蔡国瑞
- 作品数：16 被引量：102H指数：5
- 供职机构：天津出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家标准化管理委员会项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生农业科学生物学更多>>
- PCR-免疫胶体金试纸条方法检测食品中肠出血性大肠杆菌O157:H7被引量：10
- 2015年
- 目的建立PCR-免疫胶体金试纸条法快速检测食品中肠出血性大肠杆菌O157:H7的分析方法。方法通过设计特异性引物建立肠出血性大肠杆菌O157:H7 PCR检测方法并使用免疫胶体金技术以及双抗体夹心法建立PCR产物快速检测试纸条并设计核酸检测展开液;将1株大肠杆菌O157:H7标准菌株和7株其他常见食源性致病菌作为试验菌株,用试验菌株检测PCR-免疫胶体金试纸条方法的检测特异度,并比较PCR-免疫胶体金试纸条法和PCR-琼脂糖凝胶电泳法的检测敏感度。结果 PCR-免疫胶体金法具有良好的特异度,灵敏度比标准琼脂糖凝胶电泳法高100倍。结论本文建立的肠出血性大肠杆菌O157:H7检测PCR-免疫胶体金试纸条法特异度好,灵敏度高,价格低廉,适用于食品中肠出血性大肠杆菌O157:H7的检测。
- 庞璐宋喆吴冬雪徐宝东张海英赵良娟刘培蔡国瑞李宗梦赵宏张宏伟
- 关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7聚合酶链反应免疫胶体金
- 食品中单增李斯特氏菌检测PCR-免疫胶体金试纸条方法的建立被引量：3
- 2015年
- 目的建立食品中单核增生李斯特氏菌快速检测PCR-免疫胶体金试纸条法。方法通过设计特异性引物建立单增李斯特氏菌检测PCR方法并使用免疫胶体金技术建立PCR产物快速检测试纸条;用试验菌株检测PCR-免疫胶体金试纸条方法的检测特异度与敏感度。使用新建方法对市售肉制品和乳制品中单核增生李斯特氏菌进行检测,验证该方法在食品检测中的可行性。结果 PCR-免疫胶体金法具有良好的特异度,敏感度比标准琼脂糖凝胶电泳法高100倍。采集乳品样品131份,阳性样品1份,检出率1.53%;肉制品224份,阳性样品4份,检测率1.79%。结论建立的单增李斯特氏菌检测PCR-免疫胶体金试纸条法特异度好,敏感度高,适用于食品中单增李斯特氏菌的检测。
- 庞璐宋喆吴冬雪张海英赵良娟刘培蔡国瑞李宗梦赵宏张宏伟
- 关键词：单增李斯特氏菌PCR免疫胶体金
- 采用微量补体结合试验改良法从进口种羊中检出羊衣原体抗体阳性
- 2004年
- 王玉玲蔡国瑞刘炀赵锁花
- 关键词：卫生检疫
- 传染性羊痒病抗性基因分型方法的建立
- 2010年
- 根据GenBank中登录的绵羊朊蛋白编码基因PRNP序列,设计并合成了可用于单核苷酸多态性(SNP)快速分析的3对引物和7条分别标记了FAM和VIC荧光染料的MGB探针,建立了一种利用荧光定量PCR扩增反应对羊痒病抗性基因进行筛选的方法。结果表明,设计的引物及探针具有特异性和高效扩增性,能够用于PRNP羊痒病抗性基因的快速分型。借助该方法可建立一整套完善的预警监测体系来预防该病的发生,也可用于羊痒病的常规实验室诊断。
- 董志珍赵祥平侯艳梅李琳肖妍蔡国瑞栾慎顺霍蕾
- 关键词：朊蛋白基因基因分型
- 非洲猪瘟病毒P54基因原核表达载体的构建与表达被引量：7
- 2009年
- 根据GenBank中非洲猪瘟病毒(ASFV)P54基因序列,设计合成了2对引物,采用PCR方法从ASFV DNA中分别扩增出了P54基因片段和经过改造的跨膜信号肽缺失的P54基因,将其克隆到表达载体pET28b中,构建了重组质粒pET-P54和pET-P54q,测序验证后转化入表达宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE,Western-blotting检测。结果显示,经过改造的信号肽缺失的重组菌pET-P54q可表达出分子质量约24.5 ku的重组融合蛋白,表达的蛋白以可溶形式存在于菌体中,经镍柱亲和层析纯化可获得纯度较高的目的蛋白。纯化的蛋白能与ASFV阳性血清发生特异性的免疫印迹反应,证实,表达的蛋白具有较好的反应原性。
- 侯艳梅董志珍赵祥平李琳肖妍陈本龙蔡国瑞栾慎顺王建华
- 关键词：非洲猪瘟病毒原核表达
- 农产品中甲羧除草醚残留量的气相色谱-质谱法测定被引量：3
- 2009年
- 建立了农产品中除草剂甲羧除草醚残留量的气相色谱-质谱(GC/MS)检测方法;样品经溶剂提取、固相萃取柱净化,采用气质联用仪在选择离子监测模式下进行快速定性定量分析,外标法定量,方法检出限为0.005mg/kg。在大米、大豆、茶叶、蜂蜜中4种样品中添加不同浓度的甲羧除草醚时,其平均添加回收率在77.6%～98.4%之间,相对标准偏差(n=10)为2.8%～8.2%。
- 陈其勇韩红芳王云凤常春艳章骅蔡国瑞
- 关键词：气相色谱-质谱农产品
- 小麦粒线虫与剪股颖粒线虫单条幼虫PCR-RFLP检测分析被引量：2
- 2004年
- 剪股颖粒线虫 (Anguinaagrostis)是牧草、草坪上的重要线虫 ,小麦粒线虫 (Anguinatritici)是危害小麦的一种重要线虫。这两种线虫均可以对寄主植物造成严重危害 ,导致产量下降 ;由于该类线虫大多数时间以幼虫形态出现 ,鉴定种类比较困难。本实验比较两种线虫的虫瘿形态特征、对单条线虫DNA进行PCR扩增 ,并使用RsaⅠ、MