公共文化服务平台

陈雅文: 作品数：25 被引量：23H指数：3; 供职机构：南开大学生命科学学院分子生物学研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金天津市21世纪青年科学基金更多>>; 相关领域：生物学医药卫生更多>>

合作作者

研究聚ADP核糖基化作用与细胞恶变关系的双基因真核表达重组体的构建: 1997年; 本文将聚ADP核糖聚合酶基因1．4kb部分序列反向插入真核表达载体pMAMneo和pSMG中，同时12位密码子突变的活化ras癌基因也一同克隆到上述载体中，从而获得具有不同真核基因筛选标记的双基因真核表达重组体pMAMneo－Cl．4－T24，pMAMneo－Cl.4－arT24，及pSMG－Cl．4-T24，上述质粒的构建成功为研究聚ADP核糖基化作用与细胞恶变的关系提供了一种新的分子模型．; 杨其伟张学陈雅文董元舒陈德风; 关键词：癌基因细胞恶变

PARP酶抑制剂未引起整合的外源LacZ基因的丢失被引量：2: 1997年; 使用聚ADP核糖聚合酶（PARP）NAD位点抑制剂苯甲酞胺（BA）研究了降低PARP酶活性对外源LacZ基因整合稳定性的影响．利用DNA体外重组技术将LacZ基因全序列插入到真核表达载体pSV2neo的HindⅢ位点，构建了一个具有真核细胞neo基因筛选标记和LacZ基因的真核表达重组体pSV2neo-beta-gal．将该重组体导入HeLa细胞，经G418筛选获得了能稳定表达β-半乳糖苷酶的HeLa转化细胞系HeLa-beta-gal．使用PARP酶抑制剂苯甲酸胺处理细胞5周，随后进行细胞基因组Southern杂交分析与细胞内容物β-半乳苷酶的活性检测．结果表明，经BA处理的HeLa-beta-gal细胞β-半乳糖苷酶的活性及杂交带密度与未经BA处理的HeLa-beta-gal细胞相比未有明显区别．结合以前的结果可以认为，PARP酶抑制剂BA并不能导致所有外源基因的丢失，且使用PARP酶抑制剂BA引起外源基因的丢失具有选择性．; 杨其伟陈雅文张学陈德风张自立; 关键词：LACZ基因 PARP抑制剂

针对点突变癌基因转录物的核酶细胞内性质的研究被引量：2: 1996年; 前文［１］已证实在体外（ｉｎｖｉｔｒｏ）实验接近生理环境的条件下，本室设计、合成并克隆到的核酶能够高效选择性的定点切割Ｔ２４－ｒａｓ活化癌基因转录物。在此基础上，为阐明该核酶在体内（ｉｎｖｉｖｏ）的生理活性，本文又进一步把核酶基因片段克隆在真核表达质粒ｐＳＭＧ上，并将重组质粒以磷酸钙沉淀法转染由Ｔ２４－ｒａｓ基因诱导的转化细胞系。在细胞和分子水平上检测了核酶在真核细胞内的生物学活性：表现为各恶性转化细胞系的形态特征逆转，生长速度减慢，并呈现出重叠生长减弱恢复接触抑制的趋势，细胞凝集行为接近正常、软琼脂集落形成能力下降；同时，引物延伸实验结果也表明：在体内实验条件下，核酶能够特异性切割点突变Ｔ２４－ｒａｓ癌基因转录物，抑制癌变细胞的恶性行为，使其得到一定程度的逆转。; 刘戈陈雅文赵西林董元舒陈德风; 关键词：核酶体内活性癌基因转录物

限制酶识别序列外DNA甲基化生物功能探索被引量：1: 1996年; 限制酶识别序列外ＤＮＡ甲基化生物功能探索陈雅文，孙梅，刘英苗，陈德风（南开大学分子生物学研究所，天津３０００７１）Ａｂｓｔｒａｃｔ．Ｉｎ１９９１，ｗｅｆｏｕｎｄａｎｄｃｏｎｆｉｒｍｅｄｔｈａｔｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｅｎｄｏｎｕｃｌｅａｓｅＰｖｕⅡｃｌ...; 陈雅文孙梅刘英苗陈德风; 关键词：DNA 限制酶甲基化

