杜君
- 作品数：11 被引量：12H指数：2
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- 相关领域：生物学医药卫生理学更多>>
- 原癌基因LMO2短剪切模式的结合蛋白鉴定及功能分析
- 2008年
- 目的研究原癌基因LMO2短剪切模式（LMO2-C）的结合蛋白在白血病细胞K562中的表达及功能分析。方法利用麦芽糖结合蛋白（MBP）沉淀技术和哺乳动物双杂交技术研究LMO2-C的结合蛋白在K562细胞中的表达；半定量RT-PCR检测过表达LMO2-C的K562细胞中红系发育的标志性基因GPA的表达水平。结果MBP原核表达系统成功表达并被纯化出可溶性MBP-LMO2-C结合蛋白，利用MBP沉淀技术验证了LMO2-C能与K562细胞中内源性的GATA-1、LDB1结合；哺乳动物双杂交试验进一步证明LMO2-C能与LDB1结合，而且其过表达能够抑制LMO2-L与LDB1的结合，抑制率达（81．13±0．68）％；半定量RT-PCR结果显示在过表达LMO2-C的K562细胞中，GPA基因相对表达水平下调（51．00±1．58）％。结论LMO2-C能结合K562细胞中内源性GATA-1、LDB1蛋白，并能下调红系发育的标志性基因GPA的表达。
- 袁伟杨爽孙伟杜君翟春利王兆琦朱天慧
- 关键词：基因双杂交系统技术
- 应用SDS-PAGE技术分析重组蛋白的聚集性被引量：1
- 2007年
- 应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳技术分析重组蛋白质的表达水平以及纯化的结果时,发现其结果可以判定重组蛋白质的聚集状况,对聚集产生的原因及意义进行了讨论。
- 乔玉欢雷荣悦杜君朱天慧
- 人骨形态发生蛋白6(hBMP6)在毕赤酵母中的分泌表达被引量：1
- 2010年
- 以重组质粒pcDNA6A-BMP6为模板PCR扩增hBMP6成熟肽cDNA编码序列,将该序列克隆到酵母分泌表达表达载体pPIC9K中.重组质粒pPIC9K-hBMP6经SacI酶切线性化,电击转化毕赤酵母GS115,PCR法筛选阳性转化子,利用梯度浓度G418筛选到七株高拷贝整合的阳性转化子。用甲醇进行诱导表达,SDSPAGE及Western-blot检测结果表明hBMP6成熟肽以分子量约为34和18 kD两种不同糖基化修饰的单体形式存在,具有良好的免疫原性.
- 米东杨爽胡芬张杰乔玉欢杜君朱天慧
- 关键词：毕赤酵母PPIC9K分泌表达
- 表达外源rhBMP2的CHO细胞株稳定性分析被引量：2
- 2008年
- 骨形态发生蛋白2(BMP2)属于TGF-β超家族,是诱导成骨活性最强的BMPs之一,具有广泛的临床应用的前景。本实验室已成功构建高效表达rhBMP2的重组CHO细胞株,现选取其中一株表达量最高的细胞rCHO(hBMP2)-C8进行长期体外培养,并在培养过程中比较了添加和去除压力筛选中使用的MTX对细胞生长,rhBMP2基因拷贝数及rhBMP2分泌蛋白表达的影响;检测了该细胞株在无血清培养基中可以连续表达rhBMP2的时间以及培养基中rhBMP2的温度敏感性等等。该研究为进一步采用动物细胞规模化培养技术生产rhBMP2奠定了基础。
- 翟春利闫继东杨爽杜君袁伟王兆奇朱天慧
- 关键词：BMP2稳定性
- 不同蛋白标签对LMO2融合蛋白沉淀实验的影响被引量：3
- 2008年
- 融合蛋白沉淀技术是一种用来研究蛋白质相互作用的新的体外实验技术,通常利用蛋白亲和标签与探针蛋白融合表达来钓取未知相互作用蛋白或验证已知蛋白间的相互作用,其中以谷胱甘肽巯基转移酶(GST)标签最为常用。LMO2(由LIMonly缩写得名,也称Ttg-2或Rbtn2)是一种小分子量难溶蛋白。利用原核系统分别表达了含有GST和麦芽糖结合蛋白(MBP)两种标签的LMO2融合蛋白,发现GST-LMO2融合蛋白以包涵体的形式表达,而MBP-LMO2融合蛋白则能够以可溶形式表达,而且MBP-LMO2的表达量明显高于GST-LMO2融合蛋白。将可溶性的MBP-LMO2融合蛋白和复性后的GST-LMO2融合蛋白分别用于钓取K562细胞中LMO2的结合蛋白,结果显示二者都可以结合K562细胞中内源性的GATA1蛋白,而MBP-LMO2融合蛋白捕获的GATA1蛋白明显多于复性后的GST-LMO2融合蛋白。这一结果提示,在研究一些分子量小、疏水性强的蛋白质时改变标签蛋白可能是一种有益的尝试。
- 袁伟孙伟杨爽闫继东翟春利杜君王兆琦安迪朱天慧
- 关键词：麦芽糖结合蛋白
- 一种非侵入式力和电阻抗参数联合监测的微创手术工具
- 一种非侵入式力和电阻抗参数联合监测的微创手术工具。解决腹腔镜下医生手触觉丧失无法进行组织识别的问题。该工具包括一个不锈钢圆筒，不锈钢圆筒内安装有一个电极支撑柱，支撑柱由塑料塞固定在圆筒内，电极支撑柱上设置有两根用于连接阻...
