唐石伏
- 作品数：7 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中山大学公共卫生学院预防医学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PP2A调控组蛋白H2AX介导的DNA损伤修复
- 目的蛋白磷酸酶2A(PP2A)是人机体内主要的蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸酶,全酶由催化亚基,结构亚基和各种调节亚基组成异三聚体。本研究拟探讨PP2A参与DNA损伤修复中调控组蛋白H2AX去磷酸化的作用及其机制。方法用逆转录病...
- 赖延东陈雯陈丽萍唐石伏林育纯李道传肖勇梅王庆张波魏青
- 关键词：DNA损伤H2AX蛋白磷酸酶2A
- 细胞转化模型在化学致癌物筛查中的应用研究
- 随着科学技术的发展，越来越多的化学致癌物进入人类的生活和生产领域，其中很多具有潜在致癌性。目前的人类化学致癌物检测手段由于自身局限性，远不能满足人类可疑化学致癌物检测日益增长的需要，这促使人们寻找快速有效的检测方法。 ...
- 唐石伏
- 关键词：遗传毒性细胞恶性转化基因突变
- 文献传递
- 化学致癌物诱导人胚肾上皮细胞转化模型的构建被引量：2
- 2010年
- 目的探讨DNA修复缺陷和癌基因高表达人胚肾上皮细胞转化模型在化学致癌物筛查中的应用价值。方法利用siRNA技术构建DNA损伤修复基因缺陷人胚肾上皮细胞(human embryonic kidney epithelial cell,HEK),采用微核实验检测DNA修复基因缺陷和H-rasV12癌基因高表达对DNA损伤修复功能的影响,并测定已知致癌物[硫酸镍(NiSO4)、N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)]和促癌剂佛波酯(TPA)诱导上述细胞的转化活性,比较两种类型的HEK细胞模型筛查化学致癌物的应用价值。结果应用慢病毒介导的siRNA干扰技术成功构建了HEK-shERCC1、HEK-shERCC2、HEK-shATM和HEK-shMLH1等DNA损伤修复基因缺陷细胞株。与对照细胞HEK-shGFP相比,各DNA修复缺陷HEK细胞的生长速度、细胞形态和琼脂糖克隆的克隆形成率均没有差异,但HEK-sh ERCC2和HEK-shATM细胞对MMC(mitomycin C,MMC)所致遗传损伤的修复能力显著降低,1.0μg/ml MMC处理后,HEK-shERCC2和HEK-shATM细胞的微核率比对照细胞HEK-shGFP分别增加了34‰和30‰(P<0.05)。2μmol/L MNNG、400μmol/L NiSO4和800ng/ml TPA诱导HEKR细胞转化的时间分别是8周、8周和11周,但在染毒后20周均未能诱导各DNA损伤修复缺陷HEK细胞发生转化。结论癌基因高表达转化模型用于化学物质致癌活性的筛查,其灵敏性高于DNA修复基因缺陷细胞转化模型。
- 唐石伏王庆庞雅琴赖延东肖勇梅张波李道传陈丽萍杨萍陈雯
- 关键词：DNA损伤修复基因硫酸镍佛波酯细胞转化
- 化学致癌物诱导人胚肾上皮细胞转化模型的构建
- 目的探讨DNA修复缺陷和癌基因高表达人胚肾上皮细胞转化模型在化学致癌物筛查中的应用价值。方法利用siRNA技术构建DNA损伤修复基因缺陷人胚肾上皮细胞（human embryonic kidney epithelialc...
- 李道传唐石伏王庆陈丽萍杨萍魏青陈雯
- 关键词：DNA损伤修复基因佛波酯
- 文献传递
- 癌基因高表达人上皮细胞转化模型的构建及应用被引量：5
- 2008年
- 目的构建癌基因高表达人支气管上皮细胞模型并应用于致癌物诱导细胞恶性转化活性的检测。方法在永生化人支气管上皮细胞株16HBE中依次导入人端粒酶催化亚基（hTERT）、癌基因H—Ras^V12。或c—Myc或空白载体，构建细胞株16HBETR、16HBETM和16HBETV。检测所构建细胞株的生物学特性如细胞形态、细胞生长、染色体畸变等指标。用已知致癌物硫酸镍（NiSO4）和二氢二醇环氧苯并（a）芘（BPDE）多次染毒，利用软琼脂试验及荷瘤试验检测化学物诱导细胞转化的活性。结果经过端粒酶活性测定以及蛋白印迹验证上述转基因16HBE细胞株均构建成功。癌基因H—Ras和c—Myc的表达分别使细胞的增殖加速30．3％和10．4％，但是细胞染色体的畸变率没有发生改变。癌基因高表达细胞株只在软琼脂中形成少数背景克隆，但不能在裸鼠皮下形成肿瘤。BPDE诱导16HBETR、16HBETM细胞发生恶性转化的间期分别为5周、11周，比对照组细胞16HBETV的加周分别提前了15周和9周；而硫酸镍诱导16HBETR、16HBETM细胞转化的间期分别为11周、14周，比对照组细胞的32周分别提前了21周和18周。结论癌基因高表达的细胞转化模型可大大缩短试验间期，有望应用于环境致癌物的筛查及化学致癌机制的研究。
- 马儒林庞雅琴李文学肖勇梅魏青李道传赖延东林育纯王庆杨萍陈丽萍唐石伏林忠宁陈雯
- 关键词：上皮细胞
- microRNA在细胞转化中的表达差异
- 目的microRNA(miRNA)属于RNA干扰的一种特殊形式,主要功能是在转录后水平调控基因表达。研究发现miRNA的异常表达与疾病如肿瘤的发生发展密切相关。为了筛差与细胞转化表型链接的特异microRNA分子,本研究...
- 李道传王庆杨萍唐石伏李志芳肖勇梅魏青张波陈雯
- 关键词：细胞转化MICRORNAMIRNA
- 文献传递
- 不同代谢活化系统增强苯并(a)芘诱导人支气管上皮细胞转化效应被引量：1
- 2009年
- 目的探讨不同的代谢活化系统在苯并(a)芘[B(a)P]诱导人细胞转化模型中的应用。方法选择人支气管上皮细胞HBETR,采用3种不同的代谢活化方式:分别为加入大鼠S9组分(S9-Mix)、高表达代谢关键酶P450CYP1A1(HBETR-1A1细胞)和染毒前48小时用低剂量B(a)P诱导(HBETR-IN细胞)。通过软琼脂克隆形成试验和裸鼠皮下成瘤试验来比较在不同的代谢活化系统下,间接致癌物B(a)P诱导细胞转化的效能。结果通过蛋白印迹和酶活性检测结果验证HBETR-1A1细胞构建成功。细胞的生物学特性没有明显的改变。20μmol/LB(a)P染毒作用下HBETR-1A1、HBETR-IN细胞出现转化时间均为11周,而未加入活化系统时,HBETR细胞需14周才能获得恶性转化。HBETR细胞在加入和不加入S9-Mix的条件下,转化时间分别是14周、20周。上述转化的效果与CYP1A1酶活性以及蛋白表达水平相一致。结论三种代谢系统都能够促进间接致癌物B(a)P的代谢活化,缩短细胞的转化间期,提高细胞转化效率。从试验操作难度、试验的重复性及结果的可靠性等几个方面比较三种代谢系统应用的可行性,低剂量诱导作为新的代谢活化的方法在细胞转化试验中有着潜在的应用前景。
- 庞雅琴赖延东肖勇梅李文学马儒林王庆魏青林育纯李道传唐石伏陈丽萍杨萍李志芳吴大伟林忠宁陈雯
- 关键词：苯并(A)芘细胞转化代谢活化
