- 端粒酶逆转录酶启动子热点突变的ARMS-LNA-qPCR检测方法建立
- 2020年
- 目的建立一种定量检测端粒酶逆转录酶(TERT)启动子区-124bp(C/T)和-146bp(C/T)位点突变率的实时荧光定量PCR方法。方法以常规PCR扩增含有TERT热点突变位点的纯化产物作为检测标本,采用等位基因扩增阻滞原理(ARMS)的引物,并结合锁核酸(LNA)探针作为野生等位基因抑制子,建立实时荧光定量PCR的TERT启动子热点突变率检测方法(ARMS-LNA-qPCR)。在30例表观健康人确定检测下限。结果所建方法的突变率标准曲线为:-124bp(C/T)突变率%=10(0.262×ΔCt+4.325)(P<0.001,R2=0.999),-146bp(C/T)突变率%=10(0.261×△Ct+3.895)(P<0.001,R2=0.999)。在表观健康人中所确定的-124bp和-146bp检测下限分别是0.07%和0.05%。结论所建ARMS-LNA-qPCR的TERT热点突变检测方法具有定量检测突变率并适合临床常规开展的优势。采用普通PCR纯化产物作为检测标本,使得所建方法具有检测各种类型标本的普适性。
- 张洁李方齐长海梁国威
- 关键词：端粒酶逆转录酶荧光定量PCR肝细胞肝癌
- SEPTIN9与HOXA9基因甲基化在鉴别阑尾和卵巢来源腹膜假黏液瘤中的诊断价值
- 2024年
- 目的:腹膜假黏液瘤(pseudomyxoma peritonei,PMP)是一种罕见的腹膜恶性肿瘤综合征,其来源鉴别较困难。本研究旨在探讨SEPTIN9与HOXA9基因在阑尾黏液性肿瘤来源的PMP(appendiceal mucinous neoplasms-PMP,AMNs-PMP)与卵巢黏液性肿瘤来源的PMP(ovarian mucinous tumors-PMP,OMTs-PMP)中的甲基化水平及其对PMP鉴别的意义。方法:采用甲基化特异度聚合酶链反应(methylation-specific polymerase chain reaction,MS-PCR)检测SEPTIN9与HOXA9基因在正常阑尾(appendix control,APD control)组(n=10)、正常卵巢(ovary control,OV control)组(n=17)、AMNs-PMP组(n=40)及OMTs-PMP组(n=19)中的甲基化水平,同时对AMNs-PMP组及OMTs-PMP组的组织样本进行细胞角蛋白(cytokeratin,CK)7、CK20免疫组织化学检测。通过t检验分析SEPTIN9及HOXA9基因甲基化在AMNs-PMP组及OMTs-PMP组中表达差异并分析其与免疫组织化学联合检测的作用及价值。结果:AMNs-PMP组中SEPTIN9基因甲基化的阳性率明显高于OMTs-PMP组(92.5%vs 63.2%,P<0.01);OMTs-PMP组中HOXA9基因甲基化的阳性率显著高于AMNs-PMP组(94.7%vs 12.5%,P<0.001)。OMTs-PMP组中HOXA9基因甲基化的ΔCt值显著低于AMNs-PMP组(3.20±0.47 vs 8.63±0.61,P<0.001)。OMTs-PMP组中CK7的阳性率显著高于AMNs-PMP组(94.7%vs17.5%,P<0.001),AMNs-PMP组中CK20的阳性率显著高于OMTs-PMP组(97.5%vs 63.2%,P<0.001)。CK7(-)CK20(+)与SEPTIN9(+)HOXA9(-)基因甲基化在AMNs-PMP中诊断均有较高的敏感度(82.5%vs 87.5%)和特异度(均为94.7%);CK7(+)CK20(-)与SEPTIN9(-)HOXA9(+)基因甲基化在OMTs-PMP诊断中均有较低的敏感度(均为36.8%)、较高的特异度(97.5%vs 92.5%),而CK7(+)HOXA9(+)在与前2种组合特异度相似的情况下,其敏感度为89.5%,显著高于前二者。结论:SEPTIN9(+)HOXA9(-)可用于AMNs-PMP诊断,CK7(+)HOXA9(+)可用于OMTs-PMP诊断。SEPTIN9与HOXA9基因甲基化可成为AMNs-PMP及OMTs-PMP的潜在生物学标志物。
