宋楠楠
- 作品数：49 被引量：77H指数：5
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- 一种新生牛血清的分类生产工艺
- 本发明公开了一种新生牛血清的分类生产工艺，采取新生牛血清后，对其进行蛋白、血红蛋白、细菌内毒素定量检测、微生物学检测和抗体检测，然后将相同抗体背景者归类合并，然后进行细胞增殖谱检验和基础质控；所述细胞增殖谱检验包括传代细...
- 温晓燕孟红李鹏岳盈盈李志会宋楠楠
- 文献传递
- 低渗条件下竹叶状灰岩中微生物的初步培养
- 2013年
- 目的对低渗条件下竹叶状灰岩内部特有的微生物进行培养,了解竹叶状灰岩内部独特的微生态环境。方法本研究采用低渗稀释培养法、透射电镜、16S rDNA序列分析方法以及培养基改造,对竹叶状灰岩中的微生物进行了初步研究。结果在竹叶状灰岩的培养物中发现了两段未培养细菌16S rDNA的存在;在电镜中观察到两种特殊形态的微生物;采用稀释培养法成功的培养了未培养细菌,且能传代,但经过多种培养基的分离培养,未获得未培养细菌的纯培养。结论竹叶状灰岩内部有特殊形态的未培养细菌存在,本文为进一步研究未培养细菌特有的生存机制和代谢途径奠定了基础。
- 李鹏岳盈盈李志会宋楠楠纪璇孟红
- 关键词：低渗
- 一种重组枯草芽孢杆菌免疫球蛋白结合蛋白功能域表达载体及其应用
- 本发明公开了一种重组枯草芽孢杆菌免疫球蛋白结合蛋白功能域表达载体，载体为大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭表达载体，其上装载有免疫球蛋白结合蛋白功能域编码基因。本发明还公开了含有该重组表达载体的重组枯草芽孢杆菌，其可以用于制备粘...
- 李志会孟红李鹏宋楠楠岳盈盈
- 鼠伤寒沙门菌AvrA蛋白的原核表达及纯化被引量：3
- 2018年
- 目的克隆,表达和纯化沙门菌AvrA蛋白,为AvrA蛋白的结构和功能研究奠定基础。方法采用生物信息学方法对AvrA蛋白的性质进行预测。使用PCR的方法从沙门菌基因组上获得AvrA36-277基因,并克隆到原核表达载体pGl01上;使用大肠埃希菌BL21(DE3)菌株进行目的蛋白的表达,表达产物分别经镍离子亲和柱、阴离子交换柱以及凝胶层析柱层析纯化。结果成功获得重组质粒AvrA36-277/pGl01,转化BL21后经IPTG诱导获得分子质量单位约为27ku的重组AvrA36-277蛋白。该蛋白以可溶形式表达,层析纯化后蛋白浓度达5mg/ml,蛋白纯度95%。结论使用大肠原核表达系统可稳定表达沙门菌的AvrA36-277蛋白,该蛋白可溶性良好,获得蛋白纯度较高,可用于蛋白底物的筛选、晶体生长及三维结构解析。
- 杨银龙岳盈盈宋楠楠王玮玮马胡李翠玲李冰清
- 关键词：鼠伤寒沙门菌生物信息学原核表达
- 一种封闭式微量多孔培养板
- 本实用新型公开了一种封闭式微量多孔培养板，包括盒体、盒盖，盒体内设有若干培养孔，在盒体上设置有回形凸起；在盒盖上设置有与回形凸起相匹配的回形凹槽，该回形凹槽由盒盖的内侧向盒盖的外侧凸出；回形凹槽的表面覆盖有一层橡胶。盒体...
