公共文化服务平台

共 7 条记录，以下是 1-7

全选清除导出

排序方式：

胰岛素受体底物1基因沉默对3T3-L1细胞CCAAT增强子结合蛋白α、过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的影响被引量：3: 2012年; 目的研究胰岛素受体底物1(IRS-1)沉默对3T3-L1前脂肪细胞分化关键分子CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA及蛋白表达的影响,并观察IRS-1沉默后前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞能力的改变,探讨胰岛素受体底物(IRSs)是否作为C/EBPα、PPARγ的上游调节信号在前脂肪细胞分化中起到重要的调节作用。方法合成4条IRS-1 shRNA,Western blotting筛选出沉默效率最高的1条。3T3-L1前脂肪细胞分为IRS-1沉默组和对照组。IRS-1沉默组细胞用沉默效率最高的IRS-1 shRNA质粒转染3T3-L1前脂肪细胞,沉默细胞中的IRS-1分子;对照组采用无意义IRS-1 shRNA质粒转染3T3-L1前脂肪细胞。转染24 h后诱导其分化成熟,分化72 h后检测促进前脂肪细胞分化的关键分子C/EBPα、PPARγ的表达。继续诱导分化至第7天,油红O染色观察IRS-1沉默后前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞的比例,检测其分化能力的改变。结果与对照组相比,IRS-1沉默组在诱导分化72 h后,Real-time PCR结果显示3T3-L1前脂肪细胞中C/EBPαmRNA、PPARγmRNA表达明显下降(Pa<0.05),Western blotting结果显示C/EBPα、PPARγ蛋白水平也同样显著下降(Pa<0.05);细胞继续分化至第7天,油红O染色显示,IRS-1沉默组前脂肪细胞分化成熟的比例与对照组比较显著降低。结论胰岛素可能通过IRS-1刺激C/EBPα、PPARγ的表达促进前脂肪组织的分化。; 郑锐丹廖丽红王成斌高金枝应艳琴宁琴罗小平; 关键词：胰岛素受体底物1 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 3T3-L1前脂肪细胞

生长追赶宫内发育迟缓大鼠早期糖脂代谢及脂肪细胞功能的改变被引量：16: 2012年; 目的探讨生长追赶宫内发育迟缓(IUGR)大鼠早期糖脂代谢及脂肪细胞功能的改变。方法母孕期饥饿法建立IUGR大鼠模型。禁食组仔鼠作为生长追赶IUGR模型组(IUGR组),正常喂养仔鼠作为对照组(AGA组)。12周龄时检测血浆甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白-C(LDL-C)、高密度脂蛋白-C(HDL-C)以及脂联素、促酰化刺激蛋白(ASP)的水平。隔日行糖耐量试验(OGTT),检测血浆葡萄糖和胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指数(IRI)。随后仔鼠断头处死,共聚焦显微镜下观察免疫荧光染色的成熟脂肪细胞中葡萄糖转运体-4(GLUT-4)的表达。结果 12周末时IUGR组大鼠体重、BMI显著高于AGA组(均P<0.01),血TG、TC、LDL-C水平显著高于AGA组,HDL-C水平明显低于AGA组(P<0.05)。OGTT中IUGR组注射葡萄糖后各时间点血糖水平均高于AGA组(P<0.05),IRI值亦显著增高(P<0.05)。与AGA组比较,IUGR组ASP水平明显升高(P<0.05),而脂联素水平显著降低(P<0.05)。IUGR大鼠成熟脂肪组织中GLUT-4在基础状态和不同浓度胰岛素刺激下的表达水平与AGA组相比均明显降低(P<0.05)。结论 IUGR大鼠生后发生明显的生长追赶,12周时即存在高血脂、高血糖及胰岛素抵抗。脂肪细胞分泌功能的异常和脂肪组织GLUT-4表达水平的降低可能参与了生长追赶IUGR大鼠胰岛素抵抗的形成。; 郑锐丹汪无尽应艳琴罗小平; 关键词：宫内发育迟缓胰岛素抵抗脂肪细胞

生长追赶IUGR大鼠脂肪细胞功能障碍与胰岛素抵抗机制研究: 第一部分生长追赶IUGR大鼠脂肪细胞功能研究目的近年来大量资料表明宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation, IUGR)与肥胖、高血压、高脂血症及2型糖尿病密切相关。胰岛素抵抗是这些...; 郑锐丹; 关键词：宫内发育迟缓前脂肪细胞脂蛋白酯酶胰岛素抵抗 PI3K抑制剂; 文献传递

