冯子强
- 作品数：8 被引量：43H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人参总皂苷TSPG联合EPO对白血病细胞KG1-α增殖的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨人参总皂苷TSPG单独或联合人促红细胞生成素(EPO)对人白血病细胞KG1-α增殖的影响及机制探讨。方法体外培养KG1-α细胞,选取处于对数生长期的细胞用于实验。空白对照组予以常规培养;人参总皂苷TSPG组分别加入25、50、100、200、400 mg/L TSPG;人参总皂苷+EPO组加入上述等量TSPG,同时加入0.5 U/L EPO,并设置EPO对照组。培养3、7、14 d后用CCK-8法检测TSPG单独或联合EPO对KG1-α细胞增殖的影响;运用Real-time PCR技术检测EPOR、STAT5、Jak2、AKT等EPO/EPOR通路相关基因的表达。用Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3、P53、P16等蛋白的表达,EPOR蛋白的表达及其活性。结果人参总皂苷TSPG在体外能明显抑制KG1-α细胞的增殖,100μmol/L为最适作用浓度,7 d为最适作用时间,如果在EPO存在的条件下,其最适浓度则降低到75 mg/L;与对照组相比,在EPO存在的条件下人参总皂苷TSPG诱导可明显使细胞阻滞于G0/G1期,若不使用EPO则TSPG对细胞周期无影响;Real-time PCR检测结果显示TSPG诱导组KG1-α细胞内EPOR、Jak2、STAT5等由EPOR介导的JAK-STAT通路相关基因的表达均随TSPG浓度增加而降低,其中高浓度具有明显差异(P<0.05);Western blot检测经单独使用TSPG处理了7 d的KG1-α细胞,与对照组相比,其EPOR及p-EPOR表达明显下调,Jak2、STAT5、p-STAT5、Bcl-2蛋白表达下调,而Bax、Cleaved Caspase-3表达增高,P53及P16无变化;然而添加了EPO处理的各组p-EPOR、Jak2、p-STAT5、P53及P16的表达明显增加,Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3的表达没有变化。结论 TSPG能下调细胞内由EPOR介导的Jak-STAT通路相关蛋白的表达,并降低EPOR的活性,进而下调Bcl-2、上调Bax和Cleaved Caspase-3来促进细胞凋亡;而添加了EPO后这种作用被拮抗,抑制细胞增殖的作用是通过上调P53及P16促进细胞衰老而产生的。
- 李丹阳夏菁冯子强石庆强游智梅刘泽洪陈地龙李静
- 关键词：人参总皂苷促红细胞生成素细胞衰老
- 人参皂苷Rh2抑制肝癌HepG2细胞迁移的实验研究被引量：20
- 2015年
- 目的：研究人参皂苷Rh2对肝癌Hep G2细胞迁移的影响及其机制。方法：取对数生长期Hep G2细胞,Rh2（10~160μmol/L）诱导,同时设空白对照组,用CCK-8检测Rh2对细胞增殖影响;Transwell检测Rh2对细胞的迁移的影响;荧光素报告基因筛选可能的信号通路;Western blot检测Hep G2细胞中P-ERK、ERK、P-P38、P-38、P-JUK、JUK、MMP3等蛋白的表达;定量PCR方法检测AP1、MMP3基因的表达;荧光显微镜分别观察AP1、MMP3蛋白在细胞内的表达及分布。结果：CCK-8检测结果显示Rh2对肝癌Hep G2细胞生长抑制呈剂量和时间依赖性;Transwell检测显示Rh2对肝癌Hep G2细胞迁移有明显的抑制作用;荧光素报告基因筛选出AP1转录因子;Western blot检测结果显示P-ERK、MMP3蛋白表达水平呈下降趋势,PJUK、P-P38蛋白表达水平明显升高,ERK、JUK、P38蛋白则无明显变化;定量PCR方法结果显示：AP1、MMP3的基因表达下降。荧光结果显示：AP1、MMP3均分布在胞质内,随药物浓度的增加其荧光表达量减弱。结论：人参皂苷Rh2可通过激活MAPK通路来抑制肝癌Hep G2细胞的迁移。
- 冯子强左国伟石庆强赵绿翠罗念游智梅夏菁李丹阳李静陈地龙
- 关键词：HEP迁移MAPK通路MMP3
- 中药有效成分抑制肿瘤细胞迁移和逆转多药耐药的实验研究
- 第一部分:人参皂苷Rh2抑制肝癌HepG2细胞迁移的实验研究 肝癌是我国常见的恶性肿瘤，作为一种多发性恶性肿瘤，它严重危害着人类的生命健康。原发性肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)在...
