顾笑梅
- 作品数：7 被引量：42H指数：3
- 供职机构：国家工程研究中心更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 银杏叶提取物GBE50及其主成分总黄酮对缺氧致人脐静脉内皮细胞凋亡及活性氧自由基生成的作用被引量：3
- 2007年
- 目的观察银杏叶提取物GBE50及其主成分总黄酮对缺氧致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)活性氧自由基(ROS)生成及凋亡的保护作用。方法通过消化法获得HUVECs,传代后干预分为N组(正常对照)、H组(缺氧24 h)、HG组(缺氧前GBE50干预4 h)和HF组(缺氧前总黄酮干预4 h),其中GBE50和总黄酮各有12．5、25．0和50．0μg／mL 3个浓度。采用流式细胞仪测各组ROS水平及早期凋亡率(Annexin V),通过TUNEL测晚期凋亡率,探讨缺氧及GBE50和总黄酮对HUVECs凋亡及其ROS生成的影响。结果①H组ROS水平较N组明显升高(P<0．05),由(9．88±0．97)％升至(29．27±2．21)％;HG各浓度组与H组相比ROS水平均降低,但与N组及H组相比差异均无统计学意义(P值均>0．05);HF各浓度组与H组相比ROS水平均明显下降(P值均<0．05),其中HF组中总黄酮浓度为50．0μg／mL时ROS降到最低,为(7．42±1．81)％。②H组细胞Annexin V阳性率较N组明显增加(P<0．05),由(9．00±1．00)％升至(18．47±2．53)％:HG 25．0μg／mL时为(10．69±2．08)％,显著降低了HUVECs的Annexin V阳性率(P<0．05);HF各浓度组均能不同程度地降低Annexin V阳性率,但差异均无统计学意义(P值均>0．05),该保护效应在总黄酮浓度为50．0μg／mL时最明显,Annexin V阳性率为(14．25±2．22)％。③H组TUNEL阳性率较N组明显增加(P<0．05),由(1．28±0．65)％升至(8．59±1．10)％; HG 25．0μg／ml时降至(3．58±0．28)％,HF 50．0μg／ml为(3．06+0．40)％,较H组均明显下降(P值均<0．05)。结论缺氧可导致HUVECS ROS生成增加伴凋亡增多。而GBE50及总黄酮可降低缺氧所致的ROS生成增多及凋亡增加,对缺氧所致的内皮功能障碍有一定的保护作用。
- 沈建颖孙爱军张庆华张庆华虞勇贾剑国顾笑梅王克强顾笑梅赵国屏陈灏珠葛均波
- 关键词：银杏叶提取物GBE50主成分消化法
- 银杏叶提取物GBE50对抗缺氧致内皮功能障碍的影响及部分机制探讨被引量：1
- 2007年
- 目的初步探讨银杏叶提取物GBE50对抗缺氧致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)功能障碍的分子机制。方法通过消化法获得HUVECs,传代后干预分为N组(正常对照)、NG组(GBE50 25μg／ml干预4 h后不予缺氧处理)、H组(缺氧24 h)及HG组(GBE50 25μg／mL干预4 h后缺氧24 h)。应用反转录-聚合酶链反应半定量检测各组von Willebrand因子(vWF)、内皮素-1(ET-1)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的mRNA表达水平,运用Western印迹法测定各组内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及PPARγ的蛋白表达水平。结果①VWF的mRNA表达水平:N组为(0．55±0．05)％,H组为(0．84±0．14)％,H组vWF表达较N组明显增加(P<0．05);HG组为(0．58±0．24)％,与H组相比明显降低(P<0．05)。②ET-1的mRNA表达水平: N组为(0．14±0．03)％,H组为(0．31±0．03)％, H组ET-1表达较N组明显增加(P<0．05);HG为(0．26±0．02)％,与H组相比明显降低(P<0．05)。③eNOS蛋白表达水平:H组eNOS蛋白表达较N组明显增加(P<0．05),由(0．30±0．04)％升至(0．59±0．08)％;HG组降至(0．43±0．08)％,但与其他各组相比差异无统计学意义(P值均>0．05)。④PPARγ的mRNA表达水平:N组为(0．40±0．02)％,H组为(0．42±0．01)％,HG组为(0．42±0．01)％,各组之间的差异均无统计学意义(P值均>0．05)。⑤PPARγ的蛋白表达水平:N组为(0．10±0．02)％,H组为(0．13±0．05)％,HG组为(0．13+0．04)％,各组之间的差异均无统计学意义(P值均>0．05)。结论内皮细胞缺氧损伤时可导致ET-1、vWF及eNOS的表达增加,内皮细胞在缺氧前给予GBE50 25μg／mL后,可降低缺氧导致的ET-1和vWF的表达增加,部分降低因缺氧导致的eNOS蛋白表达的增高,提示缺氧及GBE50对上述因子的表达起作用。缺氧及GBE50对PPARγ的mRNA及蛋白水平均无影响,提示缺氧及GBE50不通过PPARγ途径起作用。
- 沈建颖孙爱军张庆华张庆华宿燕岗顾笑梅贾剑国王克强邹云增赵国屏陈灏珠葛均波
- 关键词：银杏叶提取物GBE50内皮功能障碍缺氧损伤半定量检测消化法
- 基因表达谱芯片在中药现代化研究中的应用——利用基因芯片技术研究银杏灵'功能指纹图谱'
- 本文选用潜在的靶细胞模型(人的脐静脉内皮细胞)作为实验的起始模型，通过银杏灵及银杏灵有效组份(如黄酮、内酷等)处理，获得细胞水平的各种相应的基因表达谱.在此基础上，利用组织或器官模型(大鼠的肝脏、脑、血管、肾脏、心脏)，...
