贾晓健
- 作品数：16 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金协和青年科研基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 丹酚酸B在巨噬细胞胆固醇外排中的作用被引量：3
- 2013年
- 目的考察丹酚酸B(SAB)对巨噬细胞胆固醇外排的影响。方法分别采用巨噬细胞RAW264.7和PMA诱导的THP-1细胞,利用流式细胞仪检测丹酚酸B对已摄取DiI-acLDL的细胞外排脂质作用的影响,对RAW264.7细胞表面ABCA1蛋白表达水平的影响。采用ABCA1的抑制剂DIDS及小分子干扰RNA的方法检测ABCA1在丹酚酸B诱导的促进脂质外排过程中的作用。进而利用靶向CD36的小分子干扰RNA,通过抑制CD36的表达,检测CD36在丹酚酸B促进载脂巨噬细胞脂质外排过程中的作用。结果采用DiI荧光标记的脂质检测巨噬细胞对脂质的外排作用,结果显示SAB显著增加了荷脂细胞对DiI-acLDL的外排作用。对脂代谢相关转运蛋白表达的检测结果显示,在荷脂的RAW264.7细胞中,SAB能够以一定剂量依赖的方式增加细胞表面ABCA1蛋白水平的表达。进一步研究显示,上述SAB促进外排的作用可被ABCA1的抑制剂或者siRNA的作用消除,确证了ABCA1在SAB介导的脂质外排过程中的重要作用。同样利用CD36小分子干扰RNA将CD36表达抑制后,SAB促进外排的作用消失,说明SAB介导的细胞脂质的外排作用同样依赖于CD36。结论丹酚酸B通过上调ABCA1的表达,促进巨噬细胞胆固醇或脂质的外排,且该作用依赖于ABCA1及CD36,为SAB抗动脉粥样硬化作用新机制的研究提供了重要依据。
- 王丽姜华军杨帆杜郁贾晓健司书毅洪斌
- 关键词：动脉粥样硬化丹酚酸B抗原CD36胆固醇逆转运
- 一种异羟肟酸类衍生物、其药物组合物、制备方法及用途
- 本发明属于医药化工领域，涉及一种异羟肟酸类衍生物、其药物组合物、制备方法及用途。具体地，本发明涉及式Ⅰ或式Ⅱ所示的化合物，或其可药用盐。本发明的化合物能够有效地调节CLA-1的活性和/或水平，具有作为防治心脑血管疾病（例...
- 洪斌陈晓芳王丽杜郁贾晓健杨媛
- 文献传递
- 一组2-酰胺基-3-烷氧基取代的吡啶类化合物及其新用途
- 本发明公开了2-酰胺基-3-烷氧基取代的吡啶类化合物制备方法及其在治疗和/或预防动脉粥样硬化心血管疾病中的应用。实验证明，本发明所述化合物或药物组合物具有上调或稳定ABCA1、SR-BI/CLA-1，能够抑制巨噬细胞泡沫...
- 司书毅洪斌许艳妮贾晓健李永臻刘畅王丽刘祺
- 文献传递
- 以人HDL受体SR-BI mRNA稳定性为靶点的新型心血管药物高通量筛选模型的建立和应用
- ＜正＞动脉粥样硬化性心脑血管病是世界范围内最主要的致残和致死的疾病,血脂异常是动脉粥样硬化最重要的危险因素之一。寻找疗效显著安全可靠的血脂调节药物一直是医药工作者长期研究的课题。大量流行病学研究发现,
- 贾晓健王丽洪斌
- 文献传递
- 一种异羟肟酸类衍生物、其药物组合物、制备方法及用途
- 本发明属于医药化工领域，涉及一种异羟肟酸类衍生物、其药物组合物、制备方法及用途。具体地，本发明涉及式Ⅰ或式Ⅱ所示的化合物，或其可药用盐。本发明的化合物能够有效地调节CLA-1的活性和/或水平，具有作为防治心脑血管疾病（例...
