邓继先
- 作品数：187 被引量：567H指数：12
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金山东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学化学工程更多>>
- 脂肪源性干细胞的多向分化潜力及应用前景被引量：11
- 2007年
- 脂肪组织中含有一类具有多向分化潜力的细胞,即脂肪源性干细胞,简称脂肪干细胞。其生物学性质与骨髓间充质干细胞相类似,并可向脂肪、骨、软骨、肌肉、内皮、造血、肝、胰岛和神经等多种细胞方向分化。由于脂肪组织在人体内储量丰富,获取简便创伤小,在组织工程、器官修复、基因治疗等方面都有着广阔的应用前景,因此脂肪干细胞已成为继骨髓间充质干细胞后干细胞领域另一个备受关注的热点。通过以分析脂肪干细胞的多向分化潜力,综述了这一领域最新的研究进展,并就其应用前景及目前研究中一些争议问题进行了探讨。
- 韩正滨陈红星邓继先
- 关键词：脂肪源性干细胞多向分化
- 精子头后部质膜融合蛋白fertilin的研究进展被引量：1
- 1998年
- 精子头后部(或赤道区)表面fertilin糖蛋白由相关的两个跨膜亚基α和β构成异二体形式。这两个亚基前体均含有金属蛋白酶区(met-alloprotease domain)和整联蛋白配体区(disin-tegrin domain),属于ADAMs gene家族。α和β前体分别在睾丸和附睾中从上述两区域连接处水解后,得到成熟型亚基。受精时,穿过透明带的顶体反应后精子借助β亚基的disintegrin肽段与卵母细胞表面的整联蛋白结合,同时fertilin结构发生变化,暴露出α亚基上潜在的融合肽段(90—111aa),并介导精子与卵母细胞发生质膜融合,最终完成受精过程。
- 苟克勉邓继先陈永福
- 关键词：精子
- 组织纤溶酶原激活剂突变体(La-tPA)转基因鼠的建立被引量：3
- 1999年
- 用羊β－乳球蛋白基因（ＢＬＧ）５区５×１０３ｂ（１０３ｂ，旧称ｋｂ）为调控序列，构建了乳腺表达组织纤溶酶原激活剂突变体（Ｌａ－ｔＰＡ）载体．对５４０枚小鼠受精卵进行显微注射，经ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测，获得６只整合有人Ｌａ－ｔＰＡ的转基因小鼠，整合率为３２％．
- 卢一凡邓继先程萱周江黄培堂
- 关键词：转基因鼠激活剂突变体
- 昆虫杆状病毒载体的细胞培养和重组蛋白生产被引量：10
- 1993年
- 利用杆状病毒载体和昆虫细胞生产重组蛋白的研究日益增多,本文就杆状病毒的宿主细胞种类、培养条件、大规模培养方法和虫体表达以及昆虫细胞对表达产物的翻译后修饰加工的研究现况进行了概述。
- 邓继先萧成祖
- 关键词：昆虫细胞重组蛋白细胞培养
- 球孢白僵菌毒素对昆虫体外培养细胞的超微结构和细胞内总蛋白的影响被引量：6
- 1999年
- 用吸附法从球抱白鹰菌（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ）的代谢产物中提取毒素，并将毒素作用于草地夜蛾（Ｓｐａｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）体外培养细胞Ｓｆ－２１细胞株，以研究球抱白僵菌毒素的昆虫致病机理．扫描和透射电镜观察结果表明，在毒素作用下，培养细胞的细胞膜、细胞核、线粒体和核糖体均有很大程度的损伤．聚丙烯酸胺凝胶电泳结果表明，其细胞内总蛋白的种类和含量均有所改变，进一步证明，细胞完整结构的破坏导致了细胞内物质环境稳定性的破坏．
- 武艺黄秀梨邓继先
- 关键词：球孢白僵菌毒素昆虫超微结构培养细胞
- 利用多重筛选机制提高山羊乳腺上皮细胞基因打靶的效率被引量：8
- 2005年
