臧家涛
- 作品数：20 被引量：11H指数：2
- 供职机构：第三军医大学野战外科研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家杰出青年科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 白介素-1β通过改变PKC、Rho激酶活性调节家兔内毒素休克后肠系膜上动脉钙敏感性被引量：4
- 2011年
- 目的观察在内毒素休克及白介素-1β介导家兔肠系膜上动脉(superior mesenteric artery,SMA)钙敏感性改变中SMA PKC、Rho激酶活性的变化。方法健康成年家兔96只,雌雄不拘,分为两实验大组:①内毒素休克组(包括5小组:正常对照组、LPS 30 min组、LPS 1 h组、LPS 2 h组和LPS 4 h组);②IL-1β处理组(包括3小组:0 ng/ml IL-1β组、50 ng/ml IL-1β组、100 ng/ml IL-1β组),每小组12只家兔。经耳缘静脉注入1 mg/kg LPS(O111∶B4)复制内毒素休克模型,在给LPS前及给LPS后30 min,1、2、4 h取家兔SMA,提取其PKC及Rho激酶蛋白并纯化,检测PKC及Rho激酶活性的变化,并与内毒素休克后血管钙敏感性变化进行相关分析;无菌条件下取正常成年家兔SMA,在0、50、100 ng/ml IL-1β作用12 h后,检测其PKC及Rho激酶活性的变化,并与IL-1β处理后家兔SMA钙敏感性变化进行相关分析。结果在给LPS后30 min至1 h成功复制出内毒素休克模型,与正常对照组相比,PKC、Rho激酶活性均在给LPS 30 min后升高(P<0.01),在2 h及4 h后均降低(P<0.01),与钙敏感性变化均呈显著正相关(r=0.912和0.968,P<0.05)。与0 ng/mlIL-1β组相比,100 ng/ml IL-1β能使PKC、Rho激酶活性明显降低(P<0.05),与钙敏感性变化均呈显著正相关(r=0.922和0.934,P<0.05)。结论 IL-1β能通过改变PKC、Rho激酶活性来调节家兔肠系膜上动脉钙敏感性,IL-1β可能通过改变PKC、Rho激酶活性调节家兔内毒素休克后肠系膜上动脉钙敏感性变化。
- 梁家林贺教江臧家涛朱娱刘良明
- 关键词：内毒素休克白介素-1ΒPKCRHO激酶
- 一种安全高效的血红蛋白纯化方法被引量：3
- 2011年
- 目的:建立一种适用于大量制备的,安全、高效的血红蛋白纯化方法。方法:将压积红细胞装入透析袋,以含有还原剂的Tris缓冲液透析破碎,破碎的上清经两级硫酸铵沉淀后透析至上样缓冲体系,离心后取上清即得血红蛋白提取液;红细胞提取液通过阴离子交换柱层析进一步分离,计算回收率。纯化产物浓缩后以SDS-PAGE及HPLC鉴定纯度,进行紫外-可见光谱扫描并以ABL800血气分析仪分析血气指标,以鲎试剂测定内毒素含量,以磷测定法测定脂质含量。结果:血红蛋白提取液中脂质去除率98%,容易通过0.45μm滤膜;经阴离子交换层析纯化的血红蛋白经SDS-PAGE(银染法)及WB分析没有杂蛋白条带,HPLC分析纯度>99%、总回收率>85%;内毒素含量<2 EU,高铁血红蛋白含量<5%。结论:该血红蛋白纯化方法安全高效、成本低廉、易于放大生产,具有较好的应用前景。
- 臧家涛刘建仓徐竞李东红刘良明
- 关键词：血红蛋白硫酸铵沉淀纯化
- 一种透析膜固定装置
- 本发明提供了一种透析膜固定装置，包括有固定座和夹套，固定座为中空柱状体，夹套卡箍于固定座的外侧壁，固定座外侧壁和夹套上设有位置相对应的孔，使用时裁剪成条状的透析膜被展开夹持于固定座外侧壁与夹套之间；固定座的上端通过紧固环...
- 臧家涛刘良明李涛
- 文献传递
- 癸基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析非变性蛋白质分子量的适用性鉴定
- 2012年
- 目的:鉴定癸基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDecS-PAGE)是否适于分析非变性蛋白质的分子量。方法:以不同SDecS-PAGE凝胶、电泳缓冲液分析5种非变性标准分子量蛋白质,观察蛋白质亚基解离情况,测定分子量对数值(log Mr)与迁移率x之间的相关性。结果:5种标准分子量蛋白质的四级结构完整,log Mr与x线性相关性较低;但其中的α-牛乳白蛋白、鸡蛋清白蛋白、牛血清白蛋白的log Mr与x线性相关性较好,相关系数平方值(R2)>0.94。结论:SDecS-PAGE可用于测定有限种类的非变性蛋白质的分子量。
- 臧家涛徐竞李东红刘建仓刘良明
- 关键词：分子量测定
- 一种透析皿
- 本发明提供了一种透析皿，包括透析皿本体和透析皿盖，透析皿本体为中空柱状体，透析皿盖密闭连接于透析皿本体的上端，透析皿盖上设有出气口和出气口盖，透析皿本体的内底面设有至少两个沿周向均匀分布的进气孔，该进气孔与透析皿本体底部...
