刘宁
- 作品数：28 被引量：81H指数：4
- 供职机构：吉林大学第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学农业科学更多>>
- 脑啡肽酶作为诊断心力衰竭生物学标记的研究被引量：3
- 2019年
- 目的研究脑啡肽稳定性是否适合作为心力衰竭生物学标志,以及研究其在血清中含量与活性的关系。方法抽取心力衰竭患者空腹血液2ml,于非抗凝管中。采集后的血液4℃保存,并在4h内3 000rpm离心10分钟,缓慢吸出上层血清,转入EP管中;将30个心力衰竭患者的血清放入一个50ml离心管中,涡旋混匀后分装,每管200μl,将获得的多管混合血清分组,分别放入-80℃、-20℃和4℃中保存,以-80℃中的样本作为对照组,测定4℃保存8h、12h、16h和24h的样本中NEP含量。同样,以-80℃中的样本作为对照组,测定-20℃保存7d、14d、21d和28d的样本中NEP含量;分别用NEP含量检测试剂盒和NEP酶活性检测试剂盒测试40例患者血清中的NEP。通过相关性分析比对,血清中NEP含量及活性关系。结果分离后的血清在4℃中保存24h之内,-20℃保存的血清28d之内其含量下降并不显著(P>0.05);血清中NEP含量与酶活性成正相关,相关系数R2为0.7017,二者相关性较强。结论 NEP在人血样本中较稳定,可以满足临床检测对样本储存及保留复检的要求。结合之前的研究结果,NEP有望成为心力衰竭诊断的生物学标记。
- 刘宁史永锋关一诺赵青吴迪武军铎高大松刘斌
- 关键词：脑啡肽酶心力衰竭生物学标记
- 利用生物正交反应研究流感病毒在宿主细胞中的动态过程
- 生命活动是动态的,蛋白质作为生命活动中起重要作用的生物大分子,无时无刻不在通过各种代谢途径进行着自我更新。而任何外界的刺激信号也能够使机体细胞通过合成新的蛋白以快速适应环境的变化。我们利用生物正交反应,在细胞基因翻译过程...
- 孙宁宁高祥王子健程欣刘宁
- 关键词：点击化学流感病毒质谱
- 文献传递
- 基于不同裂解液的蛋白质组样品制备方法的比较研究被引量：2
- 2015年
- 蛋白质组学研究所面临的首要问题就是蛋白质组的样品制备,而不同的样品制备方案针对细胞、组织等样品的裂解能力,以及对不同种类蛋白的溶解能力会有很大的差异。本研究以培养的293T细胞为对象,利用质谱分析鉴定蛋白的方法,比较了采用3种常用的蛋白质组样品制备方法(Triton X-100法、尿素法和TRIzol法)所提取蛋白种类的差异,并利用生物信息学工具对所得数据进行了分析。结果表明,Triton X-100法和尿素法所提取蛋白的鉴定数目接近,而TRIzol法所提取蛋白的鉴定数目比二者减少约8%。从所鉴定的蛋白种类来看,3种方法相差较大,仅约有32%的蛋白为3种方法所共有,生物学功能也不尽相同。本研究为评价各种蛋白质组样品制备方法提供了一种快速、有效、全面的研究方法。
- 孙宁宁王子健高祥程欣孙万春杨静波刘宁
- 关键词：蛋白质组尿素TRIZOL液相色谱-质谱联用
- 宫颈癌组织survivin表达的意义被引量：1
- 2009年
- 目的检测宫颈癌组织中凋亡抑制蛋白生存素（survivin）的表达，分析survivin与宫颈癌临床特征的关系。方法采用免疫组织化学技术检测46例宫颈癌组织和癌旁宫颈组织中survivin的表达。结果46例宫颈癌组织中survivin基因表达28例，癌旁宫颈组织中无survivin基因的表达。Survivin的表达与结肠癌的发病年龄、性别、分化程度无关（P〉0．05），而与宫颈癌的转移有关联性（P〈0．05）。结论在结肠癌中survivin的表达能促进宫颈癌的发生发展和转移。
- 汪德清李云巍刘宁
- 关键词：生存素宫颈肿瘤免疫组织化学
- 14-3-3ε蛋白磷酸化修饰的生物质谱分析被引量：3
- 2013年
- 本研究在HEK293细胞中过表达带有6个组氨酸标签的14-3-3ε蛋白,经镍离子亲和树脂富集和凝胶电泳等生物化学方法分离并富集目标14-3-3ε蛋白。利用特异性胰蛋白酶对14-3-3ε蛋白进行胶内水解后,采用TiO2亲和层析法,对蛋白水解混合物中的磷酸化修饰肽段进行富集,并利用生物质谱技术分析鉴定了14-3-3ε蛋白中的磷酸化修饰位点。结果表明,利用生物质谱技术,结合人工解谱的方法,能够高效、准确地鉴定HEK293细胞中过表达的14-3-3ε蛋白中的磷酸化修饰肽段的结构信息,确定了14-3-3ε蛋白中的12个磷酸化修饰位点,其中多个位点的磷酸化修饰为首次发现。
- 李子健何鑫潘晨宇刘宁
- 关键词：质谱磷酸化修饰
- 岩大戟内酯B对小鼠内毒素血症模型的保护作用研究被引量：1
- 2014年
