公共文化服务平台

共 9 条记录，以下是 1-9

全选清除导出

排序方式：

端粒单链结合蛋白hPOT1核定位结构域的鉴定: 2004年; 目的 :鉴定端粒单链结合蛋白hPOT1核定位结构域。方法 :通过hPOT1的不同长度缺失突变体与EGFP绿色荧光蛋白融合 ,转染细胞后用荧光显微镜观察融合蛋白在细胞内的定位。结果 :确定了hPOT1进核序列是定位于第 35 5～ 375位氨基酸之间的富含碱性氨基酸序列 ,其中R3 72 ,R3 73 影响hPOT1的细胞核内定位。结论 :鉴定出hPOT1的核定位结构域 ,该结构域影响了hPOT1不同形式剪接体蛋白的细胞内分布。为进一步研究hPOT1在端粒末端调控中的作用提供了线索。; 林坚陈皓白云秀金蕊张彬黄翠芬黄君健; 关键词：HPOT1 端粒 DNA结合蛋白质类

人端粒酶催化亚基hTERT基因启动子的克隆被引量：30: 1999年; 为了确定人端粒酶催化亚基 h TERT基因的启动子结构特征 ,采用 Panhandle PCR技术 ,从正常人外周血单核细胞基因组 DNA中扩增 h TERT基因 5′端上游旁侧序列 ,结果获得了 h TERT基因翻译起始位点上游 2 0 90 bp的基因组 DNA序列。序列分析表明 h TERT基因的启动子区域缺少典型真核启动子的核心元件 ( TATA box和 CAAT box) ,但含有多个已知转录因子蛋白结合的核心序列 ,如 E box及 Sp1核心序列。提示 h TERT基因的表达可能受特殊的转录因子调控 ,这些转录因子的激活可能与癌变细胞中 h; 黄君健李杰之林坚蒋晓山高朝晖黄翠芬; 关键词：端粒酶 HTERT基因启动子

依赖端粒酶的端粒维持机制: 2004年; 端粒是真核生物染色体的末端重要结构复合物,对维持染色体稳定性起着重要作用。端粒酶的主要功能是复制端粒末端DNA,维持端粒长度。端粒酶活性调节与肿瘤发生和细胞衰老有着密切关系。本文简要综述近年来依赖端粒酶的端粒维持机理的研究进展。; 林坚黄君健黄翠芬; 关键词：端粒酶真核生物染色体 DNA 细胞衰老

人端粒酶催化亚基在小鼠胚胎干细胞中表达以及表达人端粒酶催化亚基的转基因小鼠的鉴定: 我们对在小鼠胚胎干细胞(mES)分化过程中端粒酶催化亚基的表达情况进行了初步的研究,将人端粒酶催化亚基(hTERT)转扩mES中,构建了表达人源端粒酶催化亚基的mES细胞.同时,构建hTERT的转基因载体,通过显微注射的...; 林坚; 关键词：人端粒酶催化亚基转基因小鼠生物学功能; 文献传递

人端粒保护蛋白hPot1的一种新选择性剪接体的克隆及鉴定被引量：2: 2004年; hPot1是端粒单链结合蛋白,在维持染色体末端的稳定性中发挥着重要作用。从前列腺癌细胞C4-2中提取总RNA,以反转录得到的cDNA为模板,扩增全长的hPot1cDNA,发现hPot1基因的一种新的剪接形式。这种新的剪接形式缺失了野生型hPot1基因的第2个外显子,并且造成了读码框架的改变,使翻译提前终止,表达出一段有45个氨基酸残基的短肽。进一步检测表明,这一hPot1mRNA新剪接体广泛存在于多种组织来源的细胞中,提示这一剪接形式可能是细胞调控hPot1功能的一种调节机制。; 林坚陈浩黄君健白云秀金蕊张彬韩素文黄翠芬; 关键词：人端粒保护蛋白 HPOT1 选择性剪接克隆染色体