- 冯子强
- 关键词：多药耐药性人参皂苷RH2吴茱萸碱
- 二烯丙基二硫对人白血病KG1-α细胞增殖的影响
- 2014年
- 目的 ：探讨二烯丙基二硫（diallyl disuli de,DADS）对人白血病细胞系KG1-α增殖的抑制作用及其对丙酮酸激酶M2（pyruvate kinase M2,PKM2）的影响。方法 ：首先采用蛋白质印迹法筛选PKM2高表达的白血病细胞株;CCK-8（cell counting kit-8）法检测不同浓度的DADS（50～400μmol/L）作用24、48和72 h后,对高表达PKM2的白血病细胞株KG1-α增殖的影响;FCM法检测对KG1-α细胞周期的影响,Hochest 33258染法色观察对KG1-α细胞凋亡形态学的影响;蛋白质印迹法检测PKM2、PIN1、细胞周期蛋白D1以及p21蛋白的表达;免疫荧光法检测PKM2在细胞质及细胞核中的分布情况。结果 ：PKM2在KG1-α细胞中高表达;CCK-8结果显示,DADS在50～400μmol/L浓度范围内对KG1-α细胞均有明显的抑制作用;FCM法检测结果显示,DADS（50和100μmol/L）作用48 h后,药物组中G0/G1期细胞所占的比例明显增加;Hochest 33258染色结果显示,DADS诱导后KG1-α细胞呈现典型的凋亡形态学改变;DADS作用8 h后,蛋白质印迹法和免疫荧光检测结果均显示,PKM2蛋白在细胞核中的表达水平呈下调趋势;PIN1蛋白的表达水平下调;DADS作用48 h后,KG1-α细胞中细胞周期蛋白D1的表达水平下调,而p21蛋白的表达水平上调（P均〈0.05）。结论 ：DADS对KG1-α细胞增殖抑制的机制可能与下调PKM2的表达,并使其细胞周期阻滞在G0/G1期有关。
- 罗念陈地龙左国伟夏菁游智梅李丹阳冯子强石庆强赵绿翠李静
- 关键词：白血病二烯丙基二硫丙酮酸激酶细胞周期
- 人参皂苷Rh2通过激活Gsk-3β削弱β-catenin在肝癌HepG2细胞中的作用被引量：1
- 2015年
- 目的：研究人参皂苷Rh2对HepG2细胞的作用机制。方法：用pLOV-EF1a-MCS-3FLAG-β-catenin慢病毒感染HepG2细胞,运用荧光显微镜观察细胞荧光强度变化。通过CCK-8法检测细胞增殖反应。采用FCM检测细胞周期及凋亡变化;利用ELISA法检测细胞产生Gsk-3β活性;用PCR法检测细胞Gsk-3β、β-catenin、Bcl2、CyclinD1、Bax、MMP3基因的表达;用CHIP法检测细胞Bcl2、CyclinD1、Bax、MMP3基因的表达;运用Western blot法检测细胞Gsk-3β、β-catenin、Bcl2、CyclinD1、Bax、MMP3蛋白的表达。结果：用pLOV-EF1a-MCS-3FLAG-β-catenin慢病毒感染HepG2细胞,被感染的HepG2细胞命名为HepG2-β-catenin;CCK-8分析结果显示,加药组给予（10-160μmol/L）Rh2后HepG2及HepG2-β-catenin细胞的增殖受到抑制,且Rh2对肝癌HepG2-β-catenin和HepG2细胞的生长抑制呈剂量和时间依赖。在HepG2细胞中48、72 h半数抑制率分别为100μmol/L,58.12μmol/L,在HepG2-β-catenin细胞中48、72 h半数抑制率分别是129.2μmol/L,83.33μmol/L,故Rh2作用于HepG2-β-catenin细胞浓度均高于HepG2细胞,与HepG2细胞组比较差异具有统计学意义（P〈0.01）。