赵元昊
- 作品数：6 被引量：26H指数：4
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- 济南市手足口病患者肠道病毒71型的分离与鉴定被引量：5
- 2010年
- 目的从13例2008年、2009年济南市HFMD患者的粪便标本中分离获得EV71病毒并对其基因型进行鉴定。方法按照中国疾病控制预防中心《手足口病标本采集及检测技术方案》的规定对标本中的病毒进行分离和鉴定，对VP1编码基因的部分核苷酸序列进行测序分析。结果分离到6株EV71病毒，均与EV71C4亚型处于同一进化树分支上，与c4亚型的核酸同源率均大于96％。结论济南地区流行的EV71主要为c4亚型，与2008年中国流行的C4亚型EV71相比并未出现明显突变，引起重症的毒株与未引起重症的毒株相比，在VPI蛋白部分片段上没有发现明显的氨基酸差异。
- 赵元昊李志会李鹏宋楠楠岳盈盈纪璇孟红
- 关键词：肠道病毒71型基因型
- 金黄色葡萄球菌蛋白A的原核表达及生物亲和特性研究被引量：7
- 2009年
- 目的构建金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)基因片段的表达载体,并在大肠杆菌表达系统中进行表达,探讨该重组蛋白与不同来源IgG结合的生物学特性。方法利用PCR法扩增SPA基因片段,将该段基因克隆到pET30a(+)表达载体,转化感受态BL21大肠杆菌细胞,IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE及Westen-blot鉴定目的蛋白。His亲和层析纯化后分别与人、小鼠、兔、猪及山羊血清反应,分析其与不同来源IgG的亲和关系。结果构建的pET30a(+)-SPA表达载体在大肠杆菌BL21中可表达SPA蛋白,且发现其与人及小鼠源IgG具有较高亲和性,与兔及猪源IgG亲和性较低。结论该重组蛋白SPA与人及小鼠源免疫球蛋白IgG具有较高亲和性,为下一步应用于SPA-ELISA打下基础。
- 李志会岳盈盈李鹏宋楠楠沈琮赵元昊孟红
- 关键词：葡萄球菌蛋白A原核表达亲和性
- 致敏绵羊红细胞在EV71细胞嗜性研究中的应用被引量：1
- 2010年
- 目的以致敏绵羊红细胞为工具研究肠道病毒71型(EV71)的细胞嗜性,并探讨传代培养细胞表面EV71受体表达情况。方法 EV71致敏的绵羊红细胞与传代培养细胞作用,观察不同方法处理的培养细胞吸附致敏绵羊红细胞的情况,分析EV71的细胞嗜性,并探讨培养细胞表面EV71受体的表达情况。结果 EV71致敏绵羊红细胞能吸附在人喉癌上皮细胞(Hep-2)、恒河猴胚肾细胞(MA104)的细胞表面,并且胰酶能破坏MA104的吸附功能,对Hep-2却无影响,而狗肾细胞(MDCK)与EV71致敏的绵羊红细胞未见吸附现象,这与病毒直接感染细胞结果一致。结论该方法能直接、有效地反映病毒的细胞嗜性及培养细胞表面病毒受体的表达情况,在病毒学尤其是病毒受体研究中具有较强的可行性及应用价值。
- 李志会李鹏宋楠楠岳盈盈纪璇赵元昊孟红
- 关键词：绵羊红细胞细胞嗜性
- 风疹病毒包膜糖蛋白E1的原核表达及条件优化被引量：9
- 2010年
- 目的 为风疹病毒（RV）感染提供特异性及敏感性高的检测手段。方法采用PCR扩增RV包膜糖蛋白E1基因202—353aa片段，并将其插入表达载体pET30a（＋），构建pET30a（＋）-E1，转化BL21（plysS）菌株，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和Western Blot初步分析蛋白表达及抗原性；并探讨温度、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）浓度和诱导时间对目的蛋白表达产量的影响。结果获得相对分子质量约为16．6kD的融合蛋白，Western Blot证明其具有良好的抗原性，并确定该蛋白在30℃、0．6mmol／L IPTG的条件下诱导表达4h可获得最佳表达量。结论本研究为RV包膜糖蛋白E1抗原纯化及应用奠定了基础，亦为研制生产高特异性和敏感性的RV检测试剂盒提供了实验依据。
- 岳盈盈李鹏李志会宋楠楠赵元昊纪璇孟红
- 关键词：风疹病毒大肠杆菌
- 济南市手足口病患者肠道病毒71型的分离鉴定与VP1蛋白的原核表达
- 目的:
1.从2008年7月至2009年3月济南市手足口病患者的临床粪便标本中分离得到病原体并对其进行鉴定。
2.对所分离到的EV71分离株的5’UTR区基因序列,VP4蛋白基因编码序列和VP1蛋白基因编码序...
- 赵元昊
- 关键词：手足口病肠道病毒71型VP1蛋白基因分型原核表达
- 文献传递
- 肠道病毒71型结构蛋白VP1的原核表达及初步鉴定被引量：5
- 2011年
- 目的利用大肠杆菌表达系统表达EV71 VP1蛋白并对其抗原性进行初步鉴定;为EV71疫苗研制奠定基础。方法采用PCR扩增EV71 VP1基因2-274aa片段,并将其插入表达载体pET30a(+),转化Transetta(DE3)菌株,SDS-PAGE和Western Blot初步分析蛋白表达及抗原性;探讨目的蛋白的最佳表达条件。结果获得相对分子质量约为30 kD的融合蛋白,Western Blot证实其抗原性良好;该蛋白的最佳表达条件是37℃、1.0 mmol/L IPTG、诱导表达4 h。结论表达并鉴定了EV71 VP1抗原;本研究为EV71疫苗研制及检测试剂盒的建立奠定了基础。
- 岳盈盈李志会李鹏宋楠楠赵元昊孟红
- 关键词：肠道病毒71型VP1蛋白原核表达
