黄美娟
- 作品数：31 被引量：498H指数：12
- 供职机构：北京大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家转基因植物研究与产业化专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 利用改进的cDNA RDA技术分离胡萝卜(Daucus carota L.)体细胞胚根发育相关的基因被引量：10
- 2000年
- 根据链霉亲和素与生物素之间的结合作用及磁性吸附分离的原理 ,发展出改进的cDNA代表性差式分析 (representationaldifferenceanalysis ,RDA)技术 ,并用来检测在调控和解调控培养 1 2h的胡萝卜体细胞胚中特异表达的基因 .结果显示 ,在解调控 1 2h的胡萝卜体细胞胚中 ,存在 4条特异表达的cDNA片段 ,命名为NR_1 ,NR_2 ,NR_3和NR_4.将这些片段分别克隆在pBS噬菌粒载体中 .DNA序列同源性比较表明 ,片段NR_3和NR_4分别与植物的DnaJ和木质葡聚糖内转糖基化酶 (xyloglucanendo_transglycosylase)的编码基因有很高的同源性 ,而片段NR_2中有一段序列与LEA蛋白 (lateembryogenesisabundantproteins)基因有一定的同源性 .NR_1则可能来自新基因 .用3 2 P标记NR_1作探针 ,与cDNA片段群体进行杂交证实 ,从解调控 1 2h的胡萝卜体细胞胚中克隆到一种与胚根发育相关的新基因序列 .Southern杂交表明 。
- 刁丰秋张雷黄美娟吴乃虎
- 关键词：胡萝卜CDNARDA体细胞胚
- cDNA文库的差异筛选与抑制性减数杂交相结合分离胡萝卜体细胞胚根发育相关基因被引量：24
- 2002年
- 应用cDNA文库差异筛选与抑制性减数杂交相结合的技术程序,并通过反向Northern分析进一步验证,成功地从解调控12 h的胡萝卜体细胞胚的cDNA文库中,分离到7个在解调控12h特异表达的基因.其中4个含有完整的编码框,分别编码木质葡聚糖内转糖基化酶、脂肪酸去饱和酶、一种poly(A)结合蛋白和一种酰基转移酶.另外3个是5＇端部分缺失的cDNA基因片段,分别编码三磷酸甘油醛脱氢酶、一种糖蛋白和一种与单链RNA/DNA结合的蛋白.对其中部分基因的Northern分析结果显示,它们的表达量在蔗糖调控下的胡萝卜体细胞胚根发育的不同时期均有显著变化,说明它们都是与胚根发育相关的基因.
- 张雷杨志攀刘一鸣黄美娟吴乃虎
- 关键词：CDNA文库基因克隆基因分离基因表达
- 胡萝卜体细胞胚在人工种子制作中的分级分选被引量：3
- 1990年
- 用植物胚性细胞团分选仪进行了从胡萝卜非均匀性的悬浮培养物中分级分选体细胞胚。对该仪器分选体细胞胚的操作程序及参数进行了确定,对分离的三个等级的体细胞胚的数量、大小和形态进行了测定。该仪器分选胡萝卜成熟的体细胞胚的速度为每小时从100ml 悬浮培养物中分选出872个胚。按大小次序分级分离的三个等级的体细胞胚所制作的人工种子,在无菌培养基上的萌发率分别为87.3%、75.3%和55.5%。本研究的结果表明植物胚性细胞团分选仪用来分级分选胡萝卜体细胞胚的效果是良好的,成熟胚(第一、二级)制作的人工种子比未成熟胚(第三级)制作的人工种子萌发率有显著的提高。
- 朱激黄美娟牛小牧李修庆傅晓棣
- 关键词：胡萝卜体细胞胚人工种子
- 酵母单杂交系统分离胡萝卜生长素应答元件结合因子被引量：2
- 2002年
- 高等植物胚根发育过程中,生长素是植物细胞进行分裂、延伸和分化的信号,对根的形成等起着不可缺少的促进作用.生长素应答元件（AuxRE）存在于很多生长素诱导基因的启动子中,并具有对生长素作用的应答活性.本研究构建了特定发育时期的胡萝卜体细胞胚cDNA-AD融合表达文库,同时构建了含有生长素应答元件的重组报告质粒.以生长素应答元件为诱饵,通过酵母单杂交系统筛选获得1个阳性克隆,该阳性克隆在酵母中表达的AxRF1蛋白能够在体外结合实验中与生长素应答元件结合,对AxRF1是否有可能参与胡萝卜体细胞胚中生长素诱导基因的表达调控进行了讨论.
- 齐眉陈凡陈凡黄美娟
- 关键词：酵母单杂交系统胡萝卜转录调控
- 蔗糖调控培养对胡萝卜体细胞胚内源ABA水平的效应被引量：41
- 1999年
- 利用酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）技术，分析了经不同浓度蔗糖调控的胡萝卜（ＤａｕｃａｓｃａｒｏｔａＬ．）体细胞胚及胚性器官的内源ＡＢＡ水平。结果表明，随着胚的生长发育，内源ＡＢＡ含量呈上升趋势，到子叶胚时，达到最高值。在胚的早期发育阶段，不同处理之间，ＡＢＡ水平只有较小的差异，而当子叶胚开始膨大时，这种差异则较明显。一旦将调控胚解调控，体细胞胚内源ＡＢＡ含量则明显下降。在两个月内，调控胚及胚性器官的ＡＢＡ含量基本维持不变。表明蔗糖浓度可导致体胚内源ＡＢＡ水平的变化，但这种影响依发育时期而异；高浓度的ＡＢＡ水平有利于胚性状态的维持。与此同时，比较研究了外源ＡＢＡ处理效应与高浓度蔗糖处理的差异，结果表明，蔗糖的调控效应与ＡＢＡ的调控相似又不尽相同。总之，在蔗糖调控胡萝卜体细胞胚发育的信号传递网络中ＡＢＡ可能是一个重要的中介信号因子。
- 程玉兰刁丰秋吴乃虎黄美娟
- 关键词：胡萝卜体细胞胚
- 不同发育状态下胡萝卜胚根基因的差异表达被引量：15
- 1996年
- 研究表明,在真核生物中除少数看家基因外,大多数基因的表达不仅具有严格的时空特异性,而且在不同的发育阶段之间还存在着明显的异质性,在生物体的某一特定的发育阶段,细胞的RNA除了rRNA和tRNA之外,便是在这一特定时期表达的所有基因转录本的集合体。由此可见,处在不同发育阶段的mRNA,不论在数量上还是在种类上都存在着明显的差别。应用mRNA差别显示技术(mRNA differential display)可以从含有大约15000种mRNA的群体中,迅速地鉴别并克隆出差别表达的特定基因。
- 陈春霞柳浩吴乃虎黄美娟
- 关键词：胡萝卜分化基因表达
- 扁蓿豆体细胞胚的诱导和植株再生被引量：5
- 1994年
- 扁蓿豆实生苗的根、下胚轴、子叶、叶片和叶柄外植体，在含２，４—Ｄ２—０．２５ｍｇＬ－１与ＫＴ０．２５－２ｍｇＬ－１及２，４—Ｄ０．５ｍｇＬ－１与ＺＴ０．５ｍｇＬ－１或ＢＡＰ０．５ｍｇＬ－１与ＮＡＡ０．０５ｍｇＬ－１的ＭＳ琼脂培养基上均可产生愈伤组织．愈伤组织在含２，４—Ｄ０．５—０．１ｍｇＬ－１与ＫＴ０．５—０．１ｍｇＬ－１或ＢＡＰ０．２５＋ＮＡＡ０．０５ｍｇＬ－１的ＭＳ培养基上可诱导分化出体细胞胚．体细胞胚在无激素的培养基上发育成完整植株．用海藻酸钠包襄体细胞胚制成人工种子，其发芽率和植株转换率分别为９５％和５３％．
- 黄美娟黄绍兴朱澂
- 关键词：体细胞胚植株再生豆科
- 转番茄蛋白酶抑制剂Ⅱ基因烟草植株的培育及其抗虫特性分析被引量：9
- 2002年
- 将分离的番茄蛋白酶抑制剂Ⅱ基因cDNA序列tin2和含有一个109 bp内含子的基因组DNA序列tin2i,分别构建成植物表达载体pBCT2和pBT2.然后通过农杆菌介导转化烟草叶片外植体,获得了两类转基因烟草植株.分子生物学检测和胰蛋白酶抑制剂活性分析结果表明,tin2序列和tin2i序列都能够在转基因烟草中正确表达.抗虫活性检测结果显示,转tin2i序列的烟草植株的抗虫活性高于转tin2序列的烟草植株,推测这可能与tin2i序列中内含子的存在有关.
- 谢先芝黄美娟吴乃虎
- 关键词：番茄转基因烟草植株培育
- 转水稻osRACD反义基因拟南芥植株的育性分析被引量：16
- 2003年
- 利用反义RNA技术,将水稻低分子量GTP结合蛋白基因osRACD反向置于CaMV35S启动子的调控下,构成反义基因表达载体pBID,并用真空渗透法转化拟南芥植株,转基因植株的荚果自花谢之后就停止生长,其后荚果便自顶端开始逐渐枯黄并死亡;而对照植株的荚果在花谢之后仍继续生长直到成熟。花粉离体萌发生长实验显示,转基因植株花粉萌发后的生长延伸过程受到抑制,形成短而略粗的花粉管;而对照植株花粉萌发后的生长状况正常,形成长圆柱形的花粉管。这些结果表明,osRACD基因的功能是参与控制花粉管的生长延伸过程,其编码的蛋白质可能是调控光敏核不育水稻58S育性的重要因子之一。
- 叶建荣黄美娟吴乃虎
- 关键词：水稻转基因拟南芥反义RNA技术花粉萌发光敏核不育
- 用调控方法培养体细胞胚获得人工种子贮藏的方法
- 采用我们发明的调控培养方法，使悬浮培养中的体细胞胚生长发育延缓，获得呼吸较低，胚根生长受抑制的静止状态的体细胞胚。其特点是胚的细胞排列致密硬度增大；贮存物质积累增多，抗逆性强；脱水至含水量为50％左右，贮存4个月植株转换...
- 黄美娟黄绍兴朱澄苏都莫日根
- 文献传递
