杨志攀
- 作品数：5 被引量：39H指数：4
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家转基因植物研究与产业化专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 胡萝卜体细胞胚DnaJ同源基因的分离及其表达特性分析被引量：5
- 2003年
- DuaJ/Hsp40蛋白是DnaK/Hsp70的辅助分子伴侣,它通过调节DnaK/Hsp70的ATPase活性来影响蛋白复合体的合成与组装。运用改进的cDNA代表性差示分析方法从解调控胡萝卜体细胞胚中分离出Dnal基因同源区段,进而以它为探针筛选解调控12h的胡萝卜体细胞胚cDNA文库,从胡萝卜中分离得到DuaJ蛋白同源基因DcJ1.序列分析表明它的编码区为1257bp,编码418个氨基酸和1个终止密码子,包含3个保守的特征结构域。Southern杂交分析表明,DcJ1基因在核基因组中以单拷贝或低拷贝形式存在;而Northern杂交则显示该基因仅在根中特异表达,其表达强度随着胡萝卜体细胞胚的调控-解调控过程发生明显的变化,并且不受热激的诱导。由此可见,DcJ1基因的表达活性与胡萝卜体细胞胚根的早期发育之间存在着明显的相关性。
- 杨志攀张雷刁丰秋黄美娟吴乃虎
- 关键词：胡萝卜体细胞胚基因分离热激蛋白
- 胡萝卜DcPAB基因的分离及其结构与功能分析被引量：5
- 2004年
- 运用改进的减法杂交技术分离到胡萝卜Poly(A)结合蛋白基因DcPAB .其cDNA编码区长度为 1 977bp ,编码 6 5 8个氨基酸和 1个终止密码子 .基因组转录序列区长度为 4 6 1 6bp ,包含 9个外显子和 8个内含子 .DcPAB在胡萝卜基因组中为单拷贝基因 .该基因在胡萝卜体细胞胚中特异性表达 ,且其表达活性在调控 解调控前后有明显差异 .体外结合实验表明 ,在大肠杆菌中表达并纯化的DcPAB蛋白具有与oligo(A) 2 0 特异性结合的性能 .酵母突变体互补实验进一步证明 。
- 林慧馨张雷杨志攀黄美娟吴乃虎
- cDNA文库的差异筛选与抑制性减数杂交相结合分离胡萝卜体细胞胚根发育相关基因被引量：24
- 2002年
- 应用cDNA文库差异筛选与抑制性减数杂交相结合的技术程序,并通过反向Northern分析进一步验证,成功地从解调控12 h的胡萝卜体细胞胚的cDNA文库中,分离到7个在解调控12h特异表达的基因.其中4个含有完整的编码框,分别编码木质葡聚糖内转糖基化酶、脂肪酸去饱和酶、一种poly(A)结合蛋白和一种酰基转移酶.另外3个是5＇端部分缺失的cDNA基因片段,分别编码三磷酸甘油醛脱氢酶、一种糖蛋白和一种与单链RNA/DNA结合的蛋白.对其中部分基因的Northern分析结果显示,它们的表达量在蔗糖调控下的胡萝卜体细胞胚根发育的不同时期均有显著变化,说明它们都是与胚根发育相关的基因.
- 张雷杨志攀刘一鸣黄美娟吴乃虎
- 关键词：CDNA文库基因克隆基因分离基因表达
- 一种胡萝卜蔗糖转运蛋白基因家族新成员的分离及功能鉴定被引量：9
- 2001年
- 培养基中蔗糖浓度的变化可以调控胡萝卜体细胞胚根的发育进程．为了分析在此过程中蔗糖的转运与体细胞胚根发育的相关性，利用ＲＴ－ＰＣＲ获得胡萝卜蔗糖转运蛋白基因的探针，筛选蔗糖调控状态下的胡萝卜体细胞胚的ＣＤＮＡ文库，分离到蔗糖转运蛋白基因家族的一个新成员的全长ｃＤＮＡ，命名为ｃＳＵＴ基因（ＧｅｎＢａｎｋ注册号为ＡＢ０３６７５８）．对该基因的编码蛋白进行结构分析表明，其具有典型的１２个跨膜结构域．在酵母中的表达分析证明，ｃＳＵＴ基因的编码蛋白有转运蔗糖的功能，转运活性受ｐＨ值影响较大，Ｋｍ为９ ｍｍｏｌ／Ｌ，且对蔗糖的运输具有专一性．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果显示其主要在根部表达，且在蔗糖调控与解调控的胡萝卜体细胞胚发育的不同时相存在显著表达差异，推测ｃＳＵＴ基因与蔗糖的信号转导以及胚根的发育密切相关．
- 张雷刁丰秋杨志攀黄美娟吴乃虎
- 关键词：胡萝卜蔗糖转运蛋白CDNA文库基因分离基因鉴定
- 蔗糖调控胡萝卜体细胞胚根发育的分子机理
- 杨志攀
- 关键词：蔗糖体细胞胡萝卜
