张春桃
- 作品数：20 被引量：56H指数：5
- 供职机构：新疆医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆维吾尔自治区自然科学基金新疆维吾尔自治区高校科研计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 疫情期间线上混合式教学对学生学习医学微生物学课程学习动机的影响研究被引量：1
- 2022年
- 疫情期间高校采取“停课不停学”的教学理念,通过线上授课的方式开展教学。文章针对学生在传统教学中医学微生物学课程学习动机中存在问题,通过线上混合式教学的方法改进和实施。包括雨课堂、虚拟仿真平台、中国慕课大学平台的使用,以及形成性评价的加入为教师及时调整上课内容及进度提供了有力的帮助。同时对提高学生学习动机有着积极的影响。
- 陈邬锦陈锋张蓓马海梅迪丽达尔·库德热提张春桃刘雪莉孙玉萍
- 三种截短的泡球蚴Em18基因原核表达质粒的构建、表达及初步鉴定
- 目的：构建三种截短的泡球蚴18（Em18）基因的原核表达质粒，获得高效表达、有生物活性的三种重组蛋白并对其进行初步鉴定。方法：DNAman软件设计引物，PCR法扩增并构建三种截短的pET41a-Em18.1，Em18.2...
- 张春桃
- 关键词：泡球蚴免疫检测
- 文献传递
- 细粒棘球蚴Eg95重组表位蛋白的免疫特性研究被引量：1
- 2016年
- 目的研究Eg95-1、Eg95-2、Eg95-3表位蛋白的抗原性,为细粒棘球蚴多表位疫苗的研制奠定基础。方法构建细粒棘球蚴Eg95-1、Eg95-2、Eg95-3抗原原核表达载体并体外诱导表达重组蛋白,纯化后免疫家兔,制备Eg95抗原多克隆抗体,采用Western blot检测Eg95-1、Eg95-2、Eg95-3抗原与Eg95多抗的反应性;分别用重组蛋白Eg95-1、Eg95-2、Eg95-3免疫BALB/c小鼠,采用ELISA检测小鼠血清特异IgG水平,MTT法检测脾淋巴细胞增殖。结果用Western blot检测重组蛋白Eg95-1、Eg95-2、Eg95-3均能与Eg95多抗血清反应,以Eg95-2和Eg95-3反应性较强。用Eg95-1、Eg95-2、Eg95-3重组抗原免疫小鼠后,随着免疫次数的增加和时间的延长,小鼠血清IgG水平升高,小鼠脾淋巴细胞在体外经ConA和Eg95抗原刺激诱导发生增殖。结论构建的3个表位均为Eg95的有效抗原表位,用重组抗原Eg95-1、Eg95-2、Eg95-3免疫小鼠后均可诱导以产生IgG为主的体液免疫应答,因此构建的3个表位蛋白抗原可用于细粒棘球蚴多表位肽疫苗的研制。
- 兰希王倩刘玉梅张春桃冯宁闫怡姜涛温浩丁剑冰马秀敏
- 关键词：细粒棘球蚴EG95表位疫苗免疫应答
- 布鲁氏菌病患者中PD-1和PD-L1的表达被引量：8
- 2017年
- 目的:研究程序性死亡受体1(PD-1)/与配体(PD-L1)以及相关细胞因子转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)和白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)在布鲁氏菌病(Brucellosis)患者中的变化。方法:选取60例布鲁氏菌病患者与60例健康志愿者,采用流式细胞术分别检测其外周血单个核细胞(PBMC)中CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞中PD-1的表达,以及树突状细胞(Dendritic cell,DC)中PD-L1的表达,同时采用流式液相多重蛋白定量技术(Cytometric bead array,CBA)检测血清中TGF-β和IL-10的变化,采用Pearson法分析布鲁氏菌病患者体内PD-1与TGF-β及IL-10的相关性,并对34例布鲁氏菌病治愈患者进行了追踪随访。