GST/MKRN1融合蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备: 2006年; 目的:利用大肠杆菌BL21(DE3)表达GST/MKRN1融合蛋白,亲和层析分离纯化目的蛋白,进行动物免疫制备多克隆抗体。方法:MKRN1cDNA全长1449bp,编码482个氨基酸残基。将其基因片段克隆到pGEX-4T-1载体上,获得pGEX-4T-1-MKRN1原核表达重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,在大肠杆菌表达系统中获得可溶性表达,经谷胱甘肽Sepharose4B介质填充的层析柱分离纯化蛋白,制备抗原免疫动物,得到pGEX-4T-1-MKRN1多克隆抗体。结果:ELISA结果显示血清抗体效价可达到1∶256000。通过Western免疫印迹及免疫细胞荧光分析,自制的多克隆抗体能特异地与MKRN1蛋白相互作用,可用于免疫细胞化学分析。结论:制备了效价和特异性良好的抗MKRN1多克隆抗体,经实验验证获得的免疫血清能够满足针对MKRN1的Western免疫印迹和细胞免疫组化检测的实验要求,为今后深入研究MKRN1表达的组织分布、细胞内定位及与端粒酶催化亚基(hTERT)之间相互作用的生物学意义提供了有用的实验工具。; 白云秀金蕊陈皓林坚解跃华黄君健; 关键词：端粒酶催化亚基多克隆抗体

从动物组织提取高纯度总RNA方法的改进及应用被引量：28: 2002年; 从动物组织中提取总RNA是现代分子生物学研究中经常使用的重要实验技术,按常规方法获得的总RNA产品中常伴有大分子量染色体DNA污染。为此,我们摸索出了保证RNA制品纯度、质量和产量的DNA酶消化最佳反应条件。利用改良后的方法提取了小鼠脏器组织总RNA,进行了新基因mPC-1在小鼠脏器中表达的组织分布研究。; 李杰之常晓彤林坚黄翠芬周建光; 关键词：动物组织

端粒维持研究进展被引量：3: 2000年; 端粒是现代生物学的研究热点 ,与肿瘤发生、基因表达调控、衰老有着密切的关系。本综述介绍当前对端粒维持机理研究的进展。在端粒维持过程中有两类重要的蛋白 :端粒相关蛋白和端粒酶。端粒相关蛋白是直接或间接与端粒结合的蛋白 ,在维持端粒稳定性方面有重要作用。端粒酶 ,特别是其催化亚基hTERT ,在端粒延长过程中起着不可替代的作用 ,与细胞永生化和癌变密切相关。此外还介绍了在某些细胞中存在的不依赖端粒酶的端粒延长机制。; 林坚黄君健黄翠芬; 关键词：端粒端粒酶

肿瘤细胞中端粒酶催化亚基hTERT基因启动子结合因子的检测被引量：1: 2000年; 为了研究端粒酶催化亚基hTERT基因在癌变细胞中组成型表达的调控机制 ,采用凝胶阻滞电泳 (EMSA)实验方法检测人粒系白血病细胞HL 6 0、人红系白血病细胞K5 6 2、人肺癌细胞A5 4 9、人肝癌细胞HepG2及正常人肺成纤维细胞 2BS等体外传代的肿瘤和正常二倍体细胞核提取物中与hTERT启动子核心序列结合的核因子活性。结果在 4种实验肿瘤细胞中均可检测出与hTERT基因启动子结合的核因子活性 ,而正常二倍体细胞中则不存在这种活性的核因子。实验结果提示hTERT基因启动子结合因子可能是细胞癌变过程出现的特殊基因表达调控因子 ,与端粒酶在各种肿瘤细胞中广泛重新激活有关 ,有必要进一步分离鉴定这些肿瘤特异性的转录因子。; 黄君健李杰之周宇熙白云秀林坚蒋晓山黄翠芬; 关键词：端粒酶催化亚基转录因子肿瘤细胞启动子

全选清除导出

共1页<1>

林坚