程启康
- 作品数：10 被引量：30H指数：4
- 供职机构：上海理工大学能源与动力工程学院低温生物医学技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市重大科技攻关项目上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学一般工业技术轻工技术与工程更多>>
- 成纤维细胞玻璃化保存的实验研究
- 成纤维细胞是构建组织工程化真皮的种子细胞,实现成纤维细胞的低温保存对成功保存组织工程化真皮有着重要的意义。本文采用不同组成及浓度的玻璃化溶液对成纤维细胞进行玻璃化低温保存实验,并考虑了离心次数对细胞存活率的影响。实验结果...
- 程启康王欣杨鹏飞华泽钊邓辰亮杨光辉崔磊刘伟曹谊林
- 文献传递
- 培养9天的组织工程化真皮低温保存的研究被引量：5
- 2003年
- 组织工程化真皮的低温保存是皮肤组织工程的重要组成部分 ,对皮肤组织库的建立有重要意义。以培养一定时间的组织工程化真皮为试材 ,以四唑盐(MTT)比色法检测细胞存活率 ,辅以光学显微镜和扫描电镜观察分析 ,试验研究了低温保护剂预处理方式、降温程序及降温速率等条件对组织工程化真皮低温保存效果的影响。实验表明 :将组织工程化真皮置于 2 1mol/L的DMSO溶液中 ,在 4°C下处理 1 5min ,再只将组织工程化真皮转入低温保存袋中 ,迅速热封口 ,以 1°C/min速率降温且无恒温处理可获得较高的细胞存活率 ( 72 8%～ 78% ) 。
- 王欣华泽钊杨光辉崔磊刘伟曹谊林程启康
- 关键词：皮肤组织工程四唑盐比色法细胞存活率
- 人体骨髓基质干细胞冷冻干燥的探索性实验被引量：7
- 2005年
- 人体骨髓基质干细胞已成为组织工程、细胞移植和基因治疗等领域的重要研究对象 ,目前对它已有低温保存的研究 ,而通过冷冻干燥的方法对其进行保存国内外未见报导。实验尝试用冻干的方法来保存骨髓基质干细胞。文中选取海藻糖、PVP、HES等作保护剂 ,应用差示扫描量热仪 (DSC)测量其结晶温度和玻璃化转变温度 ;随后对加入保护剂的细胞溶液进行冻干实验 ,并应用流式细胞仪对冻干样品复水后的细胞活性进行了测定 ,其中 30 %PVP +2 0 %海藻糖对细胞的保护效果较好 ,细胞成活率达到 16 .4 0 %。
- 杨鹏飞程启康王欣华泽钊陈凡凡舒朝峰崔磊曹谊林
- 关键词：骨髓基质干细胞冻干HES细胞移植细胞活性
- 人胚胎干细胞程序降温保存的实验研究被引量：5
- 2005年
- 本文采用升降式程序降温仪对人胚胎于细胞进行了程序降温保存,并探讨和比较了降温速率、置核温度、保护剂和投入液氮前温度对冻存复苏后胚胎干细胞的存活率、活力及分化特性的影响。结果表明:采用Me_2SO+血清+DMEM(体积比为1∶3∶6)的保护剂,从0℃开始,以0.5℃/min的速率对细胞悬液降温;至-10℃时对其进行置核,并于-35℃时将其快速投入液氮中保存,复温后效果最佳。冻存复温后细胞存活率可达81.8%,复苏后的胚胎干细胞形态和集落生长方式都与冻前的生长形态相同,且胚胎干细胞标志之一碱性磷酸酶(AKP)反应阳性,同时染色体组型仍正常。
- 杨鹏飞丛笑倩程启康华泽钊吴春芳曹谊林
- 关键词：人胚胎干细胞细胞存活率染色体组型核温度复温集落
- 降温过程中组织工程用真皮成纤维细胞膜水分渗透特性的实验研究被引量：1
- 2005年
- 在优化组织工程化真皮的低温保存程序时, 有必要了解体外培养的真皮成纤维细胞的低温保存特性, 如细胞膜的水分渗透系数和相应的表观活化能等. 以组织工程用真皮成纤维细胞为实验材料, 通过添加少量冰核细菌诱导形成胞外冰, 应用DSC对在降温速率为5℃·min-1的条件下细胞悬液样品在相变过程中释放的热流量进行了测量. 对所测得的热流曲线计算得出了降温过程中成纤维细胞体积随温度的变化趋势, 并以Karlsson提出的细胞水分渗透模型为理论基础, 对获得的细胞体积变化数据进行了非线性回归的最小二乘优化, 得出了细胞膜的水分渗透率: 参照温度下(0℃)细胞膜对水分的渗透系数Lpg = 5.87×104μm·min-1·Pa-1, 表观活化能ELP = 308.8 kJ·mol-1. 将上述参数代入水分渗透模型, 对在不同的降温速率下(0.01～50℃·min-1), 冻存过程中成纤维细胞的水分渗透情况进行了模拟, 预测水分渗透过程结束后细胞内未渗透水的数量及保存成纤维细胞时应采取的最佳降温速率.