- 侯芳卢一艳齐长海李方任晓沙佘彬
- 关键词：甲基化表观遗传学假黏液瘤HOXA9
- 阑尾杯状细胞类癌7例临床病理分析被引量：6
- 2016年
- 目的探讨杯状细胞类癌（GCC）的临床病理特点。方法复习7例手术切除GCC病例,分析其临床资料、组织学、免疫表型及随访情况,结合相关文献进行讨论。结果 7例GCC中,女性2例,男性5例,平均年龄54岁,均为弥漫腹腔种植Ⅳ期,但首发症状不典型,3例为常规体检发现腹腔积液就诊。7例局灶均见经典GCC形态：印戒样细胞成巢团样排列浸润阑尾浆膜层,其中3例局灶排列呈不规则片状,核异型性显著。1例无伴发病变,独立引起腹膜假黏液瘤,黏液分布于细胞周围;余6例均伴发其他病变,其中1例伴发高分化神经内分泌肿瘤G1及血吸虫,另5例均伴有黏液腺癌。免疫组化显示神经内分泌标记均（＋）,Ki-67阳性率4%～71%,2例p53部分（＋）。随访4～18个月,2例因腹膜炎及肠梗阻死亡,5例带瘤生存。结论 GCC是一种在组织形态和免疫表型上具有外分泌和内分泌双重特点的肿瘤,临床症状不典型,应及时行病理确诊。GCC易伴发其他病变,黏液湖的分布方式能为其鉴别诊断提供一定依据,其与印戒细胞癌不易区分。
- 卢一艳齐长海郝志红李方侯芳于国吴晓瑞翟喜超
- 关键词：类癌杯状细胞阑尾印戒细胞癌腹膜假黏液瘤
- 腹膜假黏液瘤浆膜腔积液细胞学诊断价值被引量：3
- 2017年
- 目的探讨腹膜假黏液瘤(PMP)浆膜腔积液的细胞学诊断价值。方法分析39例腹膜假黏液瘤浆膜腔积液的细胞学涂片及细胞包埋蜡块的形态学及免疫组化。结果包埋蜡块的阳性率高于涂片阳性率。细胞学形态可根据组织学形态标准采取2级分类法,低级别细胞呈单排排列,核偏位、位于基底部,异型性不显著,胞质丰富,一侧胞质见黏液;而高级别细胞,核位置高低不一,异型显著,部分细胞排列成不规则镶嵌状细胞团,核大小不一,染色质粗糙,呈重度异型,个别细胞胞质可见黏液分泌,均可见黏液背景。包埋蜡块免疫组化显示肠源性标记CK7(-),CK20、villin、CDX-2和MUC-2(+),与组织学一致。结论浆膜腔积液的细胞学检查对腹膜假黏液瘤术前诊断具有一定价值。除了传统涂片,应尽量制作细胞学蜡块,以明确性质及来源。细胞学形态2级分类法与组织学分级符合率高,能为术中治疗方案的选择提供参考,并为无法手术患者提供诊断。
- 卢一艳齐长海李方侯芳郝志红庞少军翟喜超陈峰
- 关键词：腹膜假黏液瘤浆膜腔积液细胞病理学
- 细胞HE染色涂片与细胞蜡块检测晚期非小细胞肺癌胸腔积液标本中表皮生长因子受体基因突变被引量：6
- 2022年
- 目的:伴发胸腔积液的晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者已失去手术机会,表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)是EGFR敏感突变的晚期NSCLC患者的一线用药。但EGFR-TKIs治疗时或治疗后出现的疾病进展以及药物的更新迭代给临床诊治带来了挑战,需要对存档的胸腔积液细胞样本进行EGFR复检或比对研究。本研究采用细胞HE染色涂片与细胞蜡块两种制作方法对NSCLC胸腔积液样本的EGFR突变基因进行检测,分析两种保存方式、保存时间对胸腔积液细胞DNA质量的影响,以期探索出一条保存细胞学资料及充分利用细胞学档案资料的可靠途径。方法:选取2014年10月—2021年4月航天中心医院病理科接收的胸腔积液样本57例,所有样本同时制作细胞HE染色涂片与细胞蜡块。