胰岛素受体底物在生长追赶宫内发育迟缓新生大鼠脂肪细胞中的表达被引量：6: 2014年; 目的研究胰岛素受体底物(IRS)-1和IRS-2在生长追赶宫内发育迟缓新生大鼠脂肪细胞中的时序性表达及其与胰岛素抵抗的关联。方法通过母鼠孕期全程饲料限制建立宫内发育迟缓模型,相对增加哺乳期子鼠营养摄入实现生长追赶。于4周龄时心脏采血测定空腹血糖、胰岛素和三酰甘油,计算胰岛素抵抗指数。测定1、3、5、7周龄SD大鼠的成熟脂肪细胞及前脂肪细胞分化的成熟脂肪细胞的IRS-1和IRS-2 m RNA以及蛋白水平的变化。结果生长追赶的宫内发育迟缓新生大鼠原代培养的成熟脂肪细胞IRS-1和IRS-2 m RNA表达分别于生后第5周和第7周显著下调,差异有统计学意义(P<0.05);前脂肪细胞分化的成熟脂肪细胞IRS-1和IRS-2 m RNA表达均于生后第5周显著下调,差异有统计学意义(P<0.05);两种成熟脂肪细胞IRS-1和IRS-2蛋白水平均于生后第1周开始显著下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论生长追赶的宫内发育迟缓新生大鼠脂肪细胞IRS-1和IRS-2的基因表达发生相对下调,可能与其生后远期的胰岛素抵抗密切相关。; 王成斌郑锐丹高金枝廖立红叶娟应艳琴宁琴罗小平; 关键词：胰岛素受体底物宫内发育迟缓胰岛素抵抗

细胞信号转导抑制因子在宫内发育迟缓大鼠骨骼肌细胞中的表达及意义被引量：2: 2011年; 目的研究宫内发育迟缓(IUGR)大鼠骨骼肌细胞中细胞信号转导抑制因子(SOCS)及胰岛素信号通路重要分子胰岛素受体底物-1(IRS-1)的表达变化。探讨其在IUGR大鼠成年后胰岛素抵抗发生中的机制及意义。方法用孕期限制饮食法建立大鼠IUGR模型,原代培养大鼠骨骼肌细胞,采用Real time PCR和Western blot检测0周和12周龄IUGR子鼠骨骼肌细胞中SOCS-1、SOCS-3及IRS-1的mRNA和蛋白表达。采用SPSS17.0软件进行统计学分析。结果与对照组相比,0周和12周龄IUGR组子鼠中骨骼肌细胞中SOCS-1、SOCS-3的mRNA和蛋白表达水平均增加(Pa<0.05),而IRS-1的mRNA和蛋白表达水平均下降(Pa<0.05)。IRS-1mRNA与SOCS-1 mRNA、SOCS-3 mRNA表达水平均呈负相关(r=-0.832、-0.789,Pa<0.01)。结论 IUGR大鼠子代骨骼肌细胞SOCS-1、SOCS-3表达增加,通过负性调节使得IRS-1表达降低,可能是骨骼肌胰岛素抵抗和成年代谢综合征发生的机制之一,提示SOCS-1和SOCS-3可以作为2型糖尿病和其他胰岛素抵抗的治疗靶点。; 廖立红郑锐丹王成斌应艳琴罗小平; 关键词：宫内生长受限胰岛素受体底物-1 胰岛素抵抗

细胞信号转导抑制因子3特异性shRNA的构建及鉴定: 2011年; 目的构建针对大鼠细胞信号转导抑制因子3(SOCS-3)基因的短发夹RNA(shRNA)表达载体,选取最有效shRNA模板序列。方法设计并合成编码的shRNA的2条寡核苷酸序列,经退火成互补双链,再克隆至pGPU6/GFP/Neo中构建重组表达载体,转化DH5α菌株,进行序列测定;转染至骨骼肌细胞中。Real-time PCR和Western blot检测各组SOCS-3的表达情况。结果测序证实重组质粒构建成功。4对shRNA模板序列对SOCS-3的表达抑制与空白及阴性对照相比差异均有统计学意义(均P<0.05),且以SOCS-3-shRNA a干预效果较好。结论 SOCS-3特异性shRNA重组表达载体构建成功,能有效抑制大鼠骨骼肌细胞SOCS-3的表达,为后续研究及代谢综合征的基因治疗奠定了基础。; 廖立红郑锐丹王成斌应艳琴罗小平; 关键词：短发夹RNA RNA干扰

原代大鼠肝细胞分离及培养鉴定被引量：15: 2012年; 目的探讨原代大鼠肝细胞分离及培养的简易方法,并对其纯度及生物活性进行鉴定。方法采用改良原位两步非循环灌流法及多次过滤低速离心法分离原代大鼠肝细胞,常规DMEM高糖培养基培养原代大鼠肝细胞,锥虫蓝拒染法检测接种时肝细胞的存活率,倒置显微镜动态观察肝细胞形态变化。过碘酸-Schiff反应检测肝细胞糖原合成能力,并利用免疫细胞化学方法检测肝细胞角蛋白18(CK-18)的表达联合判断肝细胞纯度。结果每只大鼠可获取(1.38～1.74)×108个肝细胞,接种瞬时肝细胞活性>90%。倒置显微镜下观察肝细胞在接种后4 h基本完成贴壁,贴壁的细胞胞体变大变平,随后细胞相互靠拢呈岛状或条索状连接。糖原染色发现肝细胞内糖原被染成红色颗粒或片状。抗CK-18免疫细胞化学染色发现CK-18在肝细胞内均匀分布,被染成棕黄色。糖原染色及细胞CK-18联合鉴定肝细胞纯度达95%以上。结论用改良原位两步非循环灌注法及多次过滤低速离心法成功分离并培养原代大鼠肝细胞,可操作性强,所培养肝细胞数量、活力和纯度高,可在具备基本细胞培养条件的实验室推广。; 叶娟王群付溪郑锐丹应艳琴罗小平; 关键词：肝细胞原代细胞培养灌注法

全选清除导出

共1页<1>

郑锐丹

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

郑锐丹

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