- 洪斌陈晓芳王丽杜郁贾晓健杨媛
- 文献传递
- 人载脂蛋白A-I表达上调剂的发现与活性研究被引量：2
- 2014年
- 目的筛选上调人载脂蛋白A-I(ApoA-I)基因表达的新型活性化合物,并在表达和功能水平对其作用进行研究。方法利用人ApoA-I基因表达上调剂筛选模型对化合物库进行筛选;对发现的活性化合物在ApoA-I启动子水平进行量效关系研究;利用实时荧光定量RT-PCR检测ApoA-I mRNA的表达水平;利用Western blot、ELISA和流式细胞技术检测ApoA-I的蛋白表达;利用胆固醇流出试验检测ApoA-I介导的巨噬细胞胆固醇外流的情况。结果从20 000样次化合物筛选中得到活性化合物5238B-69,在一定浓度范围内存在转录调控活性的量-效关系,当化合物浓度为0.30μg/ml时,上调ApoA-I表达活性达到最高值(408%),EC50为0.01μg/ml。5238B-69能显著上调HepG2细胞中ApoA-I mRNA的水平;同时,Western blot结果显示5238B-69能增加HepG2细胞ApoA-I蛋白的表达。ELISA结果显示,与对照相比,5238B-69作用48 h时,胞外ApoA-I水平增加了48%,流式细胞检测表明,5238B-69作用24 h后,胞内ApoA-I蛋白水平增加了21.4%。功能分析试验显示,5238B-69作用HepG2细胞上调生成的ApoA-I,能促进巨噬细胞RAW264.7内[3H]标记的胆固醇的流出。结论得到一个具有上调ApoA-I表达的活性化合物,在提高ApoA-I表达水平和生物学功能方面均有明显的效果。
- 杜郁贾晓健王丽王丽非姜华军杨帆司书毅杨媛洪斌
- 关键词：载脂蛋白A-I基因表达调控动脉粥样硬化转录水平
- 一组2-酰胺基-3-烷氧基取代的吡啶类化合物及其新用途
- 本发明公开了2‑酰胺基‑3‑烷氧基取代的吡啶类化合物制备方法及其在治疗和/或预防动脉粥样硬化心血管疾病中的应用。实验证明，本发明所述化合物或药物组合物具有上调或稳定ABCA1、SR‑BI/CLA‑1，能够抑制巨噬细胞泡沫...
- 司书毅洪斌许艳妮贾晓健李永臻刘畅王丽刘祺
- 文献传递
- 人抑瘤素M在大肠杆菌中的表达、纯化及其对胆固醇代谢关键基因表达的影响
- 2015年
- 目的构建人抑瘤素M(OSM)的原核表达载体,通过表达及纯化获得重组蛋白,为深入研究OSM的功能及机制奠定基础。方法利用PCR技术,从质粒pOTB7-h OSM中扩增出人OSM蛋白编码序列,与原核表达载体pET-16b连接,构建表达质粒pET16b-OSM。在BL21(DE3)工程菌中表达目的蛋白,Western blot法检测OSM蛋白的表达。为提高OSM的可溶性表达,采用共表达分子伴侣的方法提高其上清产物的表达量。将放大发酵的产物处理后,经镍亲和层析法纯化,获得OSM成熟蛋白,SDS-PAGE电泳分析蛋白纯度。MTT法检测OSM对A375细胞的抑制活性,实时荧光定量PCR试验分析OSM对Hep G2细胞中胆固醇代谢相关基因(LDLR、ABCA1、Apo A-I和SR-BI)表达的影响。结果成功构建pET16b-OSM原核表达质粒,酶切鉴定和测序分析与预期结果完全一致。在E.coli BL21(DE3)中实现了目的蛋白的表达,通过共表达分子伴侣质粒pTf16,进一步提高了可溶性表达的水平。放大发酵产物经镍亲和层析纯化获得OSM成熟肽,电泳检测纯度大于98%。MTT法检测所制备的OSM蛋白抑制A375细胞生长的EC50为315ng/ml。mRNA水平检测证实OSM能剂量依赖地上调胆固醇代谢相关的低密度脂蛋白受体和ABCA1基因的表达。结论成功构建了OSM的原核表达载体,获得了具有生物学活性的目的蛋白,证实了其对胆固醇代谢关键基因转录的影响,为下一步功能及机制研究奠定基础。
- 杜郁贾晓健袁芳王丽王丽非洪斌
- 关键词：抑瘤素M原核表达分子伴侣胆固醇代谢
- 微小RNA或其抑制剂在脂代谢调控中的应用
- 本发明涉及microRNA或其抑制剂的用途，具体涉及microRNA或其抑制剂在制备调节脂代谢的药物或制备预防或治疗脂代谢相关疾病的药物中的用途，所述microRNA包括miRNA-96、miRNA-185和miRNA-...
- 洪斌王丽贾晓健姜华军杜郁杨帆司书毅
- 文献传递
- 一种异羟肟酸类衍生物、其药物组合物、制备方法及用途
- 本发明涉及一种异羟肟酸类衍生物、其药物组合物、制备方法及用途。本发明的化合物能够有效地调节CLA‑1的活性和/或水平，具有作为防治心脑血管疾病(例如动脉粥样硬化)、抗炎、体重控制(减轻体重、维持体重)或者抗肿瘤药物的前景...
- 洪斌陈晓芳王丽杜郁贾晓健杨媛
- 文献传递