特异切割点突变癌基因转录物的核酶设计与克隆被引量：1: 1994年; 按“锤头结构”模型设计、合成,并筛选到了针对活化癌基因T24-ras第十二位密码子G→T点突变的核酶克隆。在镁离子存在条件下,该核酶能选择定点切割T24-ras转录物而对正常C-Ha-ras转录物不起任何破坏作用;在接近生理环境及C-Ha-ras与T24-ras mRNA同时存在条件下,该核酶仍能有效选择性切割突变基因产物。这为利用核酶技术治疗因基因突变引起的机体病变提供了现实的可能性。; 赵西林孙宝勇陈雄伟陈雅文陈德风陈文杰宋丹英宋增璇; 关键词：核酶体外转录基因治疗癌基因

聚离子亚基化合物介导的基因转移方法可用于外源基因的瞬时表达: 1998年; 利用聚离子亚基化合物介导的基因转移方法，研究了外源β－半乳精苷酶报告基因的瞬时表达．结果表明聚离子亚基化合物介导的基因转移方法可用于外源基因的瞬时表达研究，而且在相同的条件下，用该方法在NIH3T3细胞和PA317细胞中对报告基因转移的效率要高于磷酸钙法和脂质体法．实验结果还表明聚离子亚基化合物的结构影响外源基因转移效率．; 史国利游环宇赵立青陈雅文陈德风; 关键词：基因转移外源基因

降低PARP酶活性对培养细胞SCE及微核效应的影响被引量：1: 1996年; 聚腺苷二磷酸核糖基化作用是细胞内的一种重要的核蛋白转译后加工修饰，它参与细胞内很多重要的生物事件．催化该反应的酶是聚腺苷二磷酸核糖合酶（ＰＡＲＰ），底物为ＮＡＤ．本文使用ＰＡＲＰ酶的抑制剂苯甲酰胺处理培养细胞，研究了降低ＰＡＲＰ酶活性对培养细胞姐妹染色单体交换及微核效应的影响，为全面评价ＰＡＲＰ酶抑制剂在细胞内的功效打下基础．; 杨其伟陈雅文宋智陈德风; 关键词：苯甲酰胺细胞 SCE PARP 酶活性

限制性核酸内切酶PvuⅡ识别序列外甲基化抑制其酶切活性的分子机理研究: 1997年; DNA甲基化是DNA分子上重要的碱基修饰方法之一,它可以影响核酸的结构及其与蛋白质的相互作用,由此影响基因的表达,关于甲基化与限制性核酸内切酶之间的关系,以往的研究表明:限制性核酸内切酶识别序列内DNA甲基化可特异性地抑制该酶的酶切活性。; 陈德风孙梅刘英苗史国利陈雅文; 关键词：甲基化核酸内切酶

利用反义RNA探索外源基因丢失的分子机理: 1998年; 利用反义RNA技术研究了调控PARP酶基因的表达对外源基因整合稳定性的影响。将PARP基因cDNA的部分序列反向插入到真核表达载体pSMG中，将重组质粒分别导入携带有外源基因的细胞中，地塞米松诱导反义PARP基因的表达后，进行Southern杂交检测。结果表明，外源基因仍保留在基因组中，这意味着外源基因的丢失并不是由于单一PARP酶活性降低所致。; 杨其伟赵立青董元舒陈雅文陈德风; 关键词：反义RNA 基因丢失基因

逆转录病毒载体设计对ANTI-RAS核酶基因转移效率的影响被引量：1: 1997年; 将anti-ras核酶基因R8克隆于不同的逆转录病毒载体，并导入逆转录病毒包装细胞系PA317，得到具一次感染性的缺失性病毒，通过测定病毒滴度选择R8基因的高效重组逆转录病毒载体．; 赵立青张丽陈雅文史国利游环宇陈德风; 关键词：逆转录病毒载体核酶基因转移