苏春霞
- 作品数：52 被引量：113H指数：6
- 供职机构：宁夏医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 负载miR-206的肿瘤细胞衍生外泌体的制备方法及应用
- 一种负载miR‑206的肿瘤细胞衍生外泌体的制备方法包括以下步骤：步骤S001，用包含目的基因miR‑206的慢病毒转染HT29结直肠癌细胞；步骤S002，使用嘌呤霉素筛选能够稳定过表达miR‑206的HT29结直肠癌细...
- 段相国苏春霞田金花刘淼杨小娟马斌
- 重组干扰素-α增强口蹄疫重组疫苗免疫效果的研究
- 2014年
- 目的观察重组干扰素-a(IFN-α)佐剂对口蹄疫(FMD)重组疫苗免疫效果的增强作用,为IFN-α作为疫苗佐剂应用提供实验依据。方法 6周龄雌性BALB/c小鼠,分为3组,实验组联合免疫表达猪IFN-α的重组腺病毒(r Ad5po IFN-α)和串联表达FMDV多表位的重组腺病毒(r Ad5EGS),同时设两组对照组,分别注射r Ad5EGS和PBS,间隔两周免疫1次,共免疫3次。首免后每周分离血清,并通过ELISA检测血清中抗FMDV VP1特异性Ig G;首免后6周检测血清中Ig G1、Ig G2a抗体亚型及细胞因子IL-4、IFN-γ的表达水平;同时分离脾细胞,MTT法检测淋巴细胞增殖指数。结果与单独免疫r Ad5EGS和注射PBS的对照组相比,联合免疫r Ad5po IFN-α和r Ad5EGS能明显增强特异性Ig G的分泌和小鼠淋巴细胞增殖功能,并能增强抗体亚型Ig G2a和细胞因子IFN-γ的分泌,但对抗体亚型Ig G1和IL-4的分泌没有明显的增强作用。结论重组腺病毒r Ad5po IFN-α能有效增强FMD重组疫苗诱导的Th1型细胞免疫,有望作为FMD重组疫苗的候选佐剂。
- 苏春霞段相国曹瑞兵陈溥言
- 关键词：口蹄疫病毒重组腺病毒佐剂干扰素-Α
- 重组干扰素-α增强口蹄疫重组疫苗诱导滤泡辅助性T细胞的研究被引量：1
- 2014年
- 目的通过观察重组干扰素-α(IFN-α)佐剂在口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)重组疫苗免疫应答中对滤泡辅助性T细胞(follicular T helper cells,Tfh细胞)的免疫调节作用,为IFN-α佐剂免疫调节的新机制提供实验依据。方法 6周龄雌性Balb/c小鼠分为3组,实验组联合免疫表达猪IFN-α的重组腺病毒(r Ad5po IFN-α)和表达FMDV VP1的重组腺病毒(r Ad5VP1),另设2对照组,分别注射r Ad5VP1和空载体腺病毒(Advirus)。免疫后7 d,应用流式细胞术检测脾脏淋巴细胞中Tfh细胞(CD4+CXCR5+PD-1+)和生发中心(germinal center,GC)B细胞(B220+GL-7+)的增殖分化;real-time PCR技术检测Tfh细胞转录因子Bcl-6m RNA的表达水平;ELISA方法检测血清中细胞因子IL-21蛋白的表达水平。结果与单独免疫r Ad5VP1组相比,联合免疫r Ad5po IFN-α和r Ad5VP1能明显促进FMD重组腺病毒疫苗诱导小鼠Tfh细胞和GC B细胞的增殖分化;重组IFN-α能明显促进FMD重组腺病毒疫苗诱导小鼠Bcl-6 m RNA的表达,提高小鼠血清中IL-21蛋白的分泌水平。结论重组IFN-α能有效增强FMD疫苗诱导小鼠Tfh细胞免疫,为IFN-α佐剂免疫调节作用的新机制提供了理论依据。
- 苏春霞段相国徐广贤郑洁
- 关键词：滤泡辅助性T细胞干扰素-Α口蹄疫疫苗重组腺病毒
- 表达口蹄疫病毒多表位基因重组腺病毒的构建被引量：2
- 2009年
- 目的构建串联表达通用型辅助性T淋巴细胞表位(PARDE)和口蹄疫病毒多表位基因的重组腺病毒,并对其进行鉴定。方法将PARDE串联FMDV的多表位基因克隆到腺病毒的穿梭载体中,利用电转化技术将线性化的阳性穿梭质粒与腺病毒骨架载体pAdeno VatorΔE1/E3共转化大肠杆菌BJ5183感受态细胞,将筛选到的重组病毒质粒经PacⅠ酶线性化后,通过脂质体LipofectamineTM2000转染HEK-293A细胞后得到重组腺病毒,再用RT-PCR和Western-blot检测多表位基因在重组腺病毒中的表达。结果成功构建了串联表达PARDE和FMDV多表位基因的重组腺病毒rAd5-EGS,Western-blot检测重组腺病毒rAd5-EGS能与FMDV阳性血清发生反应。结论重组腺病毒rAd5-EGS具有抗原性,经过连续传代至10代后效价稳定。
- 苏春霞段相国张艳丽摆茹
