李春华
- 作品数：12 被引量：37H指数：3
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- 猪旋毛虫与常见寄生虫交叉反应试验报告
- 1993年
- 用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法对猪旋毛虫等常见寄生虫的交叉反应试验结果表明,猪旋毛虫与猪的肺丝虫、蛔虫、囊虫及细颈囊尾蚴均无交叉反应。
- 王克领李春华马增全阎玉河袁文甫许威光
- 关键词：猪病旋毛虫寄生虫
- 病鸡血清中鸡传染性贫血病病毒DNA的PCR扩增及抗体的ELISA检测
- 1995年
- 根据鸡传染性贫血病病毒（ＣＡＶ）的基因结构，设计并合成一对限制扩增长度为０．６８ｋｂ的ＰＣＲ引物．直接对临床可疑病鸡的血清进行靶ＤＮＡ的ＰＣＲ扩增．在不同地区的３批样品中，有２批扩增出一二分子量接近０．７ｋｂ的单一特异性ＤＮＡ片段．用限制酶ＢｇｌⅡ消化ＰＣＲ产物．可获得分子量分别为０．３３ｋｂ和０．３５ｋｂ两个ＤＮＡ片段，其酶切位点与靶ＤＮＡ的相吻合．将ＰＣＲ扩增为阳性的病料接种６日龄ＳＰＦ鸡胚，并取其１８日龄胚肝和由接种鸡肛孵出的雏鸡的血清重新进行ＰＣＲ扩增，结果均为阳性，而同期对照胚肝及雏鸡血清为阴性．此外还用胚胎时接种过病料的雏鸡肝、脾和胸腺等组织抽提液作抗原，建立了检测ＣＡＶ血清抗体的ＥＬＩＳＡ方法．研究结果提示，用ＰＣＲ直接对病鸡血清中ＣＡＶＤＮＡ的扩增以及ＣＡＶ抗体的ＥＬＩＳＡ检测是快速和特异的．它为鸡传染性贫血病（ＣＩＡ）的流行病学调查、实验室诊断、ＣＡＶ毒株的分离和鉴定提供了必要的检测手段．
- 阎玉河陈春花许威光陈辉毛盛英马增全李春华王宝英
- 关键词：血清抗体病毒
- 旋毛虫肌幼虫ES重组抗原的纯化
- 1994年
- 旋毛虫肌幼虫ＥＳ重组抗原的纯化陈辉，闫玉河，许威光，马增全，李春华（河南省农科院畜牧兽医研究所郑州４５０００２）旋毛虫病的免疫学检测抗原，主要是用体外培养的旋毛虫肌幼虫的排泄－分泌抗原（ＥＳ），但由于ＥＳ抗原的制备程序繁琐，生长周期长，因而，抗原的应...
- 陈辉闫玉河许威光马增全李春华
- 关键词：旋毛虫病基因重组抗原
- 旋毛虫ES抗原特异性蛋白两个结构基因的序列分析及重组质粒的构建被引量：16
- 1996年
- 目的：获取旋毛虫ＥＳ抗原的结构基因，对其鉴定和克隆，并研制旋毛虫基因重组抗原。方法：先用反转录ＰＣＲ技术获取目的基因，经序列测定和酶切分析后，再用重组ＤＮＡ技术分别将目的基因与融合表达载体ｐＥＸ３１Ｃ、ｐＥＸ３１Ｂ及表达载体ｐＢＶ２２０连接，评价在大肠杆菌中的表达效果和鉴定表达产物的特异性。结果：获得了编码ＥＳ抗原特异性蛋白成分的两个结构基因（０．７ｋｂ和０．９５ｋｂ），其序列与文献报道的稍有差异。共构建３个重组质粒并在大肠杆菌中表达出相应分子量大小的重组蛋白，均能被猪旋毛虫病阳性血清所识别，但非融合蛋白的特异性强于融合蛋白。在相同条件下，融合蛋白的表达量高于非融合蛋白，而表达蛋白的分子量大小与表达水平呈负相关性。结论：在大肠杆菌中表达的３种重组蛋白是研制旋毛虫基因重组抗原的良好候选抗原蛋白。
- 阎玉河许威光陈辉陈辉李春华张洪权李春华卢景良
- 关键词：旋毛虫基因重组质粒
- 血清中病毒DNA三种提取方法比较
- 1994年
- 血清中病毒ＤＮＡ三种提取方法比较陈辉，闫玉河，许威光，马增全，李春华（河南省农科院畜牧兽医研究所，郑州４５０００２）随着分子生物学的发展，ＤＮＡ操作技术越来越多地被用于诊断畜禽疾病，已成为血清学指标有效的补充及替代方法。但进行核酸操作的前提，是需有效...
- 陈辉闫玉河许威光马增全李春华
- 关键词：畜禽疾病脱氧核糖核酸
- 旋毛虫病McAb快速ELISA诊断盒的研制与应用被引量：16
- 1993年
- 本研究建立了McAb快速诊断猪旋毛虫病的ELISA试剂盒,应用旋毛虫单克隆抗体系和层析纯化抗原(PAA)与旋毛虫肌幼虫排泄一分泌抗原(ES)作常规ELISA平行检测61头人工感染旋毛虫病猪血样,阳性率均为100％,检测健康猪血样1082头,阴性率也为100％,检测疫区自然感染猪血样1253头,阳性率分别为1.44％和1.12％,随机抽采175头猪血样和肉样作旋毛虫病消化法,常规法和快速法对比试验,诊断符合率分别为100％、97.6％和95.34％。通过对25万多头活猪检测证明,该诊断盒具有良好的灵敏性、特异性和重复性,深受广大检疫人员的欢迎。
- 许威光袁文甫李春华王克领马增全阎玉河周光悌
- 关键词：旋毛虫病猪病
- 旋毛虫单克隆抗体特性鉴定
- 1994年
- 用已建立的抗旋毛虫单克隆抗体杂交瘤细胞株(D_4,E_2)所分泌的单克隆抗体(McAb),经纯化后电泳分析,其重链分子量为55KD,轻链分子量为29KD,符合IgG抗体特点。两株单克隆抗体与旋毛虫阳性猪血清所针对的旋毛虫抗原决定簇相同,都不与猪的其它寄生虫发生交叉反应,与抗原的相对亲和力E_2>D_4,单克隆抗体亲和层析纯化抗原的分子量为49KD,经免疫斑点染色证明为糖蛋白。
- 王克领李春华马增全闫玉河袁文甫许威光
- 关键词：旋毛虫杂交瘤细胞株单克隆抗体
- 旋毛虫单克隆抗体特性鉴定
- 1999年
- 将两株抗旋毛虫单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞（Ｄ４，Ｅ２）所分泌的ＭｃＡｂ，经纯化后电泳分析，其重链分子质量为５５ｋｕ，轻链分子质量为２９ｋｕ，符合ＩｇＧ抗体的特点。两株ＭｃＡｂ与旋毛虫阳性猪血清所针对的旋毛虫抗原决定簇相同，都不与猪的其它寄生虫发生交叉反应，与抗原的相对亲和力Ｅ２＞Ｄ４，ＭｃＡｂ亲和层析纯化抗原的分子质量为４９ｋｕ，经免疫斑点染色证明为糖蛋白。
- 王克领李春华马增全阎玉河袁文甫许威光
- 关键词：旋毛虫杂交瘤细胞株单克隆抗体纯化抗原
- 旋毛虫病快速ELISA诊断技术被引量：2
- 1995年
- 旋毛虫病快速ＥＬＩＳＡ诊断技术许威光，袁文甫，李春华，马增全，王克领，闰玉河，陈辉（河南省农科院畜牧兽医研究所）１９８７年常规间接ＥＬＩＳＡ诊断液被批准为我国兽医生物合格制剂，１９８９，１９９０年该法先后获农业部和国家科技进步二等奖，并列入我国动物检...
- 许威光袁文甫李春华马增全王克领闰玉河陈辉
- 关键词：家畜旋毛虫病ELISA
- 旋毛虫基因重组抗原对小鼠的免疫保护试验被引量：2
- 1995年
- 分别用5μg和15μg的旋毛虫基因重组抗原对小鼠进行腹腔注射免疫,结果于免疫后第4周小鼠体内的抗体效价明显上升,至第7周达到高峰。当每只鼠用90条旋毛虫肌幼虫口服攻击后,抗体效价稍有下降,但到攻虫后的第5周基本回升至攻击前水平。通过人工消化法集虫和计算每克肌肉含虫数(LPG),发现注射5μg抗原蛋白的小鼠,其 LPG比对照鼠的平均减少 7.7％;而注射15μg抗原蛋白的小鼠的 LPG比对照鼠的减少33.5％。试验表明,旋毛虫基因重组抗原对小鼠有一定的免疫保护作用。
- 阎玉河马增全陈辉许威光李春华
- 关键词：旋毛虫重组抗原免疫小鼠
- 全文增补中
