冷冰
- 作品数：7 被引量：18H指数：3
- 供职机构：第二军医大学长征医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会科研基金更多>>
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- 水飞蓟素对雷帕霉素诱导的内皮祖细胞凋亡和生长抑制的拮抗作用被引量：4
- 2013年
- 目的：水飞蓟素对雷帕霉素诱导的内皮祖细胞（EPCs）凋亡和生长抑制的拮抗作用。方法：通过密度梯度离心法分离、培养、鉴定得到EPCs；在EPCs培养物中加入不同浓度（0、01、1、10、100 ng/ml）的雷帕霉素干预24 h和加入（1 ng/ml）雷帕霉素干预不同时间（0 、6、12、24、48 h）。收集细胞检测其增殖和迁移能力。在EPCs培养物中加入不同浓度（0、25、50、100 μg/ml）的水飞蓟素干预24 h后，收集细胞检测其增殖、迁移和凋亡的水平。在EPCs培养物中同时加入（1 ng/ml）雷帕霉素和不同浓度（25、50、100 μg/ml）水飞蓟素干预24 h后，收集细胞检测其增殖、迁移、凋亡和体外血管生成的能力。结果：与未药物干预的EPCs培养物相比较，雷帕霉素（1、10、100 ng/ml）能抑制EPCs增殖和迁移，并随干预浓度的增加和干预时间的延长而增加（P〈0.05）。水飞蓟素干预24 h后，50 μg/ml和100 μg/ml的水飞蓟素可明显增加EPCs增殖和迁移的能力（P〈0.05），25～100 μg/ml的水飞蓟素可明显抑制EPCs凋亡（P〈0.05），并呈浓度依赖性。EPCs在加入雷帕霉素（1 ng/ml）和不同浓度水飞蓟素（25、50、100 μg/ml）共同干预24 h后，50 μg/ml和100 μg/ml的水飞蓟素都可明显改善雷帕霉素对EPCs的促凋亡作用，并能逆转雷帕霉素对EPCs增殖、迁移和血管形成能力的抑制作用（P〈0.05）。结论：雷帕霉素能抑制EPCs增殖和迁移，并呈浓度和时间依赖性。水飞蓟素能增强EPCs增殖和迁移，抑制其凋亡，并呈浓度依赖性。水飞蓟素能抑制雷帕霉素对EPCs的促凋亡作用，并能逆转雷帕霉素对EPCs增殖、迁移和血管形成能力的抑制作用。
- 张鹏乔昆任雨笙梁春冷冰吴宗贵
- 关键词：内皮祖细胞雷帕霉素水飞蓟素增殖
- 水飞蓟素对内皮祖细胞增殖、迁移功能的影响研究被引量：5
- 2014年
- 目的通过体外培养、鉴定内皮祖细胞（EPCs），进一步研究水飞蓟素对EPCs活性和功能的影响，为进一步优化EPCs治疗缺血性疾病提供重要的理论依据。方法通过密度梯度离心法分离、培养、鉴定得到EPCs；在EPCs中加入不同浓度（O、25、50、100μg／mL）水飞蓟素干预24h后，检测细胞增殖、迁移和凋亡水平。结果与对照组比较，水飞蓟素干预24h后，50～100μg／mL的水飞蓟素可明显增加EPCs的增殖和迁移能力（n=6，P％0．05），25～100μg／mL的水飞蓟素可明显抑制EPCs的凋亡（n=6，P％0．05），并呈浓度依赖性。结论水飞蓟素可呈浓度依赖性增强EPCs的活性和功能。
- 张鹏乔昆任雨笙梁春冷冰吴宗贵
- 关键词：内皮细胞干细胞水飞蓟素细胞增殖细胞运动
- 脂联素对高糖刺激下内皮祖细胞的作用及其可能的作用机制被引量：1
- 2013年
- 目的:研究脂联素(adiponectin,APN)对高糖刺激下内皮祖细胞(Endothelial Progenitor Cells,EPCs)的作用,并探讨其可能的机制。方法:密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,经含血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和100 ml/L胎牛血清的M199培养基培养7d,贴壁细胞进行形态学、流式细胞仪测细胞分子标志物(CD34、CD133和KDR)和激光共聚焦倒置显微镜下观察培养细胞摄取ac-LDL和结合UEA-I经何种方法鉴定为EPCs。细胞同步化后,将其随机分为7组:正常糖浓度对照组(5.5 mmol/L)、高渗对照组(5.5 mmol/L葡萄糖+24.5mmol/L甘露醇及其浓度)、高糖(30mmol/L)组及高糖APN干预组(30 mmol/L葡萄糖合并APN,1.25、2.5、5、10μg/ml)。