- 顾笑梅
- 关键词：基因表达谱芯片中药功能
- 文献传递
- 利用基因芯片技术研究银杏灵“功能指纹图谱”
- GBE50是一种银杏叶提取物，含有24％的黄酮甙、6％银杏内酯和低于5ppm的银杏酸，临床上用于治疗心血管疾病。本课题通过高脂饲料喂饲大鼠(H)以及高脂饲料基础上的给予维生素D<,3>刺激(HD)，分别建立高胆固醇模型和...
- 顾笑梅
- 关键词：基因芯片银杏酸心血管疾病
- 文献传递
- 银杏叶提取物主成分总黄酮对缺氧致内皮功能障碍的保护作用被引量：5
- 2008年
- 目的:探讨缺氧对人脐静脉内皮细胞功能的影响及银杏叶提取物主成分总黄酮(flavonoids)在其中的作用。方法:应用流式细胞技术及TUNEL染色等方法探讨缺氧及总黄酮对内皮细胞功能的影响。结果:缺氧干预内皮细胞24h后,细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平及早期凋亡(Annexin V)率、晚期凋亡(TUNEL)率均明显增加。缺氧前4h予总黄酮干预后发现,总黄酮50μg.ml-1时可显著降低细胞ROS水平及晚期凋亡率(P<0.05),部分降低因缺氧而升高的早期凋亡率(P>0.05)。结论:缺氧可导致血管内皮功能障碍,而总黄酮可部分或显著逆转缺氧所致的内皮功能障碍,总黄酮对缺氧所致的内皮功能障碍有一定的保护作用。
- 沈建颖孙爱军张庆华顾笑梅宿燕岗虞勇贾剑国王克强邹云增赵国屏陈灏珠葛均波
- 关键词：缺氧内皮功能障碍银杏叶提取物总黄酮
- 银杏叶提取物GBE50对缺氧致内皮细胞功能的影响被引量：19
- 2007年
- 目的初步探讨缺氧对人脐静脉内皮细胞功能的影响,以及银杏叶提取物GBE50在其中的作用。方法应用流式细胞技术、TUNEL、RT-PCR及Western blot等方法,探讨缺氧及GBE50对内皮细胞功能的影响。结果缺氧干预内皮细胞24h后,细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平及早期、晚期凋亡率均明显增加,伴随内皮素(endothelin-1,ET-1)mRNA水平及内皮型一氧化氮合成酶(endothelial oxidesynthase,eNOS)蛋白水平的升高。缺氧前4h给予GBE50干预后发现,GBE5025μg/ml时可显著降低细胞早期及晚期凋亡率及ET-1mRNA水平(P<0.05),部分降低因缺氧导致的ROS水平及eNOS蛋白表达的增高(P>0.05)。结论缺氧可导致血管内皮功能障碍,而GBE50可部分或显著逆转缺氧所致的内皮功能障碍,GBE50对缺氧所致的内皮功能障碍有一定的保护作用。
- 沈建颖孙爱军顾笑梅宿燕岗贾剑国虞勇王克强邹云增赵国屏陈灏珠张庆华葛均波
- 关键词：缺氧内皮功能障碍银杏叶提取物
- 银杏叶提取物GBE50对培养细胞内胆固醇代谢的影响被引量：16
- 2008年
- 目的研究银杏叶提取物GBE50对不同培养细胞内胆固醇含量的影响,及对HepG2细胞内胆固醇代谢相关基因HMGCR和SREBF2表达的调节。方法采用MTT法观察了GBE50对HepG2细胞生长的影响,用胆固醇氧化酶终点法检测GBE50对培养细胞HepG2、HUVEC、SH-SY5Y总胆固醇含量的影响;用荧光实时定量PCR技术检测了药物处理后HMGCR和SREBF2基因表达水平在HepG2细胞中的改变。结果GBE50在不影响HepG2细胞的增殖的剂量下可不同程度降低培养细胞HepG2,HUVEC内总胆固醇含量。对HepG2细胞内总胆固醇的影响呈一定的剂量及时间-效应关系,同时可以调节其中HMGCR、SREBF2基因的表达。结论GBE50可有效降低部分培养细胞内总胆固醇的含量,部分胆固醇代谢相关基因表达量的改变可能是GBE50调节HepG2细胞内胆固醇水平的机制之一。
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- 关键词：银杏叶提取物胆固醇HEPG2