- 构建了山羊β 酪蛋白基因座基因打靶载体pGBC GFP neo,载体包含了正负筛选标记基因neo和tk,以及无启动子的GFP基因。打靶载体线性化后用脂质体包裹转染山羊乳腺上皮细胞,利用G418和GANC进行抗性细胞克隆的药物筛选,共得到抗性细胞克隆 51个,对抗性克隆利用激素诱导β 酪蛋白基因启动子指导GFP表达,得到GFP表达阳性细胞克隆 17个,对其中 4个生长状态良好的克隆PCR检测验证后用于核移植,克隆胚发育率为 59 5%,部分发育到桑椹胚或囊胚。
- 沈伟闵令江李兰潘庆杰吴晓洁周艳荣邓继先
- 关键词：山羊基因打靶乳腺生物反应器Β-酪蛋白基因
- 体细胞克隆猪的研究与展望被引量：2
- 2005年
- 用体细胞核移植的方法生产的克隆猪诞生至今已近5年,虽然同胚胎细胞核移植相比,体细胞核移植技术难度大,成功率低,但近年来用体细胞核移植技术克隆猪有了更深入的研究,在体细胞核移植基本机理和关键技术上取得了一定的进展。综述了用核移植的方法生产体细胞克隆猪的技术关键和难点及应用情况,并对提高猪体细胞核移植效率的策略进行了分析。
- 刘珠果邓继先
- 关键词：克隆猪体细胞核移植技术
- 序贯培养法对猪孤雌激活胚胎发育能力的影响被引量：3
- 2007年
- 经体外成熟、孤雌激活和培养获得猪胚胎,研究了不同培养体系、共培养体细胞和序贯培养对猪孤雌激活胚胎发育的影响。试验表明:孤雌激活卵母细胞在SOF+10%FCS培养体系中分裂效果最好,添加胎牛血清的NCSU-23和颗粒细胞对胚胎发育有促进作用,培养6d后发育到桑囊胚的比率增加(P<0.05)。在序贯培养的前3d,SOF培养基(不含葡萄糖)和颗粒细胞对胚胎的发育有促进作用,分裂率(P<0.05)和突破4细胞阻滞的数目显著增加,在培养的后3d,添加胎牛血清的NCSU-23和输卵管上皮细胞能支持较多胚胎发育到桑囊胚,桑囊胚的发育率为(59.5±3.2)%(P<0.05)。结果表明,SOF培养基和颗粒细胞+添加胎牛血清的NCSU-23和输卵管上皮细胞的序贯培养系统能较好的促进胚胎的发育。
- 刘珠果邱业锋沈晓峰阎新龙吴晓洁叶华虎林艳丽邓继先
- 关键词：卵母细胞孤雌激活胚胎发育
- 无血清培养基生产重组人红细胞生成素的纯化
- 1997年
- 用无血清培养基在生物反应器中培养CHO EPOC2细胞株 ,培养上清中重组人红细胞生成素表达水平达 1 0～ 2 1mg/L .培养上清经过三步纯化后纯度可达到 98%以上 ,比活性约为 1 5×1 0 5U/mg.纯化第一步使用反相柱层析 ,可将样品体积浓缩约 30倍 .取其收集液进行DEAE 离子交换柱层析 ,最后进行分子筛层析 ,全过程回收率为 4 0 %左右 .SDS PAGE表明 ,所制备终产品分子质量为 35～ 4 0ku ,等电聚焦方法测其等电点在 3 75～ 4 1 5之间 ,均属文献报道范围 ;ELISA和蛋白质印迹实验结果证明其具有天然红细胞生成素抗原性 ;采用溴化氰裂解方法做肽谱电泳 ,结果与理论推测相符 .该纯化路线简单、迅速、高效 ,重复性好 。
- 李琳邓继先卢建申周江
- 关键词：人红细胞生成素纯化
- 重组人红细胞生成素单克隆抗体的制备被引量：1
- 1995年
- 本文应用常规淋巴细胞杂交瘤技术制备了４株能稳定分泌抗人重组红细胞生成素（ｒＨｕＥＰＯ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的小鼠杂交瘤细胞系ＢⅡ１Ｂ５、ＤⅡ６Ｂ９、ＭⅡ１Ｈ４和ＧＩ３Ｅ７。用鼠单克隆抗体分型试剂盒鉴定，其分泌的ＭｃＡｂ的类分别是ＩｇＭ、ＩｇＭ、ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ。间接ＥＬＩＳＡ法测定细胞上清的效价为１×１０－２～１．２５×１０－４，腹水效价为１×１０－２～１×１０－８。培养上清经ＥＬＩＳＡ鉴定，与ＩＬ－２、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－α等细胞因子均无交叉反应，只与ｒＨｕＥＰＯ特异性结合。
- 杨琴邓继先程萱
- 关键词：红细胞生成素抗体单克隆抗体免疫测定
