杨晓帆
- 作品数：35 被引量：96H指数：6
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金南京医科大学科技发展基金资助国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 人类系统性红斑狼疮血清对内皮(逆)穿越模型中树突状细胞表型成熟的影响被引量：9
- 2005年
- 目的:研究人类系统性红斑狼疮(systemiclupuserythematosus,SLE)血清对正常人单核细胞(monocyte,Mo)分化形成的树突状细胞(dendriticcell,DC)的表型成熟的影响。方法:分离正常人外周血单个核细胞(PBMC),加入内皮细胞穿越模型中,分别以正常人血清和SLE血清加入培养体系中,36h后收集2次穿越内皮单层得到的,经形态学鉴定的DC细胞,流式细胞术测DC的CD80、CD86、HLA鄄DR的表达情况。结果:SLE血清诱导的DC其CD80的表达水平明显低于正常人血清刺激组,而二者均高表达CD86、HLA鄄DR。结论:DC的表型成熟和血清环境有一定关系。
- 张江全季晓辉张明顺杨晓帆王慧娟顾镭王书奎
- 关键词：红斑狼疮树突状细胞单核细胞血清
- SLE患者血清中的IL-6对造血干细胞来源的树突状细胞分化发育的影响被引量：7
- 2007年
- 目的:观察系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者血清中的IL-6对脐血CD34+造血干细胞(Hematopoietic precursor cells,HPCs)来源的树突状细胞(Dendritic cells,DCs)分化发育的影响。方法:免疫磁珠法(MACS)分离纯化脐血CD34+HPCs,GM-CSF+IL-4+TNF-α方案诱导其分化形成DCs。在培养过程中,分别加入正常人血清和IL-6水平升高的SLE血清,并通过IL-6抗体的中和作用,观察IL-6对DCs分化发育的影响。流式细胞术检测DCs表型(HLA-DR、CD80、CD86、CD83、CD1a),细胞增殖/毒性试剂盒(CCK-8)分析DCs刺激同种异体T细胞增殖的能力,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测DCs分泌IL-12、IL-10、IFN-γ的水平。结果:SLE患者血清中的IL-6水平较正常人升高;在高IL-6的SLE血清作用下,脐血CD34+HPCs可分化形成不表达IL-10、IFN-γ的DCs,其HLA-DR、CD80、CD86的表达上调,刺激同种异体T细胞增殖的能力增强,但IL-12的分泌水平却有所下降。结论:SLE血清中显著升高的IL-6对CD34+造血干细胞来源的DCs的分化发育产生了异常影响,改变了DCs的特性,可能参与SLE的发生和发展。
- 张戎邢美芬顾镭杨晓帆王慧娟姜朋涛季晓辉
- 关键词：树突状细胞IL-6
- IL-17A基因敲除导致肾间质纤维化加速的分子机制
- 王慧娟王慧张璐杨晓帆孙彬周洪季晓辉
- 关键词：肾间质纤维化细胞外基质TGF-Β1
- SLE患者CD4^+CD25^-T细胞来源的体外诱导型Treg细胞IL-10表达特征的初步研究被引量：5
- 2017年
- 目的 :探讨白细胞介素(interleukin,IL-10)在系统性红斑狼疮(systemic lupus ergthematosu,SLE)患者体外诱导型调节性T细胞(induced regulatory T cell,i Treg)中表达的变化。方法:分离健康对照和SLE患者外周血单个核细胞,并进一步分离出CD4^+CD25^-T细胞,将其在体外以TGF-β诱导转化;用流式细胞术分析诱导转化后T细胞中CD25^+和CD25^-、Foxp3^+和Foxp3-细胞亚群胞内IL-10(introcellular IL-10,iIL-10)和细胞膜表面IL-10(membrane IL-10,m IL-10)的表达。结果:(1)SLE患者和正常人经诱导转化的CD4^+亚群细胞内CD25^+T细胞表达iIL-10均明显增高,且患者显著高于正常人;(2)同样,患者和正常人诱导后CD4^+亚群细胞内CD25^+T细胞表达m IL-10均明显增高,但患者与正常人表达水平相似;(3)SLE患者和正常人经诱导转化形成的CD4^+CD25^+亚群细胞内Foxp3^+T细胞表达iIL-10亦均明显增高,且患者显著高于正常人;(4)SLE患者和正常人经诱导转化形成的CD4^+CD25^+亚群细胞内Foxp3^+T细胞表达m IL-10也明显增高,但患者和正常人类似;(5)SLE患者以上各项改变均与SLE疾病活动性指数无相关性。