侯韶毅
- 作品数：20 被引量：19H指数：3
- 供职机构：广西兽医研究所更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科学研究与技术开发计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项广西科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪胞内劳森氏菌GXNN株4个抗原性候选基因抗原性分析被引量：3
- 2010年
- 参考GenBank上已发表的胞内劳森氏菌相关蛋白序列,设计了4对引物,分别扩增了4个抗原性候选基因(3个外膜蛋白基因和1个表面脂蛋白基因),并将4个抗原性候选基因构建好原核表达载体后进行原核表达、SDS-PAGE电泳和Western blotting分析。SDS-PAGE电泳检测初步确定重组融合蛋白pET32a-LI0902、pET32a-LI1022能够进行表达,分别得到53、37kDa的条带;Western blotting分析则初步确定pET32a-LI1022具有抗原性。研究结果首次验证胞内劳森氏菌外膜蛋白基因是否具有抗原性,为诊断试剂盒及基因工程疫苗的研制提供理论基础。
- 肖爱欢谢丽华廖承球兰家暖李茂宁侯韶毅陆仕勇黄伟坚
- 关键词：胞内劳森氏菌抗原性候选基因SDS-PAGE电泳BLOTTING
- 猪圆环病毒2型核酸疫苗的小鼠免疫保护试验被引量：1
- 2010年
- 为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)核酸疫苗在小鼠攻毒试验中的免疫保护效果,以PCV-2 GXWZ-1株为模板,扩增出ORF2基因及其截短基因8个片段(A(ORF2)、B(51-100aa)、C(101-150aa)、D(181-235aa)、E(151-200aa)、F(51-150aa)、G(101-235aa)、H(51-235aa)),将其插入到pcDNA3.0载体中,构建出真核表达质粒,并将其转染至PK-15细胞,用间接免疫荧光试验检测其瞬时表达情况。将试验小鼠随机分成9组,其中免疫组7组,阴阳性对照各1组,将纯化的真核表达质粒对小鼠进行组合免疫;二免后,用经处理过的PCV-2 GXWZ-2株阳性病料悬液腹腔注射免疫组和非免疫对照组小鼠,阴性对照组用生理盐水腹腔注射;其后进行体重记录、病理切片制作及PCR检测。结果表明:共有6个真核表达质粒成功在PK-15细胞中表达。在攻毒后的3周内,阳性对照组小鼠PCR诊断均为阳性;免疫组中,部分组小鼠在攻毒后第1周或在第2周为阳性,到第3周时各免疫组小鼠全部为阴性;阴性对照组始终为阴性。免疫组在病理保护学方面明显优于非免疫对照组,非免疫对照组的体重增长速率略低于免疫组和阴性对照组。由此可见猪圆环病毒2型核酸疫苗在小鼠攻毒试验中有明显的保护作用。
- 张宁侯韶毅韦英益李茂宁肖爱欢谢丽华刘芳高永锐卢桂娟陆有飞黄伟坚
- 关键词：重组质粒间接免疫荧光试验免疫保护效果
- 猪圆环病毒2型ORF2截短基因片段真核表达载体的构建及其DNA疫苗的免疫效果被引量：2
- 2009年