FCM检测结果显示,Rh2可诱导HepG2和HepG2-β-catenin细胞周期阻滞在G0/G1期,HepG2＋Rh2组G0/G1期（64.57±0.65）,而HepG2-β-catenin＋Rh2组G0/G1期（58.61±2.01）;FCM检测结果显示,Rh2可诱导HepG2和HepG2-β-catenin细胞早期凋亡,HepG2＋Rh2组凋亡率（17.27±2.77）,而HepG2-β-catenin＋Rh2组凋亡率（9.02±1.76）。ELISA结果显示,Rh2作用HepG2细胞12、24、48、72 h后,Gsk-3β的活性随着作用时间延长,逐渐升高,在48 h最高,随后其活性开始降低。Rh2诱导HepG2和HepG2-β-catenin细胞48 h,与对照组相比,Gsk-3β的活性均增高,而加入Bio后其活性降低,HepG2＋Rh和HepG2-β-catenin＋Rh2组间无明显差异;PCR、CHIP、WB结果显示,人参皂苷Rh2诱导HepG2和HepG2-β-catenin细胞后,Gsk-3β、Bax基因及蛋白表达增加,而β-catenin、CyclinD1、Bcl2、MMP3基因及�
- 石庆强左国伟冯子强赵绿翠罗念游智梅夏菁李丹阳李静陈地龙
- 关键词：人参皂苷RH2HEPG2GSK-3ΒΒ-CATENIN
- 人参皂苷Rh_2通过激活GSK-3β降解β-catenin发挥抗肝癌作用研究被引量：9
- 2016年
- 目的探讨人参皂苷Rh2抗肝癌作用机制。方法 HE染色观察HepG2和HepG2-β-catenin荷瘤裸鼠肿瘤组织的细胞形态;免疫组化检测GSK-3β、β-catenin和MMP-3表达;ELISA法检测肿瘤细胞GSK-3β活性;PCR检测GSK-3β、β-catenin、Bcl-2、Cyclin D1、Bax和MMP-3基因的表达;Western blotting蛋白印迹法检测GSK-3β和β-catenin的表达。结果 HepG2组和HepG2-β-catenin组荷瘤裸鼠肿瘤细胞核成异型性,占整个细胞比例大,但HepG2-β-catenin组更明显。HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组和HepG2+人参皂苷Rh2组肿瘤细胞胞核固缩,出现大量破碎细胞,而HepG2+人参皂苷Rh2组肿瘤细胞核固缩及破碎细胞更明显。免疫组化结果显示人参皂苷Rh2诱导HepG2及HepG2-β-catenin荷瘤裸鼠后,GSK-3β表达增强,β-catenin、MMP-3表达降低;HepG2+人参皂苷Rh2组中β-catenin、MMP-3表达弱于HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组,而GSK-3β表达则无明显差异。ELISA结果显示,人参皂苷Rh2诱导HepG2及HepG2-β-catenin荷瘤裸鼠后,GSK-3β的活性均升高。PCR结果显示,HepG2+人参皂苷Rh2组中β-catenin、Cyclin D1、Bcl-2基因表达弱于HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组,Bax基因表达增强更明显,而GSK-3β基因表达无明显差异。Western blotting结果显示,HepG2+人参皂苷Rh2组中β-catenin蛋白表达弱于HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组,而GSK-3β蛋白表达无明显差异。结论人参皂苷Rh2对肝癌的抑制作用是通过激活GSK-3β降解β-catenin而实现的,且能抑制肿瘤的转移。
- 石庆强左国伟冯子强赵绿翠李静陈地龙
