窦少华
- 作品数：106 被引量：266H指数：9
- 供职机构：大连大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学农业科学更多>>
- 烟台黑猪SLA-2基因真核表达载体的构建及表达
- 2021年
- 为构建烟台黑猪SLA-2基因(SLA-2-YT)的真核表达载体SLA-2-YT/pCDH并将其在真核细胞中表达,根据SLA-2-YT编码区基因序列设计1对引物,以SLA-2-YT/pMD18-T全基因克隆表达载体为模板进行PCR扩增获得SLA-2-YT编码区基因片段,在上下游引物的5'端分别添加限制性内切酶Xba I和Not I的酶切位点,将目的基因经pMD 19-T Simple Vector TA克隆后与pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro真核表达载体连接,获得的重组质粒转化至大肠杆菌Stbl 3感受态细胞,对扩大培养的单克隆菌株抽提质粒,使用双酶切和测序验证插入序列。对真核表达载体构建正确的菌株抽提无内毒素质粒,通过慢病毒包装和感染将质粒转染至sT2细胞,通过Western Blotting检测sT2细胞中SLA-2-YT基因的表达情况。结果显示,成功构建了SLA-2-YT/pCDH重组真核表达载体。重组质粒进行慢病毒包装和感染sT2细胞,经嘌呤霉素筛选后,成功获得阳性细胞克隆。Western Blotting检测显示SLA-2-YT/pCDH在sT2细胞中得到了优势表达,其融合蛋白的分子量大小为45 kD,与理论设计值相符。该实验成功构建了SLA-2-YT编码区基因的真核表达载体,并证实了SLA-2-YT编码区基因能够在sT2细胞中优势表达,为下一步开展SLA-2-YT递呈CTL表位的研究提供了材料。
- 胡晓王宝宝窦少华姜南付常振金行高凤山
- 关键词：真核表达载体转染
- 海洋肌酐水解酶菌株的筛选鉴定及其酶学性质研究被引量：4
- 2017年
- 从渤海海泥中筛选出一株肌酐水解酶高产菌株S-09,经形态学、生理生化特征并结合16S rDNA系统发育分析,鉴定菌株为微小杆菌属(Exiguobacterium sp.)。对所产肌酐水解酶进行酶学性质研究表明,该酶的最适作用温度为30℃,热稳定性较差,最适作用pH值为7.5,碱性条件下,pH值稳定性较好;Co^(2+)、Mn^(2+)对酶的激活作用较强,Ag^+、Hg^(2+)对酶有显著的抑制作用。
- 石群张庆芳杨丽娜王晓辉窦少华迟乃玉
- 关键词：菌株筛选酶学性质
- 微生物发酵生产低温脂肪酶的方法
- 本发明所述的一种微生物发酵生产低温脂肪酶的方法是将产生脂肪酶的微生物逐级低温驯化，使其在低温环境中生长良好；将低温驯化后的脂肪酶产生菌在14～20℃逐级扩大培养，按发酵液体积的3～9％接种量接入液体发酵培养基中，在14～...
- 张庆芳迟乃玉窦少华于爽
- 微生物学课程绪论课教学的探索与实践被引量：2
- 2011年
- 绪论课教学在整个微生物课程教学中起着至关重要的作用。本文结合大连大学的教学目标从教学定位、教学实施2个方面对绪论课教学进行了探索,经过一定时间的实践,取得了较好的教学效果。
- 王晓辉龚涛窦少华迟乃玉张庆芳
- 关键词：微生物学绪论教学定位教学实施
- 植物乳杆菌CLP0279产低温超氧化物歧化酶发酵条件的优化被引量：2
- 2016年
- 超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,EC1.15.1.1,简称SOD）,是广泛存在于生物体内的酸性金属酶,能够催化超氧阴离子自由基歧化生成氧和过氧化氢,具有抗炎症、抗辐射、抗衰老等作用。
- 李晓艳于爽窦少华张庆芳迟乃玉王晓辉
- 关键词：植物乳杆菌金属酶歧化海洋微生物单因素实验粗酶液
- 大麦制麦酶系中果胶酶的性质及形成机理被引量：2
- 2004年
- 实验采用凝胶层析法从绿麦芽中分离、提纯出果胶酶 ,并对其性质、形成机理进行了研究。结果表明 :在麦汁中果胶酶最适pH值为 4 5 ,而纯果胶酶的最适 pH值为 4 0 ;低浓度的Na Cl、CaCl2 对果胶酶具有激活作用。果胶酶的形成机理与其他水解酶基本相同 ,其形成依赖于赤霉素 ,受胚所分泌的赤霉素刺激 ,同时 ,亦是多种因素 (如大麦麦芽中抑制蛋白、金属盐等 )共同作用的结果。
- 赵长新窦少华孙付保张春玲
- 关键词：大麦果胶酶啤酒
- 微生物发酵生产低温果胶酶的方法
- 本发明所述的一种微生物发酵生产低温果胶酶的方法是将产生果胶酶的微生物逐级低温驯化，使其在低温环境中生长良好；将低温驯化后的果胶酶产生菌在10～16℃逐级扩大培养，按发酵液体积的3～9％接种量接入液体发酵培养基中，在10～...
- 迟乃玉张庆芳王晓辉窦少华于爽王春雨
- 文献传递
- 不同麦汁浓度及酵母代数的电导率在线监测被引量：1
- 2005年
- 采用电导率测量的方法对啤酒发酵过程进行了在线监测,并且对不同麦汁浓度、不同酵母代数进行了研究。结果表明:对于不同浓度的麦汁,其发酵过程中电导率的变化呈现明显的规律性,酵母代数对电导率的影响较大,1代酵母要比0代酵母提前约50min出现第1个拐点,即结束迟滞期;提前3h出现第2个拐点。这为研究啤酒发酵提供了一种有效的方法。
- 窦少华赵长新董亮郭建华
- 关键词：在线监测电导率啤酒麦汁浓度影响因素
- 一种海洋低温糖原分支酶基因的克隆及其表达
- 本发明属于酶工程和基因工程领域，具体涉及到一种在低温下仍具有活性与稳定性的海洋低温糖原分支酶基因的克隆与其表达。海洋低温糖原分支酶基因序列为SEQ ID NO.1所示，该基因序列全长1788bp，以ATG为起始密码子，以...
- 窦少华周新尚逄飞迟乃玉
- 文献传递
- 菇渣海洋微生物转化技术
- 迟乃玉张庆芳窦少华任大明崔京春张玉文
- 该项目所属生物工程技术领域。是中国发明专利(利用废弃菇渣生产反刍动物饲用复合微生态酶制剂的方法，专利号：ZL200510063043.5)等8个专利、1个成果鉴定为国内领先水平的技术集成。以废弃菇渣为主要原料，利用海洋低...
- 关键词：
- 关键词：饲料酶制剂
