张陵林
- 作品数：27 被引量：80H指数：5
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 痘病毒科不同病毒属特异的PCR检测方法的建立
- 2010年
- 目的:建立可准确、快速地鉴别诊断可感染人的不同属痘病毒的特异PCR方法。方法:设计针对正痘病毒属、副痘病毒属和传染性软疣病毒属的多对特异引物,并制备相应的DNA模板,针对不同的模板优化引物与反应条件,分别进行检测筛选,建立病毒属特异的单独与多重PCR方法。结果:单一模板的PCR扩增反应中,正痘病毒的检测敏感性可达101拷贝/μL(引物为OPEaL-F1880/OPEaL-R2057),副痘病毒的检测敏感性可达101拷贝/μL(引物为PP2/PP3),传染性软疣病毒的检测敏感性为100 pg/μL体系(引物为MCV1/MCV2);混合模板的PCR扩增反应中,各属特异的引物均可获得预期大小的特异片段。结论:我们建立的PCR诊断方法,可用于痘病毒科不同病毒属感染的实验室特异快速鉴别诊断。
- 周为民王慧娟张陵林谭文杰董小平阮力
- 关键词：PCR检测
- 22例SARS感染愈后连续5年特异性IgG抗体随访分析
- 2010年
- 为分析SARS冠状病毒(SARS-CoV)IgG抗体在SARS感染康复者体内的持久性与变化,本研究自2004年3月开始,每年采集北京地区SARS感染康复者血清标本,采用商品化的冠状病毒(变异株)IgG抗体间接ELISA检测试剂盒,对其中22名SARS康复者中的SARS-CoVIgG抗体进行连续五年随访检测与分析。结果表明:在愈后第1年,所有血清SARS-IgG抗体皆为阳性。第2、3年处于平台期,滴度仍维持较高的水平。第4年抗体滴度有明显下降趋势。第5年IgG抗体基本转阴。研究发现SARS-CoVIgG抗体可维持3年以上,第4年之后明显下降。本研究为SARS感染诊断与防治、免疫应答及疫苗效力评价等提供了重要依据。
- 王慧娟张陵林谭文杰周为民严伟铮彭堃阮力
- 关键词：SARS-COVIGG抗体酶联免疫吸附实验
- 甲型流感病毒治疗S_（37）腹水瘤小鼠的实验研究
- 1995年
- 甲型流感病毒鼠肺适应型７５－３９株治疗Ｓ３７腹水型荷瘤小鼠，存活率达９３．３％。体外实验观察流感病毒感染Ｓ３７肿瘤细胞，到３天时Ｓ３７细胞经胎盘蓝染色，１００％的Ｓ３７细胞死亡，而对照组肿瘤细胞染色率只有１０％左右。进一步研究病毒免疫治疗Ｓ３７腹水瘤小鼠的治疗机理，发现小鼠经流感病毒感染后，小鼠的ＮＫ细胞杀伤活性增强，两天达高峰时ＮＫ细胞杀伤率达５８％。对照组正常小鼠ＮＫ细胞活性为２２％。另外，检测病毒注射后小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性随时间延长，吞噬功能也随之升高。
- 李燕段树学陆虹张陵林王新江黄敏宁安红张卓然李岩
- 关键词：免疫疗法小鼠甲型流感病毒
- 人冠状病毒HCoV-NL63和HCoV-HKU1常规RT-PCR与实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用比较被引量：23
- 2008年
- 分别设计HCoV-NL63和HCoV-HKU1特异的引物与荧光标记探针,并合成含靶基因的模板RNA,建立常规RT-PCR方法与实时荧光定量RT-PCR方法,对其灵敏性、特异性和可重复性以及用于临床样本的适用性等进行平行比较评价。结果表明:这两种方法皆可对HCoV-NL63或HCoV-HKU1进行特异性诊断,其中荧光定量RT-PCR方法检测灵敏度均可达10拷贝/25μL反应体积,不同批次重复检测结果间的变异系数均小于5%。上述方法应用于158份临床鼻咽拭子标本,其中荧光定量RT-PCR方法检出6份HCoV-NL63阳性标本,5份HCoV-HKU1阳性标本,而常规RT-PCR方法则分别检出HCoV-NL63阳性与HCoV-HKU1阳性各3份。对常规RT-PCR方法获得的阳性样品进行序列分析证实上述方法的可靠性。本实验成功建立了可用于临床标本检测的人冠状病毒HCoV-NL63和HCoV-HKU1常规RT-PCR方法与实时荧光定量RT-PCR检测方法,并初步证实荧光定量RT-PCR检测方法检出率明显高于常规RT-PCR方法,这为开展HCoV-NL63和HCoV-HKU1的流行监测及临床早期诊断提供了有效技术手段。
- 陆柔剑张陵林谭文杰周为民王仲彭堃阮力
- 关键词：人冠状病毒
- 一种用于检测人偏肺病毒核酸的引物和探针序列
- 一种检测用于人偏肺病毒核酸的引物和探针序列技术领域：1.生物技术2.病毒检测技术。本发明提供一种用于人偏肺病毒核酸real-time RT-PCR检测的引物和MGB探针序列，该序列是通过对已知的hMPV的N基因和L基因进...