结果:与正常对照组相比,布鲁氏菌病患者组外周血中PD-1、PD-L1的表达及血清中TGF-β和IL-10的水平均明显升高(P<0.01),而治愈组外周血中PD-1、PD-L1的表达及血清中TGF-β和IL-10的水平较治疗前明显降低(P<0.01),并且布鲁氏菌病患者组PD-1的表达与TGF-β(r=0.817,P<0.01)及IL-10均呈正相关(r=0.835,P<0.01)。结论:PD-1/PD-L1及TGF-β和IL-10在布鲁氏菌病患者体内高表达,可能共同参与了布鲁氏菌对宿主免疫应答的负性调控作用。
- 庞盼张峰波朱玥洁贾斌张跃新张春桃甫拉提.热西提丁剑冰
- 关键词：PD-1PD-L1布鲁氏菌病细胞因子
- Em18.3重组蛋白的表达及其免疫诊断特性的研究被引量：7
- 2007年
- 目的:在大肠杆菌中表达和纯化截短的泡球蚴rEm18.3抗原重组蛋白,对其免疫诊断特性进行鉴定。方法:IPTG诱导pET41a-Em18.3原核表达质粒,表达和纯化rEm18.3-GST重组蛋白,SDS-PAGE电泳及West-ern blot法对其进行初步鉴定,ELISA法确定其免疫诊断特性。结果:rEm18.3-GST重组蛋白得到成功表达,SDS-PAGE电泳显示相对分子量为45kDa。Western blot结果表明,rEm18.3-GST重组蛋白能被AE病人阳性血清识别。对56例多房棘球蚴病(AE)、88例细粒棘球蚴病(CE)、24例其他寄生虫病、24例其他疾病和24例健康者共236份血清进行ELISA检测结果显示,对AE血清诊断的敏感性为10.7%,特异性为99.4%,阳性预测值85.7%,阴性预测值78.1%。结论:rEm18.3-GST免疫诊断价值较低,Em18抗原重要的表位可能位于1-40位氨基酸。
- 林仁勇张春桃温浩王俊芳王星王俨卢晓梅张静萍张琰无
- 关键词：泡球蚴免疫检测
- 泡球蚴Em18多克隆抗血清的制备和鉴定被引量：3
- 2007年
- 目的:制备和鉴定泡球蚴Em18抗原的多克隆抗血清。方法:利用大肠杆菌BL21(DE3)表达重组质粒pET41a-Em18,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导、表达和纯化rEm18-GST蛋白,免疫BALB/c小鼠,制备鼠源抗Em18多克隆抗体,采用ELISA和Western blot法鉴定其特异性。结果:(1)SDS-PAGE检测表明,rEm18-GST蛋白得到成功表达,在相对分子量为50kDa处有表达条带。(2)纯化后获得高纯度的rEm18-GST蛋白。(3)ELISA结果表明,抗Em18抗血清的抗体滴度为1∶25600;Western blot结果表明抗Em18抗血清能与rEm18-GST蛋白发生特异性结合。结论:获得了特异性识别rEm18-GST蛋白的多克隆抗体,为进一步筛选Em18模拟抗原表位奠定基础。
- 王俊芳林仁勇张春桃王星王俨卢晓梅张琰张建龙温浩
- 关键词：泡球蚴
- 抗泡球蚴重组Em18抗原多克隆抗体的纯化与鉴定被引量：4
- 2007年
- 目的:制备抗泡球蚴18(Em18)抗原多克隆抗体,纯化并鉴定。方法:表达并纯化rEm18-GST蛋白。用纯化后的蛋白作为免疫原,免疫新西兰白兔获得抗rEm18-GST的多克隆抗体IgG,采用ELISA法检测抗体效价,进一步纯化抗体,获得抗Em18特异性多克隆抗体IgG,用Western blot及ELISA法检测并进行初步鉴定。结果:免疫制备获得兔抗rEm18-GST抗体,随着免疫次数的增加,抗体滴度不断升高,于第10周达到最高。ELISA检测抗体效价为1∶51200。Western blot及ELISA法鉴定表明Em18-GST抗体去除了与GST的交叉反应。结论:获得了去除与GST交叉反应的抗Em18多克隆抗体,为进行噬菌体肽库筛选奠定基础。