结论:正常人经诱导转化形成的CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞与IL-10表达密切相关。SLE患者诱导转化后形成的i Treg细胞以及未转化的CD4^+CD25^-T细胞内表达iIL-10的水平均显著高于正常人;但是细胞膜上的m IL-10表达与正常人没有差异。
- 赵凌赵凌杨晓帆季晓辉
- 关键词：红斑狼疮调节性T细胞IL-10
- 系统性红斑狼疮外周血CD4^+CD25^-T细胞诱导适应性Treg细胞障碍与IL-2受体γ链表达缺陷被引量：5
- 2016年
- 目的研究适应性调节性T细胞(iTreg细胞)在系统性红斑狼疮(SLE)病理机制中的作用。方法根据SLE疾病活动度(SLEDAI)评分,将35例SLE患者(D组)分为非活动组(A组,12例)和活动组(B组,23例);另选取22例健康志愿献血者为正常对照组(C组)。用CD3抗体、CD28抗体、转化生长因子β(TGF-β)和IL-2诱导外周血CD4^+CD25^-T细胞,流式细胞术检测诱导转化获得的CD4+CD25+Foxp3+T细胞转化率、TGF-β受体和IL-2受体表达,并分析其与SLEDAI评分的相关性。结果与C组相比,B组CD4^+CD25^-T细胞经诱导后的CD4+CD25+T细胞比例降低[(9.74±20.50)%vs.(95.85±3.81)%](P<0.01)。D组诱导转化形成的iTreg细胞比例低于C组(P<0.01),且与SLEDAI评分呈负相关(r=-0.77,P<0.05)。D组CD4^+CD25^-T细胞中IL-2受体γ链表达低于C组(P<0.05),且与SLEDAI评分呈负相关(r=-0.66,P<0.05)。D组CD4^+CD25^-T细胞中TGF-β受体Ⅰ表达高于C组(P<0.05),但与SLEDAI评分无相关性(r=-0.27,P>0.05)。结论 SLE患者IL-2受体γ链表达缺陷所导致的IL-2受体信号受损可能引起iTreg细胞诱导形成障碍,从而参与SLE的发病机制。
- 徐安琪杨晓帆王慧娟张缪佳季晓辉
- 关键词：系统性红斑狼疮调节性T细胞白细胞介素2转化生长因子Β
- 系统性红斑狼疮患者体外诱导CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的研究
- 周小斌季晓辉杨晓帆徐安琪
- 关键词：红斑狼疮FOXP3白细胞介素2
- SLE患者外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞细胞因子分泌的改变被引量：4
- 2007年
- 目的研究活动性系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞白细胞介素(IL)-10、转化生长因子(TGF)-β、干扰素(IFN)-γ和IL-4分泌水平的改变。方法免疫磁珠分离活动性SLE患者和正常对照组CD4+CD25+调节性T细胞,流式细胞术(FCM)检测表达IL-10、IL-4或IFN-γ的阳性细胞百分率,体外培养两组CD4+CD25+调节性T细胞,酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养细胞上清液中IL-10、TGF-β和IFN-γ的水平。结果在CD4+CD25-和CD4+CD25+T细胞中未发现分泌IL-4的细胞亚群;SLE患者CD4+CD25+T细胞中分泌IL-10的细胞亚群比例较正常人减少(P<0.05);CD4+CD25-和CD4+CD25+T细胞中均存在分泌IFN-γ的细胞亚群,且SLE患者自分泌IFN-γ的细胞亚群比例增高(P<0.05)。SLE患者CD4+CD25+T细胞分泌IL-10和TGF-β较正常人均减少(P<0.05),自分泌IFN-γ增多(P<0.05)。结论活动性SLE患者CD4+CD25+T细胞存在细胞因子分泌功能异常,表现为TGF-β和IL-10分泌降低,IFN-γ产生增多。
- 杨晓帆张春兵季晓辉
- 关键词：系统性红斑狼疮细胞因子
