王蕙芬
- 作品数：12 被引量：21H指数：3
- 供职机构：河北医科大学更多>>
- 发文基金：河北省科学技术研究与发展计划项目河北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 中药黄芪注射液、猪苓多糖注射液影响S180肿瘤细胞培养上清免疫抑制作用的研究
- 目的:研究临床常用抗瘤中药黄芪、猪苓多糖体外对肿瘤细胞S180培养上清免疫抑制作用的影响,探讨黄芪、猪苓多糖的抗肿瘤免疫机制。方法:用无中药作用的以及有中药作用的S180肿瘤细胞培养上清(简称肿瘤上清),以MTT法检测其...
- 杨丽娟王润田王蕙芬刘京生
- 关键词：猪苓多糖免疫抑制
- 文献传递
- 模拟mIL-18天然生成真核表达体系的构建及生物活性初探被引量：3
- 2003年
- 目的 构建模拟小鼠IL 18(mIL 18)天然生成真核表达体系 ,并探讨其与人IL 2 (hIL 2 )真核表达载体pVR10 12 hIL 2 (phIL 2 )体内外共转染对细胞免疫功能的影响。方法 分别构建小鼠IL 18前体 (mproIL 18)和小鼠IL 1β转换酶 (mICE)的真核表达载体pVR10 12 mproIL 18(pmproIL 18)和pEGFP N1 mICE(pmICE)。两者单独或共转染COS 7细胞 ,分别在mRNA和蛋白水平检测IL 18的表达 ;将pmproIL 18、pmICE和phIL 2 3种真核表达载体分别通过体内、外共转染 ,初步检测其生物学活性。结果 pmproIL 18及pmICE构建正确 ,分别转染COS 7细胞后能检测到相应mRNA表达。在pm proIL 18单独或pmproIL 18/pmICE共转染的COS 7细胞中能检测到前体和成熟 2种不同形式的mIL 18蛋白表达 ,并且mIL 18能分泌到上清 ;所分泌的mIL 18与hIL 2体外联合作用可增强小鼠脾细胞增殖能力。pmproIL 18、pmICE和phIL 2 3种真核表达载体联合肌肉注射的小鼠脾细胞体外杀伤同基因型肿瘤细胞的能力显著提高。结论 构建的模拟mIL 18天然生成的真核表达体系 (pmproIL 18/pmICE)与phIL 2共转染有可能用于肿瘤的基因治疗。
- 李蕾王润田王兆源杨永杰葛锡锐王蕙芬
- 关键词：IL-18生物活性基因克隆
- 抗HIVp24和抗人A型红细胞双特异性抗体的制备与初步应用
- 目的:制备抗HIV p24和抗人A型红细胞双特异性抗体,建立检测HIV p24抗原的新方法。目前检测p24抗原的方法有ELISA、免疫层析、凝集试验等,本实验是用人A型红细胞作指示剂,用间接凝集反应测定p24抗原,方法简...
- 杨丽娟王润田王蕙芬
- 关键词：双特异性抗体
- 文献传递
- 抗HIV p24和人A型红细胞双特异性单克隆抗体的研制被引量：7
- 2004年
- 目的 :制备抗HIVp2 4和人A型红细胞双特异性单抗 (mAb) ,并建立检测HIVp2 4的间接血凝试验。方法 :将分泌抗HIVp2 4mAb的杂交瘤株 2 E4和分泌抗人A型红细胞mAb的杂交瘤株S2 ,分别用 8 Ag和 5 BrdU驯化 ,使成为HAT敏感株。将两者常规融合 ,筛选分泌双特异性mAb的杂交 杂交瘤株。然后制备并纯化双特异性mAb ,用其建立的间接血凝法检测p2 4。结果 :共获得 6株杂交 杂交瘤细胞株 ,以其分泌的双特异性mAb建立了检测HIVp2 4的间接血凝法 ,敏感性可达 4 0 0ng/L。结论 :获得可稳定分泌双特异性mAb的杂交 杂交瘤株 ,并用纯化的双特异性mAb建立了快速检测HIVp2
- 孟文霞王润田张玉芬张红中王蕙芬
- 关键词：HIVP24间接血凝试验
- 抗HIV-1gp120单克隆抗体的制备及其初步应用被引量：3
- 2005年
- 目的: 制备抗HIV-1 gp120单克隆抗体(mAb),并建立一种可用于检测gp120的ELISA法.方法: 采用基因工程抗原HIV-1 gp120免疫BALB/c小鼠, 通过B细胞杂交瘤技术制备抗HIV-1 gp120的mAb.用ELISA法鉴定mAb的Ig亚类、效价及特异性.用饱和硫酸铵(SAS)纯化mAb,并用HRP标记后建立双mAb夹心ELISA法.结果: 筛选出10株稳定分泌抗HIV-1 gp120 mAb的杂交瘤细胞株,9株为IgG,其中4株的腹水效价为32×10-4～256×10-4.所得mAb与HIV-1 gp41、HIV-1 p24及HIV-2 gp36 Ag均无交叉反应,仅与HIV-1 gp120产生特异性反应.用 mAb 6H9和9H12建立了双夹心ELISA法, 检测gp120抗原的灵敏度是10 μg/L.结论: 获得10株特异性强、效价高的抗HIV-1 gp120的mAb, 并建立了灵敏度良好的双mAb夹心ELISA法.