- 刘良明臧家涛李涛
- 光敏剂叶酸-卟啉对宫颈癌HeLa细胞的靶向性和光动力活性被引量：1
- 2010年
- 目的评价光敏剂卟啉Ⅰ对宫颈癌HeLa细胞的肿瘤靶向性和光动力活性。方法采用荧光测定法和激光共聚焦扫描显微镜观察宫颈癌HeLa细胞对卟啉Ⅰ的吞噬作用;采用MTT试验观察卟啉Ⅰ在有或无光照条件下对人正常肝L-02细胞、肺腺癌A549细胞和宫颈癌HeLa细胞的生长抑制作用。结果孵育24 h后HeLa细胞对卟啉Ⅰ的吞噬量是前体卟啉A的35倍,且这种吞噬作用可被过量叶酸的加入明显抑制;卟啉Ⅰ对HeLa细胞呈现出很低的暗毒性和明显的光毒性,光照下在卟啉Ⅰ浓度为5.0×10-5mol/L时,HeLa细胞的生长抑制率达到84.6%;并且这种光毒性具有明显的叶酸受体阳性细胞选择性,在相同条件下,对正常L-02肝细胞和叶酸受体阴性A549细胞无光毒性。结论卟啉结构中引入叶酸单体后,由于叶酸受体的介导作用明显改善了该光敏剂的肿瘤靶向性和光动力活性。
- 李东红刁俊林刘建仓臧家涛
- 关键词：HELA细胞株肿瘤靶向性
- 复合生物微粒止血性能的评价被引量：1
- 2011年
- 以壳聚糖、海藻酸钠和胶原蛋白为基质,采用乳化交联技术将其制成一种结构疏松的复合微粒(CP),然后浸入氨甲环酸水溶液中,经冷冻干燥后得到载氨甲环酸复合微粒(TACP)。以速效止血粉为对照,采用兔的肝、脾破裂出血模型,考察CP和TACP的止血性能。在肝出血模型中,速效止血粉和CP的止血时间分别为(3.07±0.84)min和(2.48±0.88)min,两者无明显差异;而TACP止血时间为(1.90±0.75)min,较两者明显缩短(P<0.05);在脾出血模型中也得到相似的结果。这些结果表明CP具有与速效止血粉相似的止血性能,而TACP则显示了更为优良的止血性能,可望作为一种新型的粉体止血剂。
- 李东红高华臧家涛刁俊林刘建仓
- 关键词：复合微粒氨甲环酸
- 应用DNA shuffling及T7噬菌体展示技术定向进化并筛选鉴定sCD74突变体被引量：2
- 2008年
- 目的利用DNA shuffling技术，结合T7噬菌体表面展示技术，定向进化MIF受体sCD74，以获得高亲和力突变体基因。方法定点突变的牛、小鼠、人CD74胞外同源区基因以DNaseⅠ消化，回收25—50bp片段进行DNA shuffling；将500bp shuffling产物经限制性酶切后与T7噬菌体DNA连接，与T7 package extracts组建噬菌体文库；采用竞争淘洗方法进行5轮筛选，富集得到高亲和力结合MIF的噬菌体；挑取20株噬菌体单克隆进行基因克隆并测序，对测序结果进行生物信息学分析，同时以竞争ELISA初步鉴定进化效果。结果20株噬菌体单克隆具有相同的sCD74突变基因，为相同克隆，将此克隆命名为sHCD74m，其基因命名为sHCD74mD；竞争性ELISA分析显示其MIF结合力提高。结论得到了与MIF高亲和力结合的sCD74突变体基因sHCD74mD。
- 臧家涛李淑慧李鹏陈安胡川闽
- 关键词：SHUFFLING巨噬细胞移动抑制因子CD74噬菌体展示技术MHC
- 一种血红蛋白提取液的制备方法
- 本发明提供了一种血红蛋白提取液的制备方法，依次进行如下操作：将压积红细胞在透析袋中经低渗透压破碎得到红细胞破碎液；用0℃时终饱和度为25%和60%对应量的硫酸铵进行两步沉淀，然后将沉淀蛋白重悬后转入透析袋中透析以去除硫酸...
- 刘良明臧家涛胥婷刘建仓李东红
- 文献传递
- 一种冷冻保存红细胞的方法
- 本发明提供了一种冷冻保存红细胞的方法，向红细胞中加入还原剂和甘油以及作为金属离子螯合剂的乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸盐；还原剂为抗坏血酸或抗坏血酸盐、半胱氨酸盐酸盐或N-乙酰半胱氨酸、硼氢化钠、亚硫酸钠或亚硫酸氢钠或焦亚硫...
- 刘良明臧家涛徐竞刘建仓
