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重组耻垢分枝杆菌NY-ESO-1疫苗的免疫学研究: 耻垢分枝杆菌是一种生长迅速的非致病性分枝杆菌，较BCG更安全可靠，且具有与BCG一致的免疫调节作用，是一种具有广阔前景的疫苗载体。本文从人睾丸mRNA中克隆出睾丸-肿瘤(CT)抗原NY—ESO—1，以耻垢分枝杆菌为载体，...; 陈丹丹高丹瞿爱东徐帆洪; 关键词：重组耻垢分枝杆菌 CT抗原睾丸肿瘤免疫调节; 文献传递网络资源链接

NY-ESO-1/HSP65融合蛋白腹腔免疫小鼠的免疫效果: 目的：观察NY-ESO-1/HSP65融合蛋白(NY-H)免疫BALB/c小鼠诱导的体液和细胞免疫反应及抗肿瘤作用。方法：将BALB/c小鼠随机分为NY-H组、NY+H组、NY组、HSP组和PBS对照组。分别用100μ...; 高丹陈丹丹瞿爱东徐帆洪; 关键词：融合蛋白蛋白纯化免疫效果; 文献传递网络资源链接

重组耻垢分枝杆菌NY-ESO-1疫苗的免疫学研究: 耻垢分枝杆菌是一种生长迅速的非致病性分枝杆菌，较BCG更安全可靠，且具有与BCG一致的免疫调节作用，是一种具有广阔前景的疫苗载体。本文从人睾丸mRNA中克隆出睾丸．肿瘤(CT)抗原NY-ESO-1，以耻垢分枝杆菌为载体，...; 陈丹丹高丹瞿爱东徐帆洪; 文献传递网络资源链接

TRAIL_(114～281)-IL-24融合蛋白的原核表达及其体外抗肿瘤细胞活性被引量：2: 2010年; 目的原核表达肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)114～281肽和人白细胞介素-24(Interleukin-24,IL-24)融合蛋白,并检测其体外抗肿瘤细胞活性。方法以人外周血单个核细胞总RNA为模板,PCR扩增TRAIL114～281和IL-24基因,经T4DNA连接酶连接成融合基因,克隆至pET-28a载体中,构建重组原核表达质粒pET-28a/TRAIL114～281-IL-24,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白TI经层析法纯化后,进行Western blot分析,并采用MTT法检测其对肿瘤细胞增殖的影响,caspase3活性检测试剂盒检测其对不同肿瘤细胞caspase3活性的影响。结果重组表达质粒经酶切鉴定及测序证明构建正确;TI融合蛋白以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的30%;纯化的重组蛋白纯度可达95%,且可与鼠抗人IL-24抗体发生特异性反应;经复性的蛋白能明显抑制人宫颈癌上皮细胞HeLa和人乳腺癌细胞MCF-7增殖,并显著提高肿瘤细胞的caspase3活性。结论已在大肠杆菌中表达了TRAIL114～281-IL-24融合蛋白,其具有诱导部分肿瘤细胞凋亡的活性。; 刘朝阳高丹徐帆洪; 关键词：TNF相关凋亡诱导配体白细胞介素-24 重组融合蛋白质类原核细胞

NY-ESO-1/HSP65融合蛋白腹腔免疫小鼠的免疫效果: 目的观察NY-ESO-1／HSP65融合蛋白(NY-H)免疫BALB／c小鼠诱导的体液和细胞免疫反应及抗肿瘤作用。方法将BALB／c小鼠随机分为NY-H组、NY+H组、NY组、HSP组和PBS对照组，分别用100μg N...; 高丹陈丹丹瞿爱东徐帆洪; 文献传递网络资源链接