将57例配对的细胞HE染色涂片与细胞蜡块采用扩增阻碍突变系统-聚合酶链反应(amplification refractory mutation system-polymerase chain reaction,ARMS-PCR)技术进行EGFR基因突变检测。DNA检测浓度为2 ng/μL,细胞HE涂片与配对细胞蜡块DNA样本并排进行扩增。结果判读按试剂说明书要求,待测样本的8号孔外控循环阈值(cycle threshold,Ct值)在13~21之间为样本合格,EGFR基因突变Ct值<26时,判断为阳性;26≤Ct值<29为临界阳性,Ct值≥29为阴性。ΔCt值为突变Ct值与外控信号Ct值的差值。比较细胞HE染色涂片与细胞蜡块检测为阳性的ΔCt值。同时将57例患者按时间段分为4组:2014—2015年(n=10),2016—2017年(n=20),2018—2019年(n=17),2020—2021年(n=10)。比较不同时间段的检测结果。结果:57例晚期NSCLC患者中以胸腔积液为首发症状入院者42例,占73.7%;57例中37例发生EGFR突变,突变率64.9%;19del突变和L858R突变为主要的突变类型,分别占37.8%(14/37)和48.6%(18/37);37例突变患者中女性占56.7%(21/37);细胞涂片与配对的
- 侯芳齐长海卢一艳李方郝志红
- 关键词：表皮生长因子受体胸腔积液
- Muc-1、Muc-2、Muc5AC、Muc-6在增生性息肉、球样异性增生和胃印戒细胞癌的表达和意义被引量：1
- 2009年
- 目的研究癌前病变增生性息肉、球样异性增生和胃印戒细胞癌组织的粘蛋白表达规律和相关性及其临床病理意义。方法收集我院近5年的胃镜活检和肿瘤切除标本67例,其中增生性息肉20例,球样异性增生13例,胃印戒细胞癌34例,分别制作组织芯片。采用免疫组织化学(SP)方法检测各组中Muc-1、Muc-2、Muc5AC、Muc-6粘蛋白表达部位和强度。结果Muc-1、Muc-2在增生性息肉、球样异性增生和胃印戒细胞癌三者之间均存在相关性,随着病变发展,Muc-1表达率呈依次下调趋势。Muc-2表达率呈上调趋势。Muc5AC表达在增生性息肉与胃印戒细胞癌存在相关性,随着病变发展,Muc5AC表达率呈下调趋势。Muc-6与上述没有特殊相关性。结论Muc-1、Muc-2、Muc5AC有助于解释三者间存在增生-异常增生-癌的病理变化过程,进而便于对增生性息肉、球样异性增生癌前病变患者进行管理及定期随访。
- 张秀茹李方侯芳齐长海吴玉宁丁砚江
- 关键词：胃印戒细胞癌增生性息肉粘蛋白
- 阑尾锯齿状病变及息肉临床病理学分析
- 2023年
- 目的探讨阑尾锯齿状腺瘤及息肉(SL/Ps)的临床病理学特征。方法回顾2013-1-2022-8北京航天中心医院手术切除的93例SL/Ps患者的临床病理学资料。结果93例SL/Ps中增生性息肉(HPs)5例,锯齿状病变(SLs)54例,锯齿状病变伴异型增生(SLDs)34例。阑尾全部取材后,SL/Ps发病率为5.8%,病变累及盲端66例。SL/Ps上皮形态除锯齿状结构外,48例呈丝状乳头,13例呈短簇状,16例呈扁平;38例伴急性化脓性炎,15例伴憩室,14例伴壁内/外黏液。SLDs组在盲端累及、扁平结构、伴急性炎及壁内/外黏液的发生率上均高于SLs组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论全部取材有利于客观评价阑尾SL/Ps的流行病特征。病理诊断上,需同炎性刺激的黏膜反应性增生、低级别阑尾黏液性肿瘤及憩室等鉴别。
- 卢一艳王雅茜刘文婷方兰吕志勇李方齐长海李珂敏
- 关键词：增生性息肉憩室
- CK7、CK20、Villin、CDX-2、MUC-2、PAX8在卵巢原发性黏液性肿瘤和继发性腹膜假黏液瘤中的表达及鉴别诊断意义
- 2023年
