郝会海
- 作品数：7 被引量：22H指数：3
- 供职机构：河北农业大学更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金博士科研启动基金河北省林业局资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 利用简化的SDS法提取杨树基因组DNA被引量：13
- 2006年
- 以杨树组培苗幼嫩叶片为材料,在室温下采用简化的SDS法快速制备其基因组DNA,并对制备DNA过程中的影响因子进行了初步研究。结果表明,采用此方法制备的基因组DNA在数量和纯度上可以满足聚合酶链式反应(PCR)的要求。另外,DNA提取缓冲液中添加一定浓度的PVP、β-巯基乙醇,有利于DNA提取。
- 郝会海李燕玲杜志军杜克久
- 关键词：基因组DNADNA制备
- 新型Bt杀虫蛋白基因的克隆、表达及利用
- 王勤英檀建新陆秀君张伟宋萍苏旭东毛文杰吴会贤王永郝会海马晓燕耿硕袁淑杰袁耀武马雯
- 该项科技成果包括河北省自然科学基金（303213）、河北省科技厅博士资金（05547005D-5）和河北农业大学博士基金资助，起止年限为2003～2006年。该成果属于生物防治应用基础领域。该研究深入挖掘我国自然界的杀虫...
- 关键词：
- 关键词：工程菌基因克隆苏云金芽孢杆菌
- 苏云金杆菌营养期杀虫蛋白Vip3A-LS1对2种林业害虫活性的研究
- 2008年
- 以实验室克隆的苏云金芽孢杆菌Vip3A-LS1基因为材料,利用原核表达载体pET-21b,构建重组载体表达蛋白,并测定了表达蛋白对美国白蛾和杨扇舟蛾幼虫的活性。结果表明:表达重组质粒pEV113经IPTG诱导得到了约88kD的Vip3A-LS1蛋白;该蛋白对美国白蛾和杨扇舟蛾均有一定的杀虫活性,80μg蛋白对初孵美国白蛾平均校正死亡率达到(53.02±0.43)%,体质量抑制率达到了80.60%,对杨扇舟蛾初孵幼虫平均校正死亡率达到(68.00±0.60)%,抑制作用均达到80%以上。
- 刘琳琳陆秀君靳爱荣郝会海杜克久
- 关键词：活性测定美国白蛾杨扇舟蛾
- 苏云金杆菌营养期杀虫蛋白基因的克隆与表达研究
- 苏云金杆菌(Bacillusthuringiensis，Bt)营养期杀虫蛋白(VegetativeInsecticidalProteins，VIPs)对鳞翅目昆虫具有广谱的杀虫活性，且与Bt杀虫晶体蛋白(insectic...
- 郝会海
- 关键词：苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白基因克隆原核表达
- 文献传递
- 苏云金杆菌营养期杀虫蛋白基因vip3A的检测与杀虫活性测定被引量：5
- 2006年
- 为获取高活性的野生Bt菌株,对从土壤中分离的99株Bt菌株进行了营养期杀虫蛋白的分子鉴定和生物活性测定。根据已知的vip3 A基因序列设计1对特异性引物,进行PCR鉴定,55株扩增得到1.2 kb的目的片段。对31株阳性菌株的营养期杀虫蛋白活性进行了初步测定,结果显示,Bt LS1和LS8菌株毒力最高,2菌株对2龄甜菜夜蛾的体重抑制率分别为91.14%和93.59%。选取Bt LS1和LS8菌株进行胞内外营养期蛋白杀虫活性测定,发现Bt LS1和LS8菌株对初孵甜菜夜蛾体重抑制率分别为45.1%和43.2%,对初孵棉铃虫的校正死亡率分别为(22.1±1.4)%和(55.3±3.7)%,对2龄棉铃虫的体重抑制率分别为(78.7±6.6)%和(50.4±2.4)%。
- 郝会海朱美秋宋萍陆秀君杜克久
- 关键词：苏云金杆菌棉铃虫甜菜夜蛾
- 苏云金杆菌营养期蛋白杀虫活性及Vip3A-LS1基因克隆被引量：2
- 2007年
- 对营养期高活性杀虫菌株进行筛选,得到高效菌株BtLS1,对其营养期杀虫蛋白活性及发酵特性进行了系统研究,克隆了该菌株的vip3A新基因。测定了31株vip3A基因阳性菌株营养期杀虫蛋白的活性,发现BtLS1和BtLS8菌株对甜菜夜蛾Spodopteraexigua生长的抑制作用明显高于其他菌株。进一步研究表明,BtLS1菌株营养期杀虫蛋白对初孵和2龄甜菜夜蛾幼虫的体重增长抑制率分别为95.3%±2.1%和90.7%±6.6%;对棉铃虫Helicoverpaarmigera初孵幼虫的校正死亡率为22.1%,对2龄幼虫的体重增长抑制率为78.7%±6.6%。发酵液中以胞内可溶性物质为主。设计vip3A全长基因特异引物PCR扩增,插入质粒pBluescriptSK(+),克隆测序证实该菌株中存在vip3A新基因,命名为Vip3A-LS1,GenBank登录号为DQ016968。按该序列推断的蛋白与同类蛋白的8个氨基酸之间存在差异。
- 陆秀君郝会海宋萍杜克久李国勋
- 关键词：苏云金杆菌营养期杀虫蛋白活性