- 目的研究岩大戟内酯B(jolkinolide B,JB)对内毒素血症模型小鼠的治疗作用。方法采用腹腔注射内毒素制备小鼠内毒素血症模型,观察不同脓毒JB(10、5和2.5mg/kg)对内毒素血症模型小鼠的治疗效果。用ELISA法检测LPS刺激后8h小鼠血清中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量并检测腹腔灌洗液中白细胞数目。结果JB以浓度依赖的方式降低内毒素血症模型小鼠死亡率,并显著降低血清中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量以及腹腔灌洗液中白细胞数目。结论 JB通过抑制内毒素血症小鼠炎性细胞因子表达以及炎性细胞浸润发挥其保护作用,可以成为内毒素血症治疗的候选药物。
- 王慧李晓鸥张晓伟潘晨宇刘宁
- 关键词：岩大戟内酯B内毒素血症肿瘤坏死因子-Α白介素-1Β白介素-6
- MicroRNA在心肌纤维化中的作用机制及研究进展被引量：1
- 2019年
- 心肌纤维化(MF)是心脏间质重塑,其以心脏间质成纤维细胞的增殖过度,胶原的沉积过度和分布异常为主要特征。微小RNA是一类内源的,非编码的单链RNA分子,其长度约为22个核苷酸,广泛存在于真核生物中,参与调控基因转录后的表达。目前,microRNA在心血管疾病领域中的研究增加,并且趋于成熟。诸多研究结果表明microRNA参与并调节了心肌纤维化的发生、进展过程及病理形成过程,有望指导疾病的预测,诊断和治疗。
- 金鑫刘宁王冠朴金花杨金英崔燕
- 关键词：心肌纤维化心血管疾病微小RNA间质成纤维细胞MICRORNA基因转录
- 利用非天然氨基酸代谢掺入法检测新生成蛋白被引量：3
- 2018年
- 以脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激Raw264.7细胞产生肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factorα,TNF-α)为模型体系,建立了非天然氨基酸代谢掺入法检测特定新生成蛋白的方法。通过代谢掺入的方法,使细胞中的蛋白质,特别是新生成的蛋白质一级结构中掺入非天然氨基酸,即带有叠氮基团的甲硫氨酸类似物(Azidohomoalanine,AHA)。考察了在不同浓度的LPS和FBS,以及不同的刺激时间等条件下,LPS刺激Raw264.7细胞产生TNF-α的实验参数,确定了最优的实验条件为:在含有1%胎牛血清的无甲硫氨酸(Met)的DMEM培养基中,分别在不加LPS和加10 ng/m L的LPS条件下刺激Raw264.7细胞4 h,在刺激细胞的同时掺入AHA。利用Cu+催化的叠氮基团与带有生物素(Biotin)标签的炔烃基团的环加成反应,使蛋白质标记上Biotin标签。利用吸附在固相载体上的抗体特异性捕获TNF-α分子,再用耦联辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)的链霉亲和素(Streptavidin)对TNF-α分子上的Biotin进行识别,实现对特定的新生成蛋白质(TNF-α)进行检测。本方法为检测特定微量新生成蛋白、表征特定蛋白质的周转等研究提供了新的思路法。
- 崔秀雲孙宁宁谢小娜孙万春赵晴刘宁
- 关键词：非天然氨基酸肿瘤坏死因子Α点击化学
- 低浓度甲醛对多肽和蛋白化学修饰的质谱研究被引量：6
- 2016年
- 采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和纳升电喷雾四极杆飞行时间串联质谱(Nano-ESI-QTOF MS)技术,以标准肽段和流感病毒基质蛋白酶切肽段为模型,研究了甲醛对蛋白质和多肽主链的修饰作用。采用与实际病毒灭活过程一致的实验条件(4℃,0.025%(V/V)福尔马林(37%(w/w)甲醛溶液)处理72 h),进行甲醛与多肽的化学反应。结果表明,在实验条件下,甲醛能与标准肽段N端的氨基反应生成羟甲基加合物,再发生缩合反应生成亚胺,形成+12 Da的产物。此外,甲醛还能与标准肽段中的精氨酸、赖氨酸的侧链发生反应,生成+12 Da的反应产物。对流感病毒基质蛋白的酶切肽段与甲醛的反应的质谱分析结果显示,多数的肽段都生成了+24 Da的产物,质量的增加来源于肽段N端氨基(+12 Da)和C端精氨酸或赖氨酸的侧链(+12 Da)的贡献。此外,还观察到有一个漏切位点的肽段生成了+36 Da的产物。本研究结果表明,在实验条件下,低浓度甲醛主要与肽段和蛋白的N端氨基,以及精氨酸和赖氨酸侧链发生反应。本研究为分析低浓度甲醛与蛋白质的反应产物提供了有效的质谱分析方法和解谱依据。
- 王子健杨静波李光谱孙宁宁孙万春彭其胜刘宁
- 关键词：甲醛多肽基质蛋白化学修饰质谱
- 血清肿瘤标志物糖链抗原125和癌胚抗原联合检测在宫颈癌诊断中的应用价值被引量：20
- 2020年
- 宫颈癌是一种常见的妇科肿瘤,其发病率逐年升高,已经成为仅次于乳腺癌的恶性妇科肿瘤之一[1]。宫颈癌发病隐秘,临床症状不典型,许多患者出现典型症状就诊时已进展为中晚期肿瘤,失去手术治疗的机会[2]。目前宫颈癌主要筛查手段如宫颈液基细胞学检查假阴性率较高,只能作为初步检查以及普查的一种方法。
- 刘宁袁宁潞王丛赵艳晖
- 关键词：中晚期肿瘤假阴性率糖链抗原125宫颈液基细胞学检查癌胚抗原血清肿瘤标志物
