单世平
- 作品数：9 被引量：32H指数：3
- 供职机构：湖南师范大学生命科学学院微生物分子生物学湖南省重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 定点突变技术研究苏云金杆菌Cry1类晶体蛋白结构与功能的进展被引量：1
- 2007年
- 近年来利用定点突变技术研究苏云金杆菌(Bacillus thuringiesis,Bt)杀虫晶体蛋白(Insecticidal crystal proteins,ICP)作用机制已取得良好进展.杀虫晶体蛋白不同结构域上氨基酸残基的突变将影响其稳定性,与受体的结合,不可逆的昆虫中肠膜插入及离子通道活性的强弱等.突变研究表明,结构域Ⅰ参与不可逆结合及插入昆虫中肠膜过程;结构域Ⅱ参与受体结合,包括初始结合与不可逆结合;结构域Ⅲ在杀虫特异性和维持三维结构的稳定性方面起重要作用,同时,可能参与离子通道的形成,受体结合和插入昆虫中肠膜过程.利用各种定点突变技术对各位点进行突变可以研究单一位点的功能,到目前为止,已有很多关于这方面的研究,并且筛选到了毒力提高的工程菌株.
- 张春艳胡胜标单世平夏立秋
- 关键词：苏云金杆菌杀虫晶体蛋白定点突变
- 新型蛋白酶抑制剂基因hwtx-11在大肠杆菌中的克隆表达及杀虫功能研究被引量：2
- 2007年
- 将化学合成的蜘蛛毒素蛋白酶抑制剂基因hwtx-11克隆至载体pGEX4T-1上,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达.重组菌株在IPTG诱导下,经SDS-PAGE和Western blot分析表明,表达的GST-HWTX-11融合蛋白的相对分子量约为33 kD.对重组菌株诱导表达后的产物进行生物活性测定,GST-HWTX-11融合蛋白对甜菜夜蛾(Spodoptera exiguaHubner)和棉铃虫(Helicoverpa armigera)在3d时的LC50分别为86.6μg/mL、119.4μg/mL;其与Cry1Ac对甜菜夜蛾和棉铃虫幼虫毒力也有明显的协同作用.
- 夏立秋曾智贺小红付祖姣单世平丁学知孙运军李文萍王海龙罗玉双
- 关键词：WESTERNBLOT生物活性测定
- 细菌活性产物基因簇的克隆、异源表达及其结构与功能研究
- 细菌（特别是放线菌和粘细菌）能够生产大量具有良好生物活性的天然化合物，这些化合物大都是由聚酮合酶或非核糖体肽合成酶等多酶复合体顺序催化下，经过连续的缩合反应合成的聚酮或聚肽类化合物。虽然这些化合物都来源于简单的小分子羧酸...
- 单世平
- 关键词：基因簇基因克隆异源表达生物活性
- 文献传递
- W544F定点突变提高苏云金杆菌Cry1Ac蛋白的稳定性被引量：2
- 2008年
- W544是Cry1Ac蛋白上独特于其它Cry类蛋白的一个氨基酸,它与F578和F604一起组成一个'螺旋桨状'的疏水簇,通过疏水相互作用维持蛋白的三维结构稳定.本研究通过定点突变将W544保守地替换为苯丙氨酸,SDS-PAGE分析结果表明其纯化的原毒素对紫外照射、胰蛋白酶处理和室温存贮的稳定性相对于野生Cry1Ac都有一定程度的提高;经原子力显微镜观察,发现W544F产生的晶体两个顶点间的垂直距离比野生型Cry1Ac约长0.6μm,且晶体表面不及野生型光滑;此外,W544F与野生Cry1Ac的杀虫活性相似,但经过紫外光照射9 h后,其保留的杀虫活性比野生型高4倍以上.W544F突变较好地解决了Cry1Ac毒素蛋白田间应用不持久的问题,具有重要的应用价值.
- 王发祥夏立秋丁学知赵新民单世平莫湘涛张友明喻子牛
- 关键词：定点突变色氨酸苯丙氨酸稳定性
- 苏云金芽孢杆菌毒素Cry1Aa，Cry2Aa，Cry3Aa和Cry4Aa结构的计算机对比分析被引量：8
- 2008年
- 运用生物信息学软件对苏云金芽孢杆菌毒素Cry1Aa,Cry2Aa,Cry3Aa和Cry4Aa的基本参数、一级结构、二级结构、三级结构、跨膜区和表面电势进行了预测比较.它们在一级结构上有较大差异,但二级结构和跨膜区相似,三级结构中各毒素的结构域I之间基本相似,结构域II之间差异较大,其中Cry2Aa为差异最大成员.4种毒素的表面电势分布不同.毒素之间的结构相似性和差异性与其作用机理和杀虫特异性有关.
- 赵新民夏立秋王发祥丁学知单世平张友明
- 关键词：苏云金芽孢杆菌毒素生物信息学计算机
- DNA改组的最新动态及应用前景被引量：4
- 2009年
- DNA改组(DNA shuffling)是目前最方便、有效的一种分子水平的体外定向进化技术,该技术同倾向错误PCR(Error-prone PCR)相结合,通过对单基因或相关基因家族的靶序列进行多轮随机诱变、重组和高通量的筛选,可以有效富集正突变,去除负突变,提高突变文库的丰度,创造新基因和获得期望功能的蛋白质。DNA改组技术已在新药物等领域取得了广泛的应用,极大地推动了现代生物科学和生物技术的发展。该技术同计算机强大的数据分析系统相结合,将会为后基因组学的发展提供强有力的技术平台。
- 单世平夏立秋丁学知刘石泉张友明
- 关键词：DNA改组基因家族后基因组学
- DNA克隆修饰新技术研究及其应用
- 王海龙张友明张允雷黄璠唐滢单世平吴风颜富贾亮丁学知胡胜标夏立秋
- 关键词：DNA克隆
- 苏云金芽孢杆菌高效价杀虫剂的研究进展被引量：16
- 2008年
- 苏云金芽孢杆菌制剂是目前应用广泛而有效的一种微生物杀虫剂。本文从菌种分离筛选、构建遗传工程菌、突变筛选及定向进化等方面介绍了获得苏云芽孢金杆菌高效价杀虫的几种研究策略,并对各种策略的进展及应用前景进行了简要综述。
- 刘石泉单世平夏立秋
- 关键词：定向进化
- DNA克隆修饰新技术研究及其应用
- 目前主要的DNA克隆和修饰技术包括体外进化(DNA shuffling),位点特异性重组和Red/ET同源重组等。这些DNA克隆和修饰技术被广泛应用于功能基因组学和代谢工程研究。位点特异性重组和Red/ET同源重组尤其适...
- 王海龙张友明张允雷黄璠唐滢单世平吴风颜富贾亮丁学知胡胜标夏立秋
- 关键词：DNA克隆功能基因组学代谢工程
- 文献传递