- SLE患者外周血单核细胞LTβR的异常表达及其影响因素初探被引量：3
- 2010年
- 目的:观察淋巴毒素β受体(LTβR)分子在系统性红斑狼疮(SLE)外周血单核细胞上的表达情况,同时探索能够影响其表达的因素。方法:分离SLE患者及正常健康对照者的外周血单个核细胞,流式细胞术检测LTβR分子在单核细胞上的表达,免疫磁珠法分选出单核细胞,RT-PCR方法检测其mRNA的表达;同时在体外培养细胞的U937和THP1中观察脂多糖(LPS)、佛波酯(PMA)及地塞米松(DEX)对LTβR分子表达的影响。结果:SLE患者外周血单核细胞上出现LTβR分子的异常高表达,而正常人外周血单核细胞上没有表达;体外细胞培养发现,地塞米松对U937细胞上的LTβR的表达具有上调作用,而对THP1细胞和正常对照者外周血单核细胞没有上调LTβR的表达;PMA可使U937和THP1细胞膜上LTβR出现一过性的降低,但不影响其mRNA水平,对正常人单核细胞无影响;LPS对U937和THP1细胞及正常人单核细胞的LTβR表达均无影响。结论:LTβR分子在SLE患者来源的外周血单核细胞上具有异常的表达,该分子的表达可能不是仅仅由于单核细胞活化或应用激素类药物引起的;但地塞米松可能对发育早期的单核细胞的LTβR表达具有一定的上调作用。
- 刘金生印澄张戎杨晓帆王慧娟张缪佳季晓辉
- 关键词：系统性红斑狼疮单核细胞
- CD-1遗传背景小鼠EAE模型:遗传背景对临床表现的影响
- 2013年
- 目的:制作不同基因背景小鼠自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型,比较不同遗传背景小鼠发病、神经功能评分和病理变化的差异。方法:用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗原(MOG35-55)免疫C57BL/6和CD-1基因背景小鼠,用完全弗氏佐剂作为抗原载体,并在不同时间点用精制百日咳毒素增强免疫效果,建立自身免疫性脑脊髓炎模型;记录小鼠发病时间与表现,每天进行神经功能评分,并取其脑和脊髓组织进行病理学检查和以CD4、IL-17为靶标的免疫组化染色。结果:C57BL/6组小鼠发病高峰期出现于初次免疫后17～25 d,表现典型的拖尾、单侧或双侧后肢瘫痪等改变,神经功能评分在3分左右;CD-1组小鼠发病高峰期较C57BL/6组推迟,出现于免疫后35～40 d,可见相似的拖尾及偏瘫表现,神经功能评分在2.8分左右。病理检查可见C57BL/6模型小鼠脑、脊髓出现炎症性细胞浸润,而CD-1小鼠的炎性改变相对较轻、且主要出现于脊髓;罗克沙尔固蓝染色法鉴定显示,模型小鼠脑脊髓组织出现脱髓鞘病变,以C57BL/6小鼠更为严重。免疫组织化学法显示2种模型小鼠发病高峰期均存在不同程度的CD4+及IL-17+炎性细胞的浸润。结论:不同的遗传背景对EAE模型发病、临床表现和病理改变有明显影响;CD-1小鼠亦可运用于制作慢性迁延性EAE模型,更符合人类多发性硬化的特点。
- 王松顾冰洁张璐李冠宇杨晓帆王慧娟胡刚季晓辉
- 关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎C57BL
- 系统性红斑狼疮患者血清中α干扰素和白介素6、10与临床及免疫学指标相关性研究被引量：6
- 2008年
- 目的:通过对系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中异常表达的干扰素(IFN)-α、白介素(IL)-6、IL-10与多种临床与免疫学指标相关性研究,为探讨该细胞因子在SLE免疫紊乱中的作用奠定基础。方法:选择50例SLE患者,采用ELISA法测定血清中IFN-α、IL-6、IL-10水平,并分析其与SLE临床与免疫学指标的相关性。结果:①SLE患者血清中IL-6、IL-10水平均显著高于正常对照组,差异具有统计学意义。②SLE患者血清中IFN-α、IL-6、IL-10水平与SLE疾病活动度指数(SLEDAI)均呈正相关。③SLE患者血清中IFN-α、IL-6、IL-10水平与某些临床表现及免疫学指标具有相关性。结论:SLE患者血清中存在的多种细胞因子异常,对SLE的发生、发展、表现、转归及指导治疗都具有十分重要的意义。
- 顾镭张戎王慧娟杨晓帆张缪佳沈友轩季晓辉
- 关键词：Α干扰素白介素-6白介素-10