重组耻垢分枝杆菌NY-ESO-1疫苗的制备及其免疫原性分析被引量：1: 2015年; 目的制备重组耻垢分枝杆菌(recombinant Mycobacterium smegmatis,rM.smegmatis)NY-ESO-1疫苗,并分析其在小鼠体内的免疫原性。方法从人睾丸m RNA中扩增NY-ESO-1基因,克隆至携带β半乳糖苷酶信号肽的表达载体,转化M.smegmatis,构建r M.smegmatis。以rM.smegmatis经腹腔免疫小鼠,200μl/只,于第12周用NY-ESO-1加强免疫1次,第3、6、9、12、13周经尾静脉采血1次,分离血清,并于第13周取小鼠脾脏,制备脾淋巴细胞,检测小鼠血清中NY-ESO-1抗体及其亚型、CD4^+、CD8^+T细胞比例、脾细胞增殖能力、IFNγ及IL-2的分泌水平及体外CTL杀伤能力。结果加强免疫后,与NY-ESO-1组比较,rM.smegmatis-p LA71NY组小鼠血清抗体水平差异无统计学意义(P>0.05),CD4~^+及CD8^+T细胞比例、IFNγ及IL-2的分泌水平及体外CTL杀伤能力均显著升高(P<0.05),脾细胞的增殖能力显著下降(P<0.05)。结论 rM.smegmatis NY-ESO-1疫苗在小鼠体内具有良好的免疫原性,为该疫苗用于肿瘤的免疫治疗奠定了基础。; 陈丹丹高丹瞿爱东徐帆洪; 关键词：重组耻垢分枝杆菌 NY-ESO-1 免疫原性

重组耻垢分枝杆菌NY-ESO-1疫苗的免疫学研究: 耻垢分枝杆菌是一种生长迅速的非致病性分枝杆菌，较BCG更安全可靠，且具有与BCG一致的免疫调节作用，是一种具有广阔前景的疫苗载体。本文从人睾丸mRNA中克隆出睾丸-肿瘤(CT)抗原NY-ESO-1，以耻垢分枝杆菌为载体，...; 陈丹丹高丹瞿爱东徐帆洪; 关键词：耻垢分枝杆菌免疫生物学疫苗载体; 文献传递网络资源链接

NY-ESO-1／HSP65融合蛋白腹腔免疫小鼠的免疫效果: 2015年; 目的观察NYESO-1／热休克蛋白65（heat shock protein 65，HSP65）融合蛋白（NVH）免疫BALB／c小鼠诱导的体液和细胞免疫应答及其抗肿瘤作用。方法将BALB／c小鼠按简单随机方法分组，分别用NVH、NY-ESO-1与HSP65混合（NY＋H）、NY-ESO-1、HSP65和PBS腹腔免疫4次，间隔2周。每次免疫后第14天，对小鼠尾静脉采血，检测血清抗体滴度。末次免疫后第7天，取小鼠脾细胞，检测细胞因子、淋巴细胞增殖水平、CD4^＋和CD8^＋T细胞的百分比及对肿瘤细胞的特异性杀伤作用，采用t检验或χ^2检验对结果进行比较。结果NY-H组小鼠在第1次免疫后就产生了较高水平的抗体（吸光度值为0．841±0．059），与NY＋H组（0．333±0．077）和Ny-ESO-1组（0．275±0．183）相比差异有统计学意义（t=12．753，P〈0．01；t=7．204，P〈0．01）。NY-H组小鼠的IL-2和IFN-γ分泌能力均高于其他各组，并且CD4^＋、CD8^＋T细胞数量大幅增高，细胞增殖率（38.00％±3．84％）明显高于NY＋H组（12．90％±0．65％）和NY—ES（〉1组（10．90％±1.44％）（χ^2=830．1，P〈0．01；χ^2=994．0，P〈0．01）。小鼠免疫NY-H后，脾淋巴细胞能特异性杀伤表达NY-ESO-1的小鼠B16肿瘤细胞。结论NY-H能诱导小鼠产生较强的体液和细胞免疫应答，且具有良好的抗肿瘤作用。; 徐帆洪高丹陈丹丹瞿爱东; 关键词：热休克蛋白质类免疫免疫

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高丹

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