干预48h后,分别采用MTT比色法、Transwell小室检测EPCs的增殖、迁移;以Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒处理细胞,流式细胞仪检测EPCs的凋亡;用荧光探针(DCFH-DA)检测法进行细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测。结果:①经密度梯度离心法分离出的外周血单个核细胞培养7d后,细胞集落增加明显,梭形细胞增多并呈交叉性生长;用激光共聚焦倒置显微镜观察,细胞摄取DiI-acLDL呈红色荧光,摄取FITC-UEA-I呈绿色荧光,摄取DiI-acLDL并结合FITC-UEA-I的细胞呈黄色荧光,流式细胞仪分析结果提示:细胞表达KDR(92.32%)、CD133(10.7%)、CD34(23.3%),证实培养的细胞是正在分化的EPCs。②随着糖浓度的增高,EPCs的增殖能力下降,凋亡、ROS水平增加(P<0.01);当糖浓度为30 mmol/L与50 mmol/L时,两者相比对EPCs的影响无统计学差异。③与正常糖浓度对照组相比,高渗对照组EPCs的增殖、迁移、凋亡和ROS水平无统计学差异。在30 mmol/L葡萄糖条件下,EPCs的数量和迁移功能较正常对照组明显下降,细胞凋亡增多,不同浓度APN干预后能明显提高高糖损伤后EPCs的功能(P<0.05,P<0.01),并随着浓度的增加,EPCs的增殖与迁移能力增高,凋亡、ROS水平下
- 冷冰张鹏任雨笙梁春曹智勇吴宗贵
- 关键词：脂联素葡萄糖
- 颅内硬脑膜动静脉瘘(DAVF)血管内治疗入路选择及指征上海复旦大学附属华山医院神经外科
- 冷冰宋冬雷田彦龙陈功顾宇翔徐斌
- 利用自体血清培养人外周血内皮祖细胞被引量：3
- 2012年
- 背景:传统方法培养人外周血来源内皮祖细胞操作复杂,费用大,细胞获得率较低。目的:利用自体血清培养人外周血来源内皮祖细胞,并鉴定其功能。方法:采用密度梯度离心法从人外周血分离得到单个核细胞,体外培养分化为内皮祖细胞。按培养基条件不同分为EGM-2MV组、添加自体血清组(M199+体积分数10%自体血清+胰岛素样生长因子)、添加胎牛血清组(M199+体积分数10%胎牛血清+血管内皮细胞生长因子+碱性成纤维细胞生长因子+胰岛素样生长因子+表皮生长因子)。观察内皮祖细胞增殖、迁移能力;采用细胞形态观察、双荧光染色法及流式细胞仪等技术对培养的内皮祖细胞进行鉴定。结果与结论:培养第7天,EBM-2MV组和添加自体血清组细胞增殖能力和迁移率都优于添加胎牛血清组(P<0.05)。每组细胞经结合Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白和异硫氰酸荧光素标记的荆豆凝集素双色荧光染色鉴定后双阳性率>80%,免疫细胞化学检测显示每组细胞CD133,CD34和KDR的表达均为阳性。证实在M199培养液中添加自体血清是一种简单、高效的培养内皮祖细胞方法。
- 张鹏任雨笙梁春冷冰曹智勇吴宗贵
- 关键词：内皮祖细胞细胞培养人外周血自体血清干细胞培养干细胞
- 脂联素与心血管疾病的研究现状与展望被引量：6
- 2011年
- 肥胖与心血管疾病及代谢紊乱密切相关。脂联素是一种脂肪源性血浆蛋白,在与肥胖相关的代谢紊乱及疾病中含量降低,低脂联素水平与肥胖相关的心血管疾病危险性增加有关。有研究表明,脂联素可直接作用于心肌及血管细胞发挥作用,可通过多种机制保护心血管系统。其中主要包括调节一磷酸腺苷活性蛋白酶介导的信号通路、抑制炎症与促进内皮细胞功能等。脂联素所共有的调节代谢、抗炎及血管保护、心肌保护作用,可为临床治疗代谢综合征性心血管疾病,提供新的干预靶点和治疗思路。
- 冷冰张鹏任雨笙
- 关键词：脂联素心血管疾病肥胖
- 内皮祖细胞与支架术后再内皮化的研究进展
- 2011年
- 冠脉内支架置入术改变了冠心病的治疗格局,然而再狭窄和晚期支架内血栓形成是影响介入治疗疗效及临床应用的主要障碍。内皮祖细胞可以通过再内皮化作用有效地防止支架置入术后再狭窄与晚期血栓的发生,为冠心病的介入治疗提供广阔的应用前景。本文就近几年内皮祖细胞在再内皮化治疗方面的最新进展及存在的问题做一综述。
- 张鹏吴建祥冷冰任雨笙
- 关键词：内皮祖细胞支架置入再狭窄再内皮化