- 孟红李志会宋楠楠李鹏岳盈盈纪璇
- 文献传递
- 肠道病毒71型2C蛋白的异源表达及纯化
- 2014年
- 目的获得高纯度、性状均一的可溶蛋白肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)2C。方法截取2C蛋白的6个包含ATPase/解旋酶等核心结构域的基因片段,分别使用含有His标签和MBP促溶标签的表达载体在大肠埃希菌中进行异源表达,分子筛层析纯化2C蛋白,SDS-PAGE电泳检测表达产物和纯化蛋白。结果成功将EV71 2C蛋白的6个片段进行了克隆表达并纯化,获得了高纯度、性状稳定的可溶蛋白MBP-2C91aa-256aa和MBP-2C118aa-256aa。SDS-PAGE检测2C蛋白纯度达97%以上,分子质量与预期结果一致。纯化的2C蛋白浓度为8.8mg/ml。结论91aa-256aa和118aa-256aa片段的MBP-2C截短蛋白比包含其他片段的截短蛋白性状稳定、均一,MBP标签提高了2C的6个截短蛋白的可溶性。高纯度可溶蛋白的制备为其晶体结构和功能研究奠定了基础。
- 刘艳李志会李鹏岳盈盈宋楠楠秦立增李冰清孟红
- 关键词：异源表达
- 鼠伤寒沙门菌修饰酶YdiU的表达、纯化及晶体培养被引量：2
- 2019年
- 目的采用大肠埃希菌原核表达体系表达并纯化YdiU蛋白,筛选蛋白质晶体,为其结构和酶活测定等研究奠定基础。方法以生物信息学预测为基础,使用PCR方法从沙门菌基因组中调取ydiU基因,构建ydiU-pGl01重组质粒,转化入大肠埃希菌BL21(DE3)中,诱导蛋白表达。并使用镍离子亲和层析柱和阴离子交换柱对YdiU蛋白进行纯化。纯化后YdiU蛋白利用16种晶体筛选试剂盒在悬滴条件下进行晶体培养。结果成功构建重组表达质粒ydiU-pGl01。IPTG诱导后,YdiU蛋白在大肠埃希菌BL21(DE3)菌株中大量表达,并多以可溶形式存在。经镍离子亲和层析和阴离子交换法纯化后得到纯度较高的蛋白溶液,浓度为3.6 mg/ml,相对分子质量约51×10^3。纯化的YdiU蛋白在0.5 mol/L Potassium thiocyanate条件下长出蛋白晶体。结论采用大肠埃希菌表达系统可表达可溶性YdiU蛋白,YdiU蛋白在阴离子交换柱上表现为峰型对称的单峰,纯度较高,可用于蛋白质晶体的筛选,为进一步解析YdiU的结构和功能研究奠定了基础。
- 马玥杨银龙岳盈盈宋楠楠王玮玮贾海红李翠玲李冰清
- 关键词：鼠伤寒沙门菌表达纯化
- 一种新生牛血清的分类生产工艺
- 本发明公开了一种新生牛血清的分类生产工艺，采取新生牛血清后，对其进行蛋白、血红蛋白、细菌内毒素定量检测、微生物学检测和抗体检测，然后将相同抗体背景者归类合并，然后进行细胞增殖谱检验和基础质控；所述细胞增殖谱检验包括传代细...
- 温晓燕孟红李鹏岳盈盈李志会宋楠楠
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- 肠道病毒71型山东分离株全基因组序列分析被引量：8
- 2011年
- 目的探讨2008年山东省流行的肠道病毒71型(EV71)的基因特征。方法以2008年山东省分离的一株EV71(JN200804)为样本,采用RT-PCR方法扩增并测定全基因组核苷酸序列,进行同源性比较和种系发生分析。结果 JN200804株的全基因组序列长度为7404个核苷酸,与其他EV71毒株相比,在编码区没有核苷酸的缺失和插入,5′UTR和3′UTR的长度和序列有差异。核苷酸同源性比较结果表明,JN200804株与安徽株(Fuyang/17.08/1)、浙江株(Zhejiang08)和北京株(BJ08)的核苷酸同源性均大于95%,与国际标准株BrCr的同源性仅为79.8%。氨基酸同源性比较结果表明,JN200800株与Fuyang/17.08/1同源性高达99.6%,与TW/2086/98同源性最低(94.5%)。根据P1、P2和P3区基因序列构建了种系进化树:JN200804株与C4亚型各毒株(Fuyang/17.08/1、Zhejiang08、BJ08、SHZH03、N3340-TW-02和SHZH98)同属一个分支,核苷酸同源性都在91%以上。结论 JN200804株属于EV71的C4亚型,与AnhuiFY08、Zhejiang08和BJ08的进化关系最为密切。
- 李鹏张颖岳盈盈宋楠楠李志会盖中涛孟红
- 关键词：肠道病毒71型全基因组同源性分析遗传进化分析
- 一种重组枯草芽孢杆菌免疫球蛋白结合蛋白功能域表达载体及其应用
- 本发明公开了一种重组枯草芽孢杆菌免疫球蛋白结合蛋白功能域表达载体，载体为大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭表达载体，其上装载有免疫球蛋白结合蛋白功能域编码基因。本发明还公开了含有该重组表达载体的重组枯草芽孢杆菌，其可以用于制备粘...
- 李志会孟红李鹏宋楠楠岳盈盈
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