- 安庆军王润田张坤娟郝林娟张红中王蕙芬
- 关键词：HIV-1GP120单克隆抗体杂交瘤
- 抗人精子单克隆抗体的制备和特性鉴定被引量：1
- 1992年
- 用杂交瘤技术制备了12株稳定地分泌抗人精子单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用间接免疫荧光法观察这些抗体分别结合到精子不同部位,有7个抗体使精子产生头—头凝集或尾—尾凝集,有4个抗体使精子制动,只有1个抗体与淋巴细胞有交叉反应。测定了10个单克隆抗体的免疫球蛋白亚类,7个属于IgG,13个属于IgM。
- 张自渊王蕙芬
- 关键词：杂交瘤技术单克隆抗体
- 抗TCR/CD3单克隆抗体的免疫增强作用及其应用被引量：3
- 1999年
- 抗ＴＣＲ／ＣＤ３单克隆抗体（抗ＴＣＲＭｃＡｂ，抗ＣＤ３ＭｃＡｂ）对Ｔ细胞具有强活化作用，已成为当今最常用的Ｔ细胞活化剂之一。本文从免疫增强角度着重归纳了抗ＴＣＲ／ＣＤ３ＭｃＡｂ激活Ｔ细胞的条件、机制和效应。
- 张洪涛王蕙芬
- 关键词：T细胞活化免疫增强单克隆抗体
- 小鼠IL-12单链融合基因真核表达质粒构建及其肿瘤基因治疗初探被引量：2
- 2004年
- 目的 构建小鼠IL 12单链融合基因 (msIL 12 ) ,进行基因治疗初探。方法 用RT PCR法从小鼠腹腔巨噬细胞总RNA分别获取p4 0cDNA和p35cDNA ,2次PCR引入linker后 ,依次克隆入pcDNA3质粒 ,构建成msIL 12真核表达质粒 (pmsIL 12 ) ;用DEAE dextran法将PEG纯化的pmsIL 12转染COS 7细胞 ,用ELISA法检测其培养上清 (转染上清 )IL 12蛋白含量。皮内注射PEG纯化的pmsIL 12 ,用MTT法检测其对正常小鼠脾细胞NK活性的影响 ,观察其对荷H2 2腹水型肝癌细胞瘤小鼠生存期的影响。结果 所得p35cDNA序列与GenBank登录号M86 6 72完全一致 ;所得IL 12p4 0cDNA序列与GenBank登录号AH0 0 4 85 9报道完全相同 ,除第 10 0 0位碱基是G而不是A(但所编码氨基酸相同 ,都是丝氨酸 )外也与GenBank登录号M86 6 71报道相同。成功构建了小鼠IL 12单链融合基因真核表达质粒pmsIL 12 ,其转染COS 7细胞后的转染上清IL 12蛋白含量达 (2 .5 5± 0 .6 0 )ng ml。皮内注射pmsIL 12后 ,使正常小鼠脾细胞NK活性显著增强 (P <0 .0 1) ,使荷H2 2肝癌细胞瘤小鼠的生存期明显延长(P <0 .0 5 )。结论 构建了小鼠IL 12单链融合基因的真核表达质粒 ,可用于基因治疗研究。
- 王丽王润田王平姜少灏张红中佟慧李全海杨丽娟王蕙芬
- 关键词：白细胞介素-12真核表达质粒基因治疗小鼠抗原提呈细胞
- 分泌抗人B血型抗原单克隆抗体细胞株的建立和应用
- 1989年
- 检测ABO血型要耗费大量人血清,且标准血清属于多克隆抗体,不便对抗原决定基的细小差异做准确分析。为解决这些问题,本室自1985年以来,开展了抗人B血型物质单抗的研制工作,现将结果作一报告。
- 吕占军王润田张玉芬卞洪磊王蕙芬
- 关键词：单克隆抗体细胞株建立
- 抗HIV-1 p24单克隆抗体的制备、特性鉴定及初步应用被引量：3
- 2006年
- 目的:制备抗HIV1p24单克隆抗体(mAb)及特性鉴定。方法:采用细胞融合技术制备可稳定分泌抗HIV1p24mAb的杂交瘤细胞。选择高效价、识别不同抗原表位的mAb纯化后,分别包被ELISA板及作为酶标记mAb,建立双mAb夹心ELISA法,检测400份正常人血浆,20份抗HIV抗体阳性(p24抗原阴性)的血浆,20份HIV1感染的细胞培养上清及HIV1p24抗原国家参考品,并同时用进口p24抗原检测试剂盒进行对比检测。结果:经细胞融合、筛选、克隆化,共获得10株可分泌高效价mAb的杂交瘤细胞。纯化的腹水mAb经配对试验,选A值≥2.50的2株mAb建立的双mAb夹心ELISA法,敏感性可达2.5ng/L,且与进口试剂盒检测结果的一致性良好。结论:建立了具有高度敏感性和特异性的双mAb夹心ELISA法,为研制可用于检测HIV1p24抗原的试剂盒奠定了基础。
- 张红中王润田王蕙芬张坤娟王从印王丽
- 关键词：HIV-1P24单克隆抗体ELISA