- 崔丽瑾谭文杰陆柔剑张陵林周为民阮力
- 文献传递
- 乙型肝炎病毒表面抗原S和前S1融合基因转基因细胞系的建立与细胞性质的研究被引量：2
- 2000年
- 构建了 pCHBSSIG质粒 ,其特点是CMV立即早期启动子调控乙型肝炎 (乙肝 )表面抗原S +前S1融合基因在前 ,SV40早期启动子调控GS扩增基因在后 ,此质粒转化到CHO dhfr-细胞中 ,经克隆加MSX及MTX筛选、扩增 ,建立了 7个高效表达乙肝表面抗原S及前S1融合蛋白细胞系GdSS1,并检测了其中GdSS1 18细胞系的生物学特性 ,结果表明 :未发现微生物污染 ,无致瘤性 ,遗传稳定 ,电镜下可观察到 2 2nm的颗粒 ,纯化后的蛋白在SDS PAGE及Westernblot中显示出特异性的 2 7kD、30kD乙肝表面抗原S和前S1的融合蛋白带。主蛋白的反向被动血凝(RPHA)滴度为 1∶2 5 6～ 1∶5 12 ,前S1蛋白的ELISA滴度为 1∶12 8。
- 田淑芳刘文军杨芙蓉宗芳李军阮薇琴陈红王文王秀平张陵林阮力
- 2007年秋冬季北京地区成人发热就诊患者中人冠状病毒229E感染状况分析被引量：4
- 2009年
- 目的了解北京地区成人发热就诊患者中人冠状病毒HCoV-229E感染病原学、临床表现和流行病学特点。方法2007年10月至12月从北京地区发热且有呼吸道症状的就诊成人中采集158份鼻咽拭子标本，利用荧光定量RT—PCR法进行HCoV-229E筛查；利用常规PCR方法扩增HCoV-229E基因片段测序；对感染阳性患者进行HCoV-NL63、HCoV-HKU1及HMPV的共感染筛查、临床表现描述和流行病学特点分析。结果158份鼻咽拭子标本中荧光定量RT—PCR检测出103（65．2％）例HCoV-229E阳性；其中26例存在与HCoV—NL63（3例）、HCoV—HKU1（3例）及HMPV（20例）的混合感染；HCoV-229E阳性标本的临床表现以头痛（70．9％）、咽红（70．9％）、咽痛（69％）、寒颤（68％）、咳嗽（33％）、有痰（21．3％）、流涕（21．4％）和鼻塞（16．5％）为主，少量可见呕吐（6．8％）、呼吸困难（3．9％）和腹泻（1．9％）；统计学分析表明其感染与性别、年龄无关。结论人冠状病毒HCoV-229E感染在秋冬季成人发热就诊患者中为常见病原，可合并感染其他病毒。其临床表现呈上呼吸道感染特征。2007年秋冬季在北京地区成人中可能存在HCoV-229E局部流行。
- 陆柔剑张陵林谭文杰周为民王仲彭堃阮力
- 关键词：逆转录聚合酶链反应
- 哺乳动物细胞分泌的乙型肝炎病毒表面S+PreS1融合抗原的理化和生物学性状被引量：9
- 2002年
- 研究了哺乳动物细胞(转基因GdSS1-18细胞系)分泌的乙型肝炎(乙肝)病毒表面S+PreS1融合抗原(SS1)纯品的理化及生物学性状,结果表明:经HPLC柱层析呈现一个对称峰,证明HBsAg颗粒所带电荷的均一性;SDS-PAGE出现P24及P27条带,未出现Gp30的条带,凝胶扫描分析其各条带分别各占22 3%、77 7%、0%;West ernblot试验证实,P27和Gp30能与S及S1抗体结合,而P24条带仅能与S抗体结合,表明S、PreS1是特异性条带;N-末端的氨基酸序列与所用目的基因编码的序列相同;乙肝SS1融合抗原在4℃储存较稳定。动物实验结果表明:与单纯含S基因的参比疫苗相比,含SS1融合基因疫苗免疫Balb/c小鼠既产生S抗体,又产生S1抗体,S抗体的ED50滴度与参比疫苗相似,S1抗体产生早于S抗体。
