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张宁: 作品数：14 被引量：10H指数：2; 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>; 发文基金：广西壮族自治区科学研究与技术开发计划广西大学科研基金广西科技基础条件平台建设项目更多>>; 相关领域：农业科学更多>>

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猪圆环病毒2型核酸疫苗的小鼠免疫保护试验: 为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)核酸疫苗在小鼠攻毒试验中的免疫保护效果，以PCV-2 GXWZ-1株为模板，扩增出ORF2基因及其截短基因8个片段(A(ORF2)、B(51-100aa)、C(101-150aa)、D(...; 张宁陆有飞黄伟坚侯韶毅韦英益李茂宁肖爱欢谢丽华刘芳高永锐卢桂娟; 关键词：重组质粒间接免疫荧光试验; 文献传递

猪圆环病毒2型广西流行株序列比较分析被引量：1: 2009年; 参考GenBank发表的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)全基因组序列,设计引物,通过反向PCR技术,从广西部分市区疑似"高热病"病猪的组织中,扩增9株PCV-2流行株的全基因,并进行了序列测定分析。结果表明,9个PCV-2分离株基因组全长为1767bp或1768bp。同源性比较发现,9个分离株之间的核苷酸同源性为94.6%～99.9%,与GenBank上已发表的国外分离株比较,同源性为94.4%～100%;9个分离株ORF2之间的核苷酸及其所推导的氨基酸序列同源性分别为93.7%～99.4%和93.6%～99.1%;系统发育树显示,其中7个分离株与法国株、新西兰株关系较近,与美国株和加拿大株关系较远;另外2个分离株与澳大利亚株、美国株亲缘关系较近。; 张宁谢丽华何苹萍秦毅斌陈云霞兰家暖廖承球黄伟坚; 关键词：猪圆环病毒2型基因克隆

猪圆环病毒2型核酸疫苗的小鼠免疫保护试验被引量：1: 2010年; 为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)核酸疫苗在小鼠攻毒试验中的免疫保护效果,以PCV-2 GXWZ-1株为模板,扩增出ORF2基因及其截短基因8个片段(A(ORF2)、B(51-100aa)、C(101-150aa)、D(181-235aa)、E(151-200aa)、F(51-150aa)、G(101-235aa)、H(51-235aa)),将其插入到pcDNA3.0载体中,构建出真核表达质粒,并将其转染至PK-15细胞,用间接免疫荧光试验检测其瞬时表达情况。将试验小鼠随机分成9组,其中免疫组7组,阴阳性对照各1组,将纯化的真核表达质粒对小鼠进行组合免疫;二免后,用经处理过的PCV-2 GXWZ-2株阳性病料悬液腹腔注射免疫组和非免疫对照组小鼠,阴性对照组用生理盐水腹腔注射;其后进行体重记录、病理切片制作及PCR检测。结果表明:共有6个真核表达质粒成功在PK-15细胞中表达。在攻毒后的3周内,阳性对照组小鼠PCR诊断均为阳性;免疫组中,部分组小鼠在攻毒后第1周或在第2周为阳性,到第3周时各免疫组小鼠全部为阴性;阴性对照组始终为阴性。免疫组在病理保护学方面明显优于非免疫对照组,非免疫对照组的体重增长速率略低于免疫组和阴性对照组。由此可见猪圆环病毒2型核酸疫苗在小鼠攻毒试验中有明显的保护作用。; 张宁侯韶毅韦英益李茂宁肖爱欢谢丽华刘芳高永锐卢桂娟陆有飞黄伟坚; 关键词：重组质粒间接免疫荧光试验免疫保护效果

猪圆环病毒2型ORF2截短基因片段真核表达载体的构建及其DNA疫苗的免疫效果被引量：2: 2009年; 为研究猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2截短基因片段核酸疫苗的免疫效果,以PCV-2 GXWZ-1株为模板,用PCR方法扩增出ORF2基因及其截短基因共8个片段[A(ORF2)、B(51～100 aa)、C(101～150 aa)、D(181～235 aa)、E(151～200 aa)、F(51～150 aa)、G(101～235 aa)、H(51～235 aa)],将其插入pcD-NA3.0载体中,成功构建了pcDNA-A、pcDNA-B、pcDNA-C、pcDNA-D、pcDNA-E、pcDNA-F、pcDNA-G、pcDNA-H。将纯化后的真核表达质粒转染PK-15细胞后,用间接免疫荧光试验检测各个质粒在细胞中的瞬时表达情况。分别用单独免疫和组合免疫的方法免疫小鼠,每只0.15 mg,用ELISA试剂盒检测小鼠血清中的抗体效价,并分析这两种方法的免疫效果。结果显示,6个片段较短的重组质粒(pcDNA-B、pcDNA-C、pcDNA-D、pcDNA-E、pcDNA-F、pcDNA-G)转染的细胞中均有明显且较亮的荧光出现,而2个片段较长的重组质粒(pcDNA-A、pcDNA-H)及空载体pcDNA3.0转染的细胞中没有荧光出现。在单独免疫组中,这8个片段的真核表达质粒都能刺激机体产生特异性抗体,其中片段较短的pcDNA-C、pcDNA-D、pcDNA-E的免疫效果比较理想;在组合免疫中,除pcDNA-C-F外,各个真核表达质粒都能产生较高水平且稳定的抗体,其中pcDNA-D-H、pcDNA-B-F的免疫效果最好。表明组合免疫要比单独免疫的效果好。; 张宁李茂宁侯韶毅兰家暖谢丽华黄伟坚冯励韦英益刘芳李军; 关键词：猪圆环病毒2型真核表达重组质粒免疫效果