- 代煜杨庆杜君张建勋
- 文献传递
- 姜黄素促进海马神经发生改善糖尿病大鼠空间记忆损伤被引量：5
- 2016年
- 目的：研究姜黄素对糖尿病脑病大鼠空间学习记忆障碍的改善作用及其机制。方法制备链脲佐菌素诱导的大鼠糖尿病脑病模型,以低、中、高剂量的姜黄素治疗12周,检测空腹血糖和胰岛素水平,Morris水迷宫检测姜黄素对糖尿病脑病认知障碍的改善作用,BrdU标记法检测姜黄素对糖尿病大鼠海马神经发生的影响,Western印迹法检测海马脑源性神经营养因子（ BDNF）、环磷腺苷反应元件结合蛋白（CREB）的表达。结果姜黄素高剂量组明显降低糖尿病大鼠的血糖[（25.73±3.62对29.81±4.22） mmol/L,P〈0.05]、升高血清胰岛素水平[（11.98±2.94对5.37±1.83） mU/L,P〈0.05]。姜黄素显著改善糖尿病大鼠空间记忆障碍,促进糖尿病大鼠海马齿状回的神经发生（每张海马切片的BrdU阳性细胞数38.33±3.51对20.34±2.08,P〈0.01）,增加海马区BDNF的蛋白水平（P〈0.05）和CREB的磷酸化（P〈0.05）。结论姜黄素通过调控BDNF/CREB通路促进海马区神经发生,从而改善糖尿病脑病大鼠的空间记忆障碍。
- 朱艳娟杜君朱艳香单春艳
- 关键词：糖尿病脑病神经发生姜黄素
- DeltaEF1在成骨细胞分化过程中的功能研究
- 杨爽朱天慧张杰袁伟杜君翟春利王兆琪
- 本文研究了deltaEF1在调控rhBMP-2诱导成骨细胞分化过程中所发挥的功能，以及deltaEF1EF1在BMP/Smad信号转导途径中的呈递关系及与其他信号转导途径的相互作用（crosstalk），为进一步阐明δE...
- 关键词：
- 关键词：成骨细胞骨质疏松
- 基于后验贝耶斯拟似然线性模型变量选择
- 在构造一般的回归模型过程中，包括线形模型，广义线形模型和非线性回归模型，在最初的阶段需要大量的预测数据来减少可能的偏差.为了提高可预测性和减少估计和预测的方差，我们通常可以删除一些不显著的变量，来获得一个最优的变量子集。...
- 杜君
- 文献传递
- 一种非侵入式力和电阻抗参数联合监测的微创手术工具
- 一种非侵入式力和电阻抗参数联合监测的微创手术工具。解决腹腔镜下医生手触觉丧失无法进行组织识别的问题。该工具包括一个不锈钢圆筒，不锈钢圆筒内安装有一个电极支撑柱，支撑柱由塑料塞固定在圆筒内，电极支撑柱上设置有两根用于连接阻...
- 代煜杨庆杜君张建勋
- 文献传递
