.1％和79.4％～82.5％.研究结果表明,目前我国部分地区的养殖场仍有猪瘟病毒的存在,且以2.1亚型为主;流行株与疫苗株同源性仍高于77.4％,结合免疫攻毒试验,说明目前使用的猪瘟疫苗依然有效.
- 朱长康徐璐范学政陈锴张正兴郑然赵燕徐志文宁宜宝王琴
- 关键词：猪瘟病毒E2基因分子流行病学
- 原位杂交技术在兽医微生物研究中的应用
- 原位杂交(in situ hybridization)技术是80年代发展起来的一种把重组DNA技术与组织学定位技术结合起来的新技术。本文对从80年代至今原位杂交技术的发展历程以及各阶段不同技术的原理，在兽医微生物中的应用...
- 赵燕陈锴范学政徐璐郑然王琴
- 关键词：病理诊断原位杂交技术