- 目的探讨CK7、CK20、Villin、CDX-2、MUC-2、PAX8在卵巢原发性黏液性肿瘤(OPMN)和卵巢继发性腹膜假黏液瘤(OS-PMP)中的表达及鉴别意义。方法收集经组织学和临床资料证实的OPMN 22例,OS-PMP 31例,采用免疫组化EnVision两步法检测CK7、CK20、Villin、CDX-2、MUC-2、PAX8的表达。结果CK7、PAX8在OPMN中的阳性率显著高于OS-PMP(分别为100%vs.9.7%,63.6%vs.0)(P<0.01)。CK20、CDX2、MUC2在OSPMP中的阳性率显著高于OPMN(分别为100%vs.9.1%,100%vs.18.2%,100%vs.9.1%)(P<0.01)。Villin在OS-PMP中的阳性率显著高于OPMN(100%vs.68.2%)(P<0.05)。CK7、CK20、CDX-2、MUC-2在OS-PMP诊断中均具有较高的敏感性(分别为90.3%、100%、100%、100%)及特异性(分别为100%、90.9%、81.8%、90.9%)。而Villin、PAX8敏感度性(100%),但特异性较低(分别为31.8%、54.5%)。结论CK7、CK20、Villin、CDX-2、MUC-2、PAX8推荐用于任何临床或病理特征提示继发性起源的卵巢黏液性肿瘤。CK7、CK20、CDX-2、MUC-2是高度敏感性及特异性的免疫组化鉴别诊断标志物。
- 李方刘赛娜齐长海柏明见侯芳卢一艳郝志红李珂敏马瑞卿
- 关键词：腹膜假黏液瘤卵巢黏液性肿瘤
- 罕见表型的8p11骨髓增殖综合征的特征被引量：2
- 2021年
- 目的:提高对罕见表型的8p11骨髓增殖综合征(eight p11 myeloproliferative syndrome,EMS)临床表现、实验室检查特征、诊断及治疗的认识。方法:总结1例罕见累及T/B/髓三系的EMS病例临床、实验室特征及接受异基因造血干细胞移植治疗过程,同时结合既往文献报道的2例类似病例进行讨论。结果:患者骨髓检查表现为急性B淋巴细胞白血病,淋巴结活检提示T淋母/髓系双表型淋巴瘤,骨髓染色体检查发现8p11异常,RT-PCR检查提示BCR-ABL融合基因阴性,淋巴结FGFR1探针FISH提示存在FGFR1断裂,全外显子测序提示,FMNL3、NBPF1及RUNX1基因存在突变,患者在CR2状态下接受同胞全相合异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT),随访至2019年9月,患者仍无病存活。结论:EMS同时出现T系、B系及髓系的受累极其罕见,虽然可以进行针对FGFR1基因进行靶向治疗,但仍需积极考虑allo-HSCT。
- 薛松许焕霞张永平刘夫红卢一艳李方王艳平王程程贾晓鹏王静波
- 关键词：异基因造血干细胞移植
- 肝脾T细胞淋巴瘤成功行挽救性单倍体造血干细胞移植一例报告并文献复习被引量：1
- 2020年
- 目的探讨肝脾T细胞淋巴瘤(hepatosplenic T-cell lymphoma,HSTCL)的临床特征、诊断、治疗进展及挽救性造血干细胞在治疗HSTCL中的作用。方法报告航天中心医院1例挽救性单倍体造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)成功治疗罕见的αβ型HSTCL,回顾分析临床及实验室检查资料,并全面复习相关文献。结果患者移植后21 d(+21 d)白细胞植入,+32 d血小板植入,移植后未出现明显急性移植物抗宿主病,评估处于持续缓解状态,移植术后随访9个月余,无广泛慢性移植物抗宿主病表现,生存质量良好。结论HSTCL需考虑造血干细胞移植治疗,改良预处理方案的挽救性异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)有实际应用价值。
- 薛松张永平卢一艳李方刘夫红李婷婷刘圆圆王静波
- 关键词：肝脾T细胞淋巴瘤造血干细胞移植