- 为研究猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2截短基因片段核酸疫苗的免疫效果,以PCV-2 GXWZ-1株为模板,用PCR方法扩增出ORF2基因及其截短基因共8个片段[A(ORF2)、B(51～100 aa)、C(101～150 aa)、D(181～235 aa)、E(151～200 aa)、F(51～150 aa)、G(101～235 aa)、H(51～235 aa)],将其插入pcD-NA3.0载体中,成功构建了pcDNA-A、pcDNA-B、pcDNA-C、pcDNA-D、pcDNA-E、pcDNA-F、pcDNA-G、pcDNA-H。将纯化后的真核表达质粒转染PK-15细胞后,用间接免疫荧光试验检测各个质粒在细胞中的瞬时表达情况。分别用单独免疫和组合免疫的方法免疫小鼠,每只0.15 mg,用ELISA试剂盒检测小鼠血清中的抗体效价,并分析这两种方法的免疫效果。结果显示,6个片段较短的重组质粒(pcDNA-B、pcDNA-C、pcDNA-D、pcDNA-E、pcDNA-F、pcDNA-G)转染的细胞中均有明显且较亮的荧光出现,而2个片段较长的重组质粒(pcDNA-A、pcDNA-H)及空载体pcDNA3.0转染的细胞中没有荧光出现。在单独免疫组中,这8个片段的真核表达质粒都能刺激机体产生特异性抗体,其中片段较短的pcDNA-C、pcDNA-D、pcDNA-E的免疫效果比较理想;在组合免疫中,除pcDNA-C-F外,各个真核表达质粒都能产生较高水平且稳定的抗体,其中pcDNA-D-H、pcDNA-B-F的免疫效果最好。表明组合免疫要比单独免疫的效果好。
- 张宁李茂宁侯韶毅兰家暖谢丽华黄伟坚冯励韦英益刘芳李军
- 关键词：猪圆环病毒2型真核表达重组质粒免疫效果
- 广西猪流感病毒的分离及NA基因的遗传进化分析
- 本研究通过鸡胚接种分离到3株猪流感病毒,经HI、RT-PCR鉴定,其中GXHZ株为H1N2亚型毒株,GXLZ、GXXY株为H3N2亚型毒株,并对分离株进行EID50测定及GXHZ株的猪体攻毒试验。所扩增分离到3株SIV病...
- 侯韶毅梁家幸梁保忠姚瑞英黄安国蒋玉雯高永锐冯建远卢桂娟陆有飞黄庆南黄伟坚赵武李斌
- 关键词：猪流感病毒NA基因亲缘关系
- 文献传递
- 一种快速区分PEDV和PReoV的二重RT-PCR检测引物及试剂盒
- 本发明公开了一种快速区分PEDV和PReoV的二重RT‑PCR检测引物及试剂盒，属于动物病毒学和分子生物学技术领域。该试剂盒包括SEQ ID1~4所示的引物序列，还包括了PrimeSTAR HR缓冲液、cDNA模板和灭菌...
- 卢冰霞何颖秦毅斌周英宁李斌刘磊陈忠伟赵武闭炳芬段群棚苏乾莲卢敬专蒋冬福梁家幸李茂宁侯韶毅
- 文献传递
- 猪流感病毒分离及表面抗原基因序列分析
- 【目的】通过病毒分离和序列分析来探究广西猪流感病毒（SIV）的流行及其基因构成情况。【方法】采集疑似临床样品,通过接种SPF鸡胚及MDCK细胞分离病毒,应用RT-PCR扩增分离株HA和NA全基因,并使用分子生物软件对所得...
- 侯韶毅张民秀卢桂娟高永锐刘芳陆增荣黄伟坚
- 关键词：HA基因NA基因基因重配遗传进化
- 文献传递
- 广西马流感的诊断被引量：5
- 2010年
- 蒙振亩张民秀侯韶毅覃勇卢桂娟兰家暖廖承球黄伟坚
- 关键词：马流感病毒接触性传染病马属动物细菌性疾病
- 广西猪流感病毒分离及全基因序列分析
- 侯韶毅
- 文献传递网络资源链接
- 广西猪增生性肠炎的PCR诊断被引量：2
- 2009年
- 兰家暖肖爱欢谢丽华侯韶毅陈云霞黄伟坚
- 关键词：猪增生性肠炎PCR诊断接触性传染病顽固性腹泻猪回肠炎饲料报酬
- 一种快速区分TGEV和PReoV的二重RT-PCR检测引物及试剂盒
- 本发明公开了一种快速区分TGEV和PReoV的二重RT‑PCR检测引物及试剂盒，属于动物病毒学和分子生物学技术领域。该试剂盒包括SEQ ID1~4所示的引物序列，还包括了PrimeSTAR HR缓冲液和灭菌水、cDNA模...
- 卢冰霞赵武刘磊秦毅斌段群棚周英宁陈忠伟何颖李斌闭炳芬蒋冬福梁家幸卢敬专苏乾莲侯韶毅李茂宁
- 文献传递