- 关键词：人参皂苷RH2HEPG2糖原合成酶激酶-3ΒΒ-链蛋白肝癌
- 吴茱萸碱逆转K562/Adr细胞多药耐药的实验研究被引量：7
- 2016年
- 目的探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对白血病K562细胞及其耐药株K562/Adr的增殖、细胞周期及多药耐药性(MDR)的影响。方法用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)检测EVO和/或柔红霉素(DNR)对细胞增殖的影响,并计算耐药指数(RI)和逆转倍数(RF);流式细胞仪检测EVO和/或DNR对K562及K562/Adr细胞周期的影响;流式细胞仪检测K562及K562/Adr细胞内DNR的荧光强度;定量PCR检测K562及K562/Adr细胞中MDR1基因的表达;Western blotting检测K562及K562/Adr细胞中MDR1、BCRP蛋白的表达。结果EVO、DNR作用于K562和K562/Adr细胞后,细胞增殖受到抑制,且呈剂量和时间依赖性;与K562细胞相比,K562/Adr细胞对DNR的RI为30.54,K562/Adr细胞对EVO的RI为19.09。当EVO(0.125 gmol/L)与不同浓度DNR联合作用后,能使DNR对K562/Adr细胞的IC_(50)明显下降,DNR+EVO对K562/Adr细胞的RF为12.07;EVO、DNR单独或联合作用于K562及K562/Adr细胞后,能够使K562/Adr细胞BCRP、MDR1蛋白及mRNA表达水平均明显下降。结论EVO能有效逆转白血病K562/Adr细胞对DNR的耐药现象,而这种作用可能与EVO通过减少细胞膜上多药耐药蛋白MDR1的表达有关。
- 李晓朋冯子强石雪萍李静
- 关键词：吴茱萸碱多药耐药性BCRP
- 曲古抑菌素对HepG2细胞增殖的影响及相关机制被引量：2
- 2014年
- 目的：研究曲古抑菌素（TSA）对HepG2细胞凋亡的影响及可能的机制。方法取对数生长期HepG2细胞，TSA（50-500 nmol/L）诱导，同时设空白对照组，用CCK-8检测细胞增殖影响；流式细胞术检测细胞周期；Annexin V-FTIC/PI双染细胞检测凋亡；倒置显微镜观察细胞形态并采图；Western blot检测HepG2细胞中β-catenin、HDAC1、HDAC3、H3K9、CyclinD1、Bax等蛋白的表达。定量PCR方法检测HDAC1，HDAC3基因的表达。结果 CCK-8检测结果显示TSA对肝癌HepG2细胞生长抑制呈剂量和时间依赖性；流式细胞术检测细胞周期表明，药物组细胞G0/G1期所占比例增加，S期所占比例下降，G2/M所占比例增加；细胞凋亡检测表明，空白对照组凋亡率（6.22±0.25）%；250 nmol/L组凋亡率（7.17±0.20）%；500 nmol/L组凋亡率（18.14±0.42）%；倒置显微镜下观察可见，随着时间推移空白对照组细胞生长良好；而药物组细胞则出现变形，有大量漂浮细胞；Western blot检测结果显示β-catenin、H3K9和Bax蛋白表达水平均明显升高，CyclinD1、HDAC1、HDAC3的表达水平则呈下降趋势；定量PCR结果显示：HDAC1、HDAC3基因的表达无明显变化。结论 TSA可通过抑制HDAC的活性，促进组蛋白乙酰化，活化Wnt/β-catenin信号通路来发挥其抑制HepG2细胞增殖，诱导周期阻滞及凋亡的作用。
- 石庆强左国伟冯子强赵绿翠罗念游智梅夏菁李丹阳李静陈地龙
- 关键词：HEPG2细胞曲古抑菌素凋亡Β-CATENIN组蛋白乙酰化