猪增生性肠炎的研究进展: 引起增生性肠炎的病原为胞内劳森菌，该病极大的增加了养猪成本。本文就该病近年来的研究成果及其进展做一综述。; 谢丽华黄伟坚张宁李茂宁; 关键词：猪病防治增生性肠炎发病机理病理变化; 文献传递

猪胞内劳森氏菌PCR检测方法的优化及广西猪增生性肠炎流行情况的初步调查: 猪增生性肠炎(PPE),是由胞内劳森氏菌引起的接触性传染病,以来成熟肠细胞发生腺瘤样增生为特征.呈全球性流行,引起顽固性腹泻,严重降低饲料报酬率,时养猪业遣成巨大经济损失.本研究建立并优化了PCR诊断方法,能用于活体检测...; 谢丽华兰家暖黄伟坚肖爱欢张宁秦毅斌何苹萍侯韶毅李桂宣; 关键词：胞内劳森氏菌 PCR检测猪增生性肠炎

猪圆环病毒2型核酸疫苗在小鼠攻毒实验中免疫保护性研究: 猪圆环病毒2型(PCV2)是与猪的一种新的传染病—断奶仔猪多系统衰竭综合征(postweaning multisystemicwasting syndrome,PMWS)密切相关,该病以进行性消瘦、呼吸困难、淋巴结肿大、...; 张宁侯韶毅陈云霞韦英益李茂宁肖爱欢兰家暖廖承球谢丽华黄伟坚张远波刘芳禤雄标高永锐卢桂娟陆有飞曾晓飞; 文献传递

2003～2008年广西猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株分子流行病学调查被引量：3: 2009年; GP5是猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）变异最大的结构蛋白，能够诱导机体产生中和抗体。2003～2008年从广西各县市采集PRRSV阳性病料，扩增得到的49株PRRSVORF5基因序列，并对序列进行比较和分析。49个毒株的ORF5分别属于美洲型的Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ亚群．推导氨基酸分析发现：在中和表位区域GXLZ-1、GXLZ-2由H^38→N^38、L^39→I^39，Ⅱ亚群所有毒株序列由L^39→I^39；在R^13和R^151毒力相关位点，GXGG-1变为Q^13，GXLZ-1和GXLZ-2变为K^151，其他毒株未发生突变，推测Ⅱ亚群广西毒株的毒力比Ⅰ、Ⅳ亚群的强；从2003—2005年和2006—2008年这2个时间段分析，在9aa、16aa、54aa、59aa、94aa、104aa、185aa出现了时间性的基因变异；遗传进化树分析发现，随着时间的推移，获得的广西毒株与CH-1a、MLV株亲缘关系逐渐发生偏离，2006年6月之后所获得毒株亲缘关系很近，相互之间同源性很高，且与国内PRRSV变异毒株JXA1高度同源，推断2006年后获得的毒株与变异株可能由同一毒株演化而来。; 陈琼黄伟坚冯建远卢桂娟张宁何萍平秦毅斌李茂宁; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5

猪胞内劳森氏菌16SrRNA基因的克隆及序列分析: 胞内劳森氏菌(Lawsonia intracellularis,LI)是猪增生性肠炎的病原,能严重降低饲料报酬率,极大威胁养猪业.国内对该病的报道较少,更未见针对该病原基因的序列分析.本研究设计3条引物,采用半巢式PCR...; 谢丽华肖爱欢兰家暖张宁秦毅斌李茂宁韦英益黄伟坚; 关键词：胞内劳森氏菌; 文献传递

猪胞内劳森菌16SrRNA基因的克隆及序列分析被引量：3: 2009年; 胞内劳森菌（Lawsonia intracellularis,LI）是猪增生性肠炎的病原,本试验设计3条引物,采用半巢式PCR,从猪的回肠粘膜中扩增出长为1 457 bp的胞内劳森氏菌16SrRNA基因,并进行序列比较分析。结果表明,与不同动物源性（鼠、仓鼠、鹿、马、鸵鸟等）的增生性肠炎胞内菌核苷酸同源性在98.4%-100%之间,与脱硫弧菌同源性达到88.6%,与一般弯曲杆菌和螺旋体同源性较低（71.8%-73.9%）。; 谢丽华张宁何苹萍李茂宁尹业师韦英益肖爱欢黄伟坚; 关键词：胞内劳森氏菌

张宁

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