- 王欣程启康高才杨鹏飞华泽钊邓辰亮杨光辉崔磊刘伟曹谊林赵廷昌孙福在
- 关键词：DSC成纤维细胞降温过程细胞膜工程用真皮
- 组织工程用真皮成纤维细胞渗透特性的初步研究被引量：2
- 2004年
- 在优化组织工程化真度低温保存程序时,需要了解体外培养的真皮成纤维细胞的渗透特性。利用细胞计数与尺寸分析仪初步研究了组织工程用真皮成纤维细胞对水的渗透特性,其中包括细胞的等渗体积、细胞在低渗或高渗溶液(渗透压范围:130～1250 mOsm)中细胞的平衡体积及细胞的不可渗体积。结果表明,在等渗条件下(280.67 mOsm),真皮成纤维细胞的平均体积为5105.51μm^3(直径d=21.40μm);细胞体积随溶液渗透压的变化规律符合Boyle van’t Hoff关系式,据此得到真皮成纤维细胞的不可渗体积V_b=0.3631V_i,为1853.81μm^3。
- 王欣华泽钊杨光辉崔磊刘伟曹谊林程启康
- 关键词：真皮成纤维细胞细胞体积
- 成纤维细胞玻璃化保存的初步实验研究被引量：4
- 2004年
- 成纤维细胞是构建组织工程化真皮的种子细胞 ,实现成纤维细胞的低温保存对成功保存组织工程化真皮有着重要的意义。采用不同组成及浓度的玻璃化溶液对成纤维细胞进行玻璃化低温保存实验 ,并考虑了离心次数对细胞存活率的影响。实验结果表明 :玻璃化溶液的组成、浓度及复温后的离心次数等因素对细胞的存活率均有明显的影响。在实验条件下 ,采用组分配比为 5 4mol/LEG+1 4mol/LDMSO的玻璃化溶液对成纤维细胞进行玻璃化保存 ,复温后以 10 0 0r/min的转速离心 1次(5min)后 ,再以 80 0r/min的转速离心 4次 (每次 4min) ,可获得较高的细胞存活率 ,其值为87 1%。
- 程启康王欣杨鹏飞华泽钊邓辰亮杨光辉崔磊刘伟曹谊林
- 关键词：成纤维细胞
- 成纤维细胞预处理过程及三种低温保存方法比较的实验研究
- 2004年
- 成纤维细胞是构建组织工程化真皮的种子细胞,实现成纤维细胞的低温保存对成功保存组织工程化真皮有着重要的意义。采用三种不同的低温保存方法对成纤维细胞进行低温保存实验;详细介绍这三种方法的操作过程;并从细胞存活率、降温过程中的温度变化情况、操作时所需仪器设备及所耗时间等方面对这三种方法进行了比较。同时研究了DMSO的浓度、预处理时间及预处理温度等因素对成纤维细胞存活率的影响。
- 程启康杨鹏飞王欣华泽钊邓辰亮杨光辉崔磊刘伟曹谊林
- 关键词：成纤维细胞种子细胞细胞存活率
- DMSO浓度及降温速率对组织工程化真皮超低温保存效果的影响被引量：7
- 2003年
- 组织工程化真皮的超低温保存技术是皮肤组织工程的重要组成部分,对皮肤组织库的建立有重要意义。低温保存与低温保护剂的种类、浓度、降温复温程序及低温保护剂的添加与去除方式有着密切的关系。实验目的:研究DMSO浓度及降温速率对组织工程化真皮超低温保存效果的影响。实验方法:以培养一定时间的组织工程化真皮为试材,以不同浓度的DMSO溶液为低温保护液,以不同的降温速率降温保存,以四唑盐(MTT)比色法检测细胞存活率,辅以光学显微镜和扫描电镜观察分析。实验表明:降温速率为1℃/min,DMSO浓度为1.4mol/L时可获得在实验范围内较高的细胞存活率,为75％,超低温保存后的扫描电镜照片表明其细胞形态最为接近新鲜状态,细胞与支架材料的黏附也很紧密,这与细胞存活率的研究结果有很好的相关性。
- 王欣华泽钊杨光辉崔磊刘伟曹谊林程启康
- 关键词：真皮超低温保存
