洪孟民
- 作品数：44 被引量：682H指数：15
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划美国洛克菲勒基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 水稻蜡质基因5’端上游顺序中的核蛋白结合区被引量：9
- 1996年
- 通过ｗｘ基因转录起始点上游２１２０ｂｐ长的ＤＮＡ序列的测定，用不同的限制性内切酶对此片段进行消化，获得１５个大小不同的ＤＮＡ片段并构建成不同的亚克隆。这些片段经３２Ｐ标记后分别做探针同水稻不同组织来源的核蛋白进行凝胶滞后实验和特异的竞争实验，表明ＨｉｎｆＩａ－２、ＨｉｎｆＩｃ－１、ＨｉｎｆＩｃ－２、ＨｉｎｆＩｄ、ＲｓａＩａ和ＲｓａＩｅ（ＲｓａＩａ片段与ＨｉｎｆＩａ、ＨｉｎｆＩｃ片段重叠）片段能与从未成熟的水稻种子中抽提的核蛋白结合。
- 陈丽王宗阳张景六蔡秀玲洪孟民
- 关键词：水稻蜡质基因
- 水稻腊质基因分子特性的研究被引量：17
- 1991年
- 水稻腊质基因(Wx)负责胚乳与花粉粒中直链淀粉的合成。我们通过对限制图和DNA顺序有重叠的两个基因组克隆的分析,测定出了水稻Wx基因全长为5499bp的DNA顺序。比较水稻、玉米(Klsgen等)和大麦(Rohde等)中Wx基因的DNA顺序,弄清水稻Wx基因中存在13个内含子和14个外显子,通过微机对外显子顺序的翻译,得出了水稻Wx蛋白包括转运肽在内的609个氨基酸的排列顺序,并计算出它的分子量约为72kD。经比较,水稻Wx成熟蛋白的氨基酸顺序与玉米、大麦的没有明显地差异。但是,水稻Wx基因5′-上游区、3′-下游区和内含子区域的DNA顺序,以及Wx前体蛋白的转运肽区域的氨基酸顺序与玉米和大麦Wx基因的相应区域相比,它们之间的同源性却很低。
- 王宗阳武志亮邢彦彦郑霏琴郭小丽张伟国洪孟民
- 关键词：水稻WX基因
- 转基因植物中基因表达的共抑制现象被引量：7
- 1994年
- 洪孟民
- 关键词：转基因植物基因表达共抑制
- 水稻bZIP蛋白REB结合Wx基因启动子中的GCN4基序被引量：9
- 2002年
- 在水稻Wx基因启动子中找到了一个由胚乳基序（EM）和GCN4基序组成的双元胚乳盒.许多文献报道,种子贮存蛋白基因启动子中的胚乳盒与基因的种子专一性表达有关,一类bZIP家族的转录因子通过结合胚乳盒中的GCN4基序而调控相应基因在种子中专一性表达.本文证明了水稻Wx基因启动子的胚乳盒中的GCN4基序能被水稻未成熟种子中的核蛋白识别并结合.进一步采用PCR的方法克隆了水稻bZIP家族的转录因子——REB的部分cDNA,并在E.coli中表达了REB融合蛋白.凝胶滞后试验结果表明,除文献报道,REB能结合α-globulin启动子上的靶位点外,REB也能识别并结合水稻Wx基因启动子的GCN4基序.