- 关键词：口蹄疫病毒重组腺病毒
- 串联表达FMDV多表位基因重组腺病毒免疫小鼠的效应研究被引量：3
- 2012年
- 目的检测口蹄疫重组腺病毒多表位疫苗(rAd5EGS)对小鼠特异性免疫的影响。方法 6周龄雌性BALB/c小鼠随机分为三组,每组15只;rAd5EGS和rAd5VP1以腹膜内接种的方式免疫小鼠,对照组小鼠注射PBS。通过MTT法检测小鼠T淋巴细胞增殖功能、ELISA法检测小鼠血清中IgG水平及IgG亚型(IgG1和IgG2a),定量ELISA法检测小鼠血清中IL-4和IFN-γ的表达水平。结果 rAd5EGS既能诱导小鼠T淋巴细胞增殖又能诱导小鼠特异性抗体的产生,其诱导小鼠淋巴细胞增殖能力明显高于rAd5VP1免疫组(P<0.05);IgG亚型和细胞因子检测结果显示,rAd5EGS免疫组小鼠血清中IgG2a的分泌水平高于rAd5VP1免疫组(P<0.05),rAd5EGS免疫组小鼠血清中IFN-γ的表达水平高于rAd5VP1免疫组(P<0.05)。结论rAd5EGS具有良好的免疫原性,且诱导Th1分化的能力高于rAd5VP1,为口蹄疫表位疫苗的研究奠定基础。
- 王锋段相国赵瑞郑洁梁丽俊苏春霞
- 关键词：口蹄疫病毒重组腺病毒表位疫苗
- 类风湿关节炎患者外周血中Tim-3、PD-1、TIGIT在CD4^(+)T和CD8^(+)T细胞上的表达
- 2023年
- 目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血中T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3(Tim-3)、程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)及T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域蛋白(TIGIT)在CD4^(+)T和CD8^(+)T细胞上的表达情况及其与DAS28评分的相关性。方法选取2021年3月至2023年4月于宁夏医科大学总医院风湿免疫科确诊为RA患者60例为研究对象,另选取同期在宁夏医科大学总医院体检中心行健康检查者30例为健康对照组。根据DAS28-ESR评分将RA患者分为疾病活动期(疾病活动组,30例)和疾病缓解期(疾病缓解组,30例)。收集所有研究对象新鲜血液样本,采用流式细胞术检测3组外周血中Tim-3、PD-1和TIGIT分子分别在CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞上的表达情况。结果疾病活动组患者的病程长于疾病缓解组,且两组中女性多于男性(P均<0.05)。RA患者疾病活动组中DAS28评分、白细胞介素6(IL-6)、红细胞沉降率(ESR)、C-反应蛋白(CRP)、补体3(C3)和类风湿因子(RF)水平均高于疾病缓解组(P均<0.05)。而抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、IgG、IgA和IgM在两组患者中差异均无统计学意义(P均>0.05)。RA患者疾病活动组和疾病缓解组RF、IL-6、ESR和CRP均高于健康对照组(P均<0.05)。RA疾病活动组患者中Tim-3、PD-1和TIGIT在CD4^(+)T细胞上的表达以及PD-1和TIGIT在CD8^(+)T细胞上的表达均高于健康对照组(P均<0.05)。RA患者疾病缓解组Tim-3、PD-1和TIGIT在CD4^(+)T细胞上的表达,以及PD-1和TIGIT在CD8^(+)T细胞上的表达均低于疾病活动组(P均<0.05)。健康对照组和疾病缓解组间Tim-3、PD-1和TIGIT分子表达差异均无统计学意义(P均>0.05)。CD4^(+)T细胞表达Tim-3(r=0.584,P<0.001)、PD-1(r=0.525,P<0.001)和TIGIT(r=0.576,P<0.001)分子与DAS28评分呈正相关。CD8^(+)T细胞表达PD-1(r=0.464,P<0.001)和TIGIT(r=0.620,P<0.001)分子与DAS28评分呈正相关。结论Tim-3、PD-1和TIGIT在CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞上的异常表达影响RA患者的病情活
- 姜春蕾朱泽琴王凤魁陈建段相国苏春霞池淑红
- 口蹄疫病毒VP1基因重组腺病毒的构建与鉴定被引量：5
- 2009年
