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哮喘合并呼吸道肺炎链球菌感染与定植小鼠模型的建立和评价: 2016年; 目的国内外对哮喘合并细菌感染和定植的动物模型研究鲜见报道,文中拟建立肺炎链球菌气道感染和定植的哮喘动物模型并进行评价。方法 30只健康雌性BALB/c小鼠随机数字表法分为3组：正常注菌组,哮喘未注菌组,哮喘注菌组,每组10只;用卵清蛋白致敏和激发BALB/c小鼠制作哮喘模型,气管内注入琼脂包被的肺炎链球菌,观察动物行为学变化,分别在气道注菌之后的第7、21天处理小鼠,取肺组织进行病理观察,检测气管细菌、测定肺泡灌洗液（BALF）的细胞计数及炎性细胞因子的变化等。结果与正常注菌组和哮喘未注菌组相比,哮喘注菌组有明显的哮喘症状和感染症状;病理学结果显示气道黏膜水肿,管壁增厚,管腔黏液分泌,且有大量的炎症细胞浸润;哮喘注菌组小鼠注菌后肺泡灌洗液中第7天白细胞总数、中性粒细胞数、TNF-α,血清中的TNF-α表达[（313.67±6.43）×10^4/mL、（58.61±2.52）×104/mL、（340.60±6.50）pg/mL,（45.12±5.80）pg/mL]高于正常注菌组[（200.67±9.50）×104/mL、（20.67±2.08）×10^4/mL、（220.60±20.10）pg/mL,（35.10±4.23）pg/mL]和哮喘未注菌组[（120.67±2.08）×10^4/mL、（9.33±1.53）×104/mL、（130.40±5.00）pg/mL,（25.40±3.60）pg/mL],差异均有统计学意义（P〈0.01）;注菌后第21天白细胞总数、中性粒细胞数、TNF-α,血清中的TNF-α[（151.67±4.43）×104/mL、（28.11±1.23）×10^4/mL、（183.34±4.43）pg/mL,（35.56±1.26）pg/mL]高于正常注菌组[（100.67±9.50）×10^4/mL、（10.67±1.08）×104/mL、（50.67±9.50）pg/mL,（8.43±0.23）pg/mL]和哮喘未注菌组[（119.83±1.18）×10^4/mL、（9.13±1.13）×10^4/mL、（146.89±1.18）pg/mL,（28.10±2.04）pg/mL],差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论用卵清蛋白制备哮喘动物模型并从气道注入肺炎链球菌琼脂液可以建立哮喘合并呼吸道肺炎链球菌感染和定植的动物模型,并引起肺部慢性感染�; 徐欣欣杨玲康建强董杨阳宋珍周妍; 关键词：哮喘肺炎链球菌疾病模型动物

硝化花粉对哮喘小鼠气道反应及炎性细胞因子水平的影响被引量：3: 2014年; 目的观察硝化花粉对哮喘小鼠气道反应及炎性细胞因子水平的作用。方法按免疫物及激发物的不同将60只小鼠分为5组,建立哮喘模型,采用体积描记法检测气道反应性、检查支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞学、CBA法测定血清和BALF中IL-17A、IL-10和TNF-α的含量。结果用硝化花粉免疫和激发哮喘组的气道反应性、BALF中EOS及NEU的数量、血清和BALF中IL-17A、IL-10和TNF-α的含量与其他哮喘模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论硝化花粉诱发的哮喘气道高反应更显著,释放更多炎性介质,造成更加严重的气道炎症。; 杨玲田烨周妍康建强; 关键词：尾气污染花粉气道反应性炎性介质

变态反应性哮喘产妇新生儿脐血中的氧化应激状态被引量：2: 2013年; 目的检测变态反应性哮喘产妇新生儿脐血的氧化应激状态,及与嗜碱性粒细胞释放介质能力的关系。方法选择2008年3月至2009年6月在上海交通大学医学院附属新华医院住院分娩的16例妊娠前有变态反应性哮喘史产妇(哮喘产妇组)和同期住院分娩的正常产妇18例(正常产妇组)的新生儿脐血中提纯嗜碱性粒细胞,采用粉尘螨及甘露醇刺激,测定嗜碱性粒细胞CD63及白细胞介素(IL)-4的表达。采用ELISA法检测血清中3-硝基酪氨酸(3-NT)的含量,并进行相关性分析(本研究遵循的程序符合上海交通大学医学院附属新华医院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试对象本人的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书)。两组孕妇的年龄、分娩方式、分娩孕龄及新生儿脐血采集方式等比较,差异无统计学意义(P>0.05)结果粉尘螨及甘露醇刺激哮喘产妇组新生儿脐血嗜碱性粒细胞CD63的表达高于正常产妇组(215.59±47.15 vs.11.33±3.26,233.65±51.25,12.98±3.11),2组比较,差异有统计学意义(t=7.61,8.97;P<0.01);所释放的IL-4亦高于正常产妇组[(3.27±0.40)pg/mL vs.(1.78±0.48)pg/mL;(3.56±0.47)pg/mL vs.(1.92±0.52)pg/mL],2组比较,差异有统计学意义(t=2.53,3.61;P<0.01)。哮喘产妇组的产妇外周静脉血及新生儿脐血中3-NT的含量均高于正常产妇组[(443.86±95.20)μg/mL vs.(288.17±57.23)μg/mL;(474.69±92.55)μg/mL vs.(273.7±68.09)μg/mL],2组比较,差异有统计学意义(t=2.68,2.79;P<0.01)。IL-4水平与新生儿脐血中3-NT的含量相关(r=0.607,P<0.05;r=0.619,P<0.05)。结论哮喘中,特异性的免疫反应和非特异性的刺激均与氧化应激有关,这可能是变态反应性疾病的发病机制之一。; 杨玲李强康建强周妍熊瑛祝捷; 关键词：变态反应性哮喘氧化应激嗜碱性粒细胞脐血白细胞介素