- 程世军王宗阳洪孟民
- 关键词：水稻转录因子基因表达
- 水稻腊质基因的分子克隆被引量：2
- 1990年
- 利用λ EMBL3为载体构建了水稻寒丰6366的基因文库,重组噬菌体数目达4×10~5,超过了要求的理论值。用缺口平移法标记玉米Wx基因DNA片段作探针,从基因文库中筛选出阳性杂交克隆。对其中一个阳性克隆,λ Wx2的Southern分析表明,它和玉米Wx基因编码区杂交。根据绘出的物理图,将杂交区内一个0.4kb的BS片段克隆到M13上,测定了DNA顺序。结果表明,该区域内水稻和玉米Wx基因外显子DNA同源性在80%以上。这说明我们确实得到了水稻Wx基因克隆,而且水稻和玉米的Wx基因是高度同源的。
- 武志亮王宗阳郑霏琴郭小丽洪孟民
- 关键词：水稻基因文库
- HAP转录因子与DNA 结合的活力受细胞内氧化还原系统的调节被引量：2
- 1999年
- ＨＡＰ 转录因子（ ＨＡＰ２／ＨＡＰ３／ＨＡＰ４／ＨＡＰ５） 是存在于酿酒酵母中的一种异源多聚蛋白，它能与酵母中许多启动子上游的ＣＣＡＡＴ盒（ 顺式作用元件） 专一性结合， 以增强基因的转录。在酵母ｈａｐ５ 突变株的细胞中，用酵母单杂交系统从水稻ｃＤＮＡＧＡＬ４ 表达文库中筛选出的阳性克隆是编码谷胱甘肽氧还蛋白的ｃＤＮＡ，提示细胞内的氧化还原系统可能作用于ＨＡＰ蛋白，从而对ＣＣＡＡＴ盒的结合活力起调节作用。对ＨＡＰ３
- 姚泉洪邢彦彦王宗阳张景六洪孟民
- 关键词：转录因子氧化还原系统
- 水稻蜡质基因中两种类似转座因子的顺序被引量：14
- 1993年
- 本实验从粳稻、籼稻与野生稻中分别克隆出了它们的蜡质基因(Wx-R-jp,Wx-R-id与Wx-R-sp),并且测定了它们的全顺序。将这3个蜡质基因的核苷酸顺序进行比较,结果表明在粳稻与籼稻蜡质基因的两个内含子与5′上游区中含有两种类似转座因子的结构,称之为RTL-1和RTL-2。RTL-1与缬氨酸tRNA基因及RNA多聚酶Ⅲ内部启动子顺序有一定程度的同源性。RTL-2能形成“茎环”结构。邻接RTL-1或RTL-2的两端都有短的顺向重复顺序。从分子结构上推测RTL-1类似于哺乳动物中的转座因子SINE (Short Interspersed Repeated DNA Elements),而RTL-2则与果蝇中的转座因子FB(foldback)有许多相似之处。
- 王宗阳郑霏琴高继平王小全吴敏张景六洪孟民
- 关键词：转座因子SINE水稻蜡质基因
- 分子遗传学促进生命科学的发展
- 1994年
- 分子遗传学是遗传学的一个分支学科,它着重在分子水平上阐明生物遗传与变异的规律,与生物学各学科有着密切的关系。该学科的基础研究不但促进了生命科学的发展,而且还为工业、农业与医学生物工程产业的兴起起了巨大的推动作用。
- 洪孟民
- 关键词：分子遗传学医学生物工程生物遗传基因控制调控元件遗传学家
- 水稻cDNAc73片段在大肠杆菌中的表达及其产物的纯化被引量：9
- 1999年
- 曾以水稻蜡质基因５’调控区内一段３１ ｂｐ 片段为探针，用酵母单杂交法从水稻ｃＤＮＡ 文库中筛选出若干个其编码的蛋白可能与此３１ ｂｐ 片段结合的ｃＤＮＡ克隆，现将其中的ｐＣ７３ 克隆中的插入片段ｃ７３ 连接到含Ｈｉｓ６ 的表达载体ｐＥＴ２８ｃ（ ＋ ） 上，在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３） 中进行诱导表达，并用ＮｉＮＴＡ 树脂纯化得到预期的融合表达产物。在合适的诱导表达条件下，融合表达产物主要以可溶形式存在于大肠杆菌细胞内；表达量占到大肠杆菌总蛋白的１０ ％ 左右；经ＮｉＮＴＡ 树脂亲和层析纯化得到的产物纯度达９５ ％ ，可供进一步研究之用。
- 唐威华仇子龙王宗阳张景六洪孟民
- 关键词：水稻转录因子DNA结合蛋白
- 根癌农杆菌介导的水稻高效转化系统的建立被引量：289
- 1998年
- 比较了影响根癌农杆菌转化水稻的各种因素后，建立了农杆菌介导的水稻高效转基因实验体系。按该体系，水稻品种中花11号预培养4d的幼胚经农杆菌EHA105／pCAMBIA1301感染后，具有GUS基因瞬间表达的幼胚比例在50％以上，最高可达90％；按产生潮霉素抗性愈伤和转基因植株的比例计算，转化率分别达到87．6％和64．6％。转基因植株总DNA的Southern杂交分析表明T－DNA上的外源基因已整合进了水稻基因组，且在大多数转基因植株中表现为单拷贝插入；遗传分析证明T1代的表型分离符合孟德尔法则。此转化系统的建立为高效地将有用的外源DNA导入水稻植株奠定了基础。
- 刘巧泉张景六王宗阳洪孟民顾铭洪
- 关键词：水稻根癌农杆菌基因转化转基因植株幼胚