- 杨晨晨张蓓王俊芳张春桃王俨许晏王星张静萍张琰温浩林仁勇
- 关键词：泡球蚴多克隆抗体纯化
- 应用噬菌体7肽库筛选泡球蚴Em18抗原模拟表位的初步研究被引量：2
- 2007年
- 目的:从噬菌体7肽库中筛选泡球蚴Em18抗原模拟表位,为研究和开发新的包虫病诊断抗原提供实验依据。方法:用纯化后的rEm18-GST免疫新西兰白兔,获得抗rEm18-GST的多克隆抗体,进一步纯化,获得抗Em18多克隆抗体IgG,以之作为靶分子,免疫筛选噬菌体随机7肽库。经过5轮的淘筛过程,随机挑取9个蓝色噬菌斑扩增,核苷酸序列测定分析并与Em18进行同源性比较。结果:经5轮筛选后,阳性克隆得到富集,9个噬菌体克隆的氨基酸序列与Em18无同源性。结论:所得肽段可能是Em18抗原模拟表位。
- 张蓓杨晨晨林仁勇王俊芳张春桃王俨卢晓梅张静萍张琰许晏温浩
- 关键词：噬菌体肽库模拟表位
- 泡球蚴Em18重组蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化方法的优化被引量：3
- 2007年
- 目的:筛选和优化泡球蚴Em18重组蛋白在大肠杆菌中表达和纯化的方法,为进一步筛选Em18抗原表位奠定基础。方法:原核表达pET41a-Em18重组质粒,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导、表达,获得rEm18-GST蛋白,采用不同的超声程序破碎大肠杆菌细胞,分别采用GST柱、His柱及两者结合方法,改变不同的平衡、洗涤和洗脱缓冲液浓度,纯化rEm18-GST蛋白。结果:(1)rEm18-GST蛋白在相对分子质量为50kDa处有表达条带,蛋白表达量随诱导时间的延长而增加;(2)超声程序为工作1s,间歇3s,每个循环时程10min,加入蛋白酶抑制剂,可降低目的蛋白的降解;(3)采用单纯His柱可获得回收量高、纯度高的rEm18-GST蛋白。结论:(1)对含有GST-tag和His-tag双重标签重组蛋白的纯化,应用His柱更有效,更经济;(2)建立和优化一套从大肠杆菌细胞中分离纯化重组Em18蛋白的有效方法。
- 王俊芳王星张春桃王俨林仁勇卢晓梅张琰张建龙温浩
- 细粒棘球蚴表位质粒的构建和噬菌体展示
- 2015年
- 目的合成Eg95T-B联合表位肽段,通过噬菌体展示技术获得含不同联合表位的肽段,为细粒棘球蚴病的多抗原表位疫苗的研制奠定基础。方法采用DNAman软件设计3对相应引物,分别扩增各段联合表位的核苷酸序列,连接PMD18-T载体,PCR扩增测序正确的序列,然后用T4连接酶将各段外源基因重组到M13KE噬菌体载体上,构建M13KE/Eg95-1、M13KE/Eg95-2和M13KE/Eg95-3质粒,转入大肠埃希菌ER2738感受态细胞中,运用PCR方法对插入序列进行初步鉴定,测序确定序列正确且无基因突变。使各段基因所对应的外源肽融合表达于M13KE噬菌体PⅢ蛋白上,通过PEG/NaCl沉淀法提纯重组噬菌体。结果成功构建了M13KE/Eg95-1 M13KE/Eg95-2与M13KE/Eg95-3噬菌体展示系统,PCR扩增Eg95-1、Eg95-2、Eg95-3片段分别为192、168和222bp,与预期大小一致。结论成功构建了T细胞和B细胞联合表位的噬菌体展示系统,为抗原表位的筛选奠定了基础。
- 兰希胡晓安刘玉梅张春桃刘学磊冯宁王倩温浩丁剑冰马秀敏
- 关键词：EG95