- 田淑芳宗芳陈红王文张陵林王秀平杨芙蓉阮力
- 关键词：分泌乙型肝炎病毒理化性状生物学性状免疫原性
- HIV-1复制型DNA疫苗与非复制型重组痘苗病毒疫苗在小鼠体内细胞免疫效果的研究被引量：2
- 2011年
- 目的:用HIV-1复制型DNA疫苗和非复制型重组痘苗病毒疫苗(rNTV-C)进行单独免疫和联合免疫的研究(2种疫苗分别包含HIV-1 B'/C亚型的gp160、gag-pol、rev-tat-nef等6种基因),以了解这2种新型HIV疫苗单独免疫及联合免疫的效果,并为临床免疫方案的制定提供实验依据。方法:将HIV-1 DNA疫苗和rNTV-C疫苗免疫BALB/c小鼠,设计rNTV-C单独免疫组、DNA单独免疫组,以及DNA初免、rNTV-C加强的联合免疫组,并设计不同免疫途径和不同剂量的各种组合。用IFN-γELISPOT检测各组的细胞免疫效果,用统计学方法分析比较各组细胞免疫效果的差异。结果:DNA疫苗和rNTV-C疫苗单独免疫时,二者都能诱发针对各抗原的特异性免疫反应;联合免疫能够诱发比DNA或rNTV-C单独免疫都强的特异性细胞免疫反应。统计分析显示,2种疫苗采用肌肉注射途径的免疫效果显著高于皮内注射,1μg和5μg DNA疫苗的免疫效果差异不显著,而1×108 PFU的rNTV-C比2×107PFU的免疫效果要强。结论:联合免疫策略能够显著增强HIV-1疫苗各抗原的免疫原性,通过对2种HIV-1疫苗单独免疫及二者联合免疫的细胞免疫反应的分析比较,确定了较好的免疫方案,为疫苗临床前免疫效果评价和临床方案的制定提供了实验依据。
- 齐香荣高瑛瑛邓瑶陆柔剑孟昕张陵林王文陈红谭文杰阮力
- 关键词：HIV-1疫苗HIV-1
- 甲型H1N1流感病毒感染患者中人冠状病毒和人偏肺病毒感染情况的初步分析
- 2010年
- 目的了解北京地区部分甲型H1N1流感病毒感染确诊急诊患者中人冠状病毒HCoV—OCA3、HCoV-229E、HCoV—NL63、HCoV—HKU1和人偏肺病毒（HMPV）的感染情况和临床表现特点。方法从2009—10-11期间北京地区部分确诊感染甲型H1N1流感病毒病例中，选择采集32份鼻咽拭子标本，利用荧光定量RT—PCR法进行HCoV—OCA3、HCoV-229E、HCoV—NL63、HCoV—HKU1和HMPV筛查；对阳性患者进行临床表现初步分析。结果32份鼻咽拭子标本中荧光定量RT—PCR检出4例（12．5％）HCoV-229E阳性，1例（3．1％）HCoV—HKU1阳性，2例（6．3％）HMPV阳性，未检测到HCoV—OCA3和HCoV—NL63阳性；检出阳性标本的临床表现为急性呼吸道症状，病情较轻，病程多为1周左右。结论2009—10-11北京地区部分确诊的感染甲型H1N1流感病毒病例中存在有人冠状病毒或人偏肺病毒共感染的情况。
- 陆柔剑张陵林谭文杰王仲阮力彭堃
- 关键词：甲型H1N1流感人冠状病毒人偏肺病毒
