周敏
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：南昌大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- AMPKα2基因shRNA重组质粒的构建以及在氯离子介导的大鼠心肌缺氧/复氧损伤中的作用
- 2012年
- 目的:构建AMP活化的蛋白激酶α2亚基(AMPKα2)基因shRNA重组表达质粒,转染H9c2心肌细胞,探讨其在氯离子(Cl-)介导的心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤中的作用。方法:构建靶向AMPKα2基因的shRNA重组质粒pSuper-AMPKα2 shRNA,转染H9c2细胞;Western blotting法测定AMPKα2的蛋白表达情况。实验分5组,每组重复6次:(1)Control组;(2)A/R组;(3)Cl--free A/R组;(4)pSuper+Cl--free A/R组;(5)pSu-per-AMPKα2 shRNA+Cl--free A/R组。处理结束后,生化自动分析仪测定LDH活性,MTT法测定细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧(ROS)水平,试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果:重组表达质粒pSuper-AMPKα2 shRNA经测序证明构建正确;转染心肌细胞后,AMPKα2蛋白表达明显下降;Cl--free A/R组较之A/R组细胞存活率升高,LDH含量下降,细胞凋亡减少,ROS生成减少,SOD和GSH-Px活性增加;转染pSuper-AMPKα2 shRNA质粒后,阻断了Cl--free液的保护作用,且ROS生成增加,SOD和GSH-Px活性也下降。结论:成功构建pSuper-AMPKα2 shRNA重组质粒。AMPKα2基因沉默阻断了Cl--free液对心肌细胞A/R损伤的保护作用。
- 刘丹孙惦许旻周敏吴晓牧何明
- 关键词：复氧损伤氧化性应激
- 心肌缺血后处理过程中14—3—3η和Bcl-2的交互作用研究
- 2012年
- 目的：心肌缺血后处理（ischemicpostconditioning，I-postC）是一种与IPC保护作用相当、可以在缺血后实施的强有力的内源性心脏保护现象，已证实Bcl-2转移至线粒体在其中发挥重要的作用，但机制不明，本研究探讨在I-post C过程中，Bcl-2是否在14-3-3η的作用下从胞浆亚定位至线粒体，从而发挥心肌保护作用。
- 尹东何欢周敏何明
- 关键词：心肌保护作用BCL-2缺血后处理心脏保护IPC内源性
- Bcl-2介导的芹菜素抗心肌细胞缺氧/复氧损伤作用被引量：4
- 2015年
- 目的探讨芹菜素(apigenin,Api)在心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用,并阐明Api对心肌损伤的保护作用是否主要由Bcl-2介导。方法培养H9c2心肌样细胞;随机分为正常对照(Cont)组、缺氧/复氧(Anoxia/Reoxygenation,A/R)组、Api预处理组、Api+ABT-737组。MTT法检测细胞存活率;Western blot法检测Bcl-2表达;比色法检测培养液LDH活性、细胞SOD及GSH-Px活性、MDA含量;流式细胞仪检测心肌细胞ROS含量、线粒体膜电位及细胞凋亡。结果 Api预处理25 h后,心肌细胞Bcl-2表达呈剂量依赖性上调(P<0.01);细胞存活率升高,培养液LDH活性降低,细胞SOD、GSH-Px活性升高,MDA含量与ROS生成减少,线粒体膜电位更为稳定,细胞凋亡减少(P<0.01);Bcl-2抑制剂ABT-737则可取消Api的上述心肌保护作用。结论Api抗心肌A/R损伤作用涉及Bcl-2信号通路,至少部分依赖于其对Bcl-2表达水平的上调。
- 周敏游嘉振何欢刘丹廖章萍汤蕾尹东何明
- 关键词：芹菜素BCL-2心肌细胞保护