- 目的构建表达O型口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth disease Virus,FMDV)VP1基因的重组腺病毒并对其进行鉴定。方法将FMDV VP1基因克隆到腺病毒的穿梭载体pAdeno Vator-CMV5-IRES-GFP中。得到的阳性穿梭质粒经PmeⅠ酶线性化后,利用电转化技术将线性化的阳性质粒与腺病毒骨架载体pAdenoVatorΔE1/E3共转化大肠杆菌BJ5183感受态细胞,使其在大肠杆菌中进行同源重组。将筛选到的重组病毒质粒经PacⅠ酶线性化后暴露出包装信号,通过脂质体LipofectamineTM2000转染HEK-293A细胞后得到重组病毒。利用报告基因GFP和细胞病变检测重组病毒滴度和感染效率,通过PCR和western-blot检测FMDV VP1基因在重组腺病毒中的表达。结果成功构建了表达FMDV VP1基因的重组腺病毒rAd5-VP1,其滴度为1011.87个TCID50/mL。western-blot检测重组腺病毒rAd5-VP1能与FMDV阳性血清发生反应。结论重组腺病毒rAd5-VP1能与FMDV阳性血清发生反应,PCR和western-blot检测FMDV VP1基因在重组腺病毒中稳定表达。
- 苏春霞段相国张艳丽摆茹陈溥言
- 关键词：口蹄疫病毒重组腺病毒VP1基因
- 原发性肝癌患者CD4+Foxp3+T细胞、IL-15和IL-33的动态变化及临床意义被引量：4
- 2018年
- 目的探讨原发性肝癌(HCC)患者术前、术后外周血及癌组织中IL-15、IL-33和CD4+Foxp3+T细胞的变化,分析其与HCC临床检测指标甲胎蛋白(AFP)的相关性,以期发现HCC疾病监测及辅助诊断的新免疫分子及免疫细胞亚群。方法收取31例HCC患者的外周血及6例肝癌和癌旁组织,应用免疫组化和免疫荧光技术检测HCC患者肝癌组织中CD4、Foxp3的表达,流式细胞术检测HCC患者术前、术后外周血中CD4+Foxp3+T细胞比例,ELISA法检测HCC患者术前、术后血浆IL-15、IL-33水平变化。结果 HCC肿瘤组织中均可见CD4、Foxp3阳性表达,免疫荧光发现Foxp3共表达于CD4阳性细胞上,双阳性细胞在肿瘤组织散在分布,癌组织中的数量高于癌旁组织。与健康对照组相比,HCC患者术前CD4+Foxp3+T细胞比例升高,术后降低(P<0.05);术前CD4+Foxp3+T细胞比例与AFP浓度呈正相关(P<0.01);IL-15的表达水平在术前上升,术后降低(P<0.05),术前水平与AFP浓度呈正相关(P<0.01);IL-33的表达水平在术前增加,术后降低(P<0.05),术前水平与AFP浓度无相关性(P>0.05)。结论 CD4+Foxp3+T细胞与IL-15、IL-33参与了肝癌的进展,外周血CD4+Foxp3+T细胞、IL-15、IL-33的变化有望成为HCC诊断及病情监测的参考指标。
- 崔建健辛磊王琦马斌苏春霞段相国
- 关键词：IL-15原发性肝癌甲胎蛋白
- 病料中猪繁殖与呼吸综合症病毒的分子生物学快速检测
- 2004年
- 猪繁殖与呼吸综合症自1987年发现至今,已在世界大多数养猪国家和地区普遍存在[1,2].该病在猪群中发生以后,表现出妊娠母猪流产、产木乃伊胎、产死胎、早产等繁殖障碍性症状,已成为危害养猪业发展的重要疫病之一.
- 许立华苏春霞刘华雷陈溥言
- 关键词：繁殖呼吸综合症病毒分子生物学
- 重组猪IL-2对口蹄疫重组腺病毒免疫增强效果的研究被引量：3
- 2014年
- 目的构建表达猪白细胞介素-2(poIL-2)的重组腺病毒,研究其作为佐剂对口蹄疫重组腺病毒免疫效果的影响。方法将poIL-2基因克隆到腺病毒的穿梭载体中,与腺病毒骨架载体共转化BJ5183感受态细胞,获得的重组病毒质粒通过脂质体转染HEK-293A细胞,获得表达poIL-2的重组腺病毒(rAd5poIL-2)。以rAd5poIL-2作为佐剂与表达PMDV VP基因的重组腺病毒(rAd5VP1)联合免疫小鼠,以单独免疫rAd5VP1的小鼠作为对照。通过测定淋巴细胞增殖指数、特异性抗体、IL-4和IFN-γ的水平来衡量rAd5poIL-2对rAd5VP1的免疫增强效果。结果经PCR鉴定,成功构建了rAd5poIL-2。MTT与抗体检测结果显示,rAd5poIL-2既能增强rAd5VP1诱导小鼠淋巴细胞增殖,又能促进rAd5VP1诱导小鼠特异性抗体的产生,细胞因子检测结果显示,rAd5poIL-2能促进rAd5VP1诱导Th1和Th2的分化。结论 rAd5poIL-2可望成为口蹄疫疫苗的候选佐剂。
- 苏春霞段相国曹瑞兵郑洁黄菱郭琳陈溥言
- 关键词：猪白细胞介素2重组腺病毒口蹄疫
