蒋学峰
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人乳头状瘤病毒16型多肽疫苗的制备及体内外效应观察被引量：2
- 2009年
- 目的探讨人乳头状瘤病毒（HPV）16型多肽疫苗的制备，并观察HPV16多肽疫苗的体内外效应。方法（1）针对抗原加工相关转运子（TAP）设计HPV16E7蛋白的主要组织相容性复合物I类分子（MHC—I）的抗原结合表位，利用生物信息学分析平台筛选出一致性较高、特异性及亲和力较强的HPV16E7多肽作为研究对象制备HPV16多肽疫苗用于以下研究，本研究共筛选出3段多肽，分别命名为E7Pa、E7Pb、E7Pc。（2）C57BL／6小鼠注射鼠肺上皮细胞株TC-1细胞（为鼠源性的HPV16阳性的肿瘤细胞株）后，采用等额抽取的随机方法分为5组，E7Pa＋二核苷胞嘧啶（CpG）、E7Pb＋CpG、E7Pe＋CpG[均为实验组，分别加入终浓度为50μg／ml的E7Pa、E7Pb、E7Pc和终浓度为12mg／L的刀豆蛋白（ConA）]、CpG（为阳性对照，加入终浓度为12mg／L的ConA）和空白对照组（不做任何处理）。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测各组作用不同时间后小鼠脾T淋巴细胞的体外增殖效应，乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测小鼠脾T淋巴细胞在不同效靶比下的体外细胞毒T淋巴细胞（CTL）活性，实时荧光定量RT—PCR技术检测小鼠肿瘤组织中1干扰素（IFN-γ）、白细胞介素2（IL-2）mRNA的表达水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠外周血中IFN-γ、IL-2的表达水平，通过定期测量比较各组小鼠接种HPV16多肽疫苗后体内肿瘤体积的变化。结果（1）本研究筛选出了一致性较高、特异性及亲和力较强的3段HPV16E7多肽作为研究对象制备HPV16多肽疫苗，分别命名为E7Pa、E7Pb、E7Pe。（2）MTT比色法检测显尔，在接种疫苗24、48、72、96h后，以E7Pa＋CpG组的增殖效应最明显，其细胞增殖率分别为（131±32）％、（302±15）％、（552±28）％、（731±24）％，明显高于空白对照组的（72±15）％、（120±57）％、（176±41）％、（288±29）％（P〈0．01）；E
- 廖书杰胡晓继韩凌斐蒋学峰夏曦王薇卢运萍王世宣马丁
- 人乳头状瘤病毒16型多肽疫苗联合紫杉醇＋顺铂化疗方案治疗子宫颈癌的体内外效应研究被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨人乳头状瘤病毒（HPV）16型多肽疫苗联合紫杉醇＋顺铂（TP）化疗方案治疗宫颈癌的可行性,并观察其体内外效应.方法 （1）针对抗原加工相关转运子（TAP）设计HPV16E7蛋白的主要组织相容性复合物Ⅰ（MHC-Ⅰ）抗原结合表位,利用生物信息学分析平台结合体内外实验研究,筛选出一敛性较高、特异性及亲和力较强的HPV16 E7多肽,命名为E7Pa.（2）C57BL/6小鼠注射鼠肺上皮细胞株TC-1细胞（为鼠源性的HPV16阳性的肿瘤细胞株）后,采用等额抽取的随机方法将样本分为6组,E7Pa＋CpG＋TP、E7Pa＋CpG、CpG＋TP、TP和CpG组均为实验组及空白对照组（予生理盐水注射组）.通过定期测量,绘制肿瘤生长曲线,比较各组小鼠肿瘤体积的变化;酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测小鼠外周血中γ干扰素（INF-γ）、白细胞介素2（IL-2）的表达水平;TUNEL试剂盒检测肿瘤组织的细胞凋亡情况;记录各组动物自接种肿瘤细胞开始至死亡的时间,绘制生存曲线;作小鼠相关脏器病理检查及白细胞计数观察治疗的安全性.结果 肿瘤生长第60天时,E7Pa＋CpG＋TP组肿瘤体积为（0.013±0.010）cm3与空白对照组（1.900±0.075）cm3相比,差异有统计学意义（P＜0.01）;E7Pa＋CpG组体积为（0.340±0.038）cm3、TP＋CpG组体积为（0.650±0.029）cm3、TP组体积为（1. 100±0.052）cm3,CpG组体积为（0.890±0.047）cm3,分别与空白对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）;小鼠的平均生存时间E7Pa＋CpG＋TP组（108.50±8.97）d,E7Pa＋CpG组（100.02±2.27）d,CpG＋TP组（79.63±4.05）d,TP组（73.24±3.11）d,CpG组（68.63±1.38）d,对照组（52.37±2.47）d,E7Pa＋CpG＋TP组及E7Pa＋CpG组平均生存期与对照组比较生存期明显延长,差异有统计学意义（P＜0.01）;同时,免疫治疗组可有效的激发自身免疫系统活化对抗肿瘤细胞的恶性增生,而化疗组可以显著杀伤恶性细胞,诱导凋亡.
- 廖书杰胡晓继蒋学峰韩凌斐夏曦王薇王常玉卢运萍王世宣马丁
- 关键词：疫苗化疗
- Snail在卵巢癌细胞侵袭转移潜能方面研究被引量：2
- 2013年
- 目的研究Snail与卵巢癌侵袭转移问的关系，并探讨其分子机制。方法分别构建正义全长Snail真核表达载体和小分子干扰RNA，分别转染卵巢癌细胞系A2780、C13＊。采用Western印迹方法分析相关蛋白表达，Transwell试验检测细胞侵袭转移能力。结果①成功构建Snail正义全长真核表达载体，并合成Snail小分子RNA干扰片段；②在转染PEGFPCI／Snail的卵巢癌细胞株A2780、C13＊中E-eadhefin表达明显下调，Snail和Vimentin则表达上调；而在转染Snail／SiRNA的卵巢癌细胞株A2780、C13‘中E—cadherin表达明显上调，Snail和Vimentin则表达下调；③Snail过表达可显著促进卵巢癌细胞株A2780、C13＊的侵袭转移潜能；封闭Snail表达水平可一定水平抑制卵巢癌细胞株A2780、C13＊的侵袭转移潜能。结论snail可通过促进卵巢癌上皮细胞间质化转变（epithelial—mesenchymaltransition，EMT）而提高其侵袭转移能力；封闭Snail表达可一定程度逆转卵巢癌上皮细胞间质化转变（EMT）而抑制其侵袭转移能力。
- 夏曦蒋学峰纪腾徐洪斌
- 关键词：转录因子SNAIL卵巢癌侵袭转移VIMENTIN