1,25-二羟维生素D_3对于哮喘大鼠及其肺泡巨噬细胞中VDUP1/TRX的影响被引量：1: 2012年; 目的探讨1,25-二羟维生素D3(1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25(OH)2D3)对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fuluid,BALF)中维生素D上调蛋白1(vitamin D up-regulated protein 1,VDUP1)和硫氧还蛋白(thioredoxin,TRX)表达及气道炎症的影响。方法将28只Wistar大鼠随机分为4组,以卵白蛋白(ovalbumin,OVA)诱导哮喘发作,并给予1,25(OH)2D3和地塞米松干预,同时设对照组。测定BALF中IL-4和IL-10水平,细胞总数和肺组织病理变化。同时提取7只哮喘模型大鼠BALF中的巨噬细胞,体外给予1,25(OH)2D3干预。用逆转录-聚合酶链反应检测肺组织及BALF中巨噬细胞表达VDUP1和TRX的水平。结果 1,25(OH)2D3治疗组BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞计数和IL-4水平降低,IL-10水平增高。肺组织及肺泡巨噬细胞中VDUP1和TRX表达增加。结论给予哮喘大鼠1,25(OH)2D3可抑制气道炎症,增加TRX和VDUP1的表达,两者可作为哮喘氧化应激的监测指标。; 周妍周新康建强王瑞良顾问王春燕; 关键词：哮喘硫氧还蛋白

1，25-二羟维生素D3对于哮喘大鼠及其肺泡巨噬细胞中VDUP1／TRX的影响被引量：1: 2012年; 目的探讨1，25二羟维生素D3（1，25-dihydroxyvitaminD3，1，25（0H）2D3）对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolarlavagefuluid，BALF）中维生素D上调蛋白1（vitamin Dupregulatedproteinl，VDUPl）和硫氧还蛋白（thioredoxin，TRX）表达及气道炎症的影响。方法将28只Wistar大鼠随机分为4组，以卵白蛋白（ovalbumin，OVA）诱导哮喘发作，并给予1，25（OH）：D3和地塞米松干预，同时设对照组。测定BALF中IL-4和IL-10水平，细胞总数和肺组织病理变化。同时提取7只哮喘模型大鼠BALF中的巨噬细胞，体外给予1，25（OH）2D3干预。用逆转录一聚合酶链反应检测肺组织及BALF中巨噬细胞表达VDUP1和TRX的水平。结果1，25（OH）2D3治疗组BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞计数和IL-4水平降低，IL—10水平增高。肺组织及肺泡巨噬细胞中VDUP1和TRX表达增加。结论给予哮喘大鼠1，25（OH）2D3可抑制气道炎症，增加TRX和VDUP1的表达，两者可作为哮喘氧化应激的监测指标。; 周妍周新康建强王瑞良顾问王春燕; 关键词：1,25-二羟维生素D3 哮喘硫氧还蛋白

汽车尾气处理花粉对哮喘小鼠辅助性T细胞17/调节性T细胞的影响: 2016年; 目的探讨汽车尾气污染艾蒿花粉,对哮喘小鼠辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)比例失衡的影响。方法选择60只6~8周龄的雄性BALB/c小鼠为研究对象。采用随机数字表方法,将60只受试小鼠随机分为A^D与对照组,共计5组,每组均为12只。A组变应原和激发物均为艾蒿花粉提取液;B组变应原为艾蒿花粉提取液,激发物为汽车尾气污染艾蒿花粉提取液;C组变应原为汽车尾气污染艾蒿花粉提取液,激发物为艾蒿花粉提取液;D组变应原和激发物均为汽车尾气污染艾蒿花粉提取液;对照组变应原和激发物均为磷酸缓冲液(PBS)。收集这5组受试小鼠肺组织、支气管肺泡灌洗液(BALF)和脾脏标本分别进行:1HE染色、高倍镜下观察各组小鼠肺组织病理学改变;2统计学比较各组小鼠BALF中IL-17A、-10含量及细胞计数、分类的差异;3统计学比较各组小鼠脾脏单个核细胞中Th17及Treg占CD4+T细胞比例,以及Th17/Treg比值的差异。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。结果 1A^D组哮喘小鼠均存在不同程度小支气管管腔收缩及周围组织炎性细胞浸润,以D组程度最严重。2A^D组哮喘小鼠BALF中,IL-17A含量均分别较对照组高,而IL-10含量均分别较对照组低,且差异均有统计学意义(P<0.01)。A^C组哮喘小鼠BALF中,IL-17A含量均分别较D组低,而IL-10含量均分别较D组高,且差异均有统计学意义(P<0.05)。A^D组小鼠BALF中,细胞总数及嗜酸性粒细胞(EOS)、中性粒细胞(NEU)分类计数,均分别较对照组高;A^C组BALF中EOS及NEU分类计数均分别较D组低,且差异均有统计学意义(P<0.05)。3A^D组小鼠脾脏单个核细胞中,Th17细胞占CD4+T细胞比例及Th17/Treg均分别较对照组高,而Treg细胞占CD4+T细胞比例均分别较对照组低,且差异均有统计学意义(P<0.01);其中D组小鼠脾脏单个核细胞中Th17/Treg较A组高,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论汽车尾气污染花粉诱发; 杨玲徐欣欣周妍康建强田烨; 关键词：花粉哮喘 TH17细胞

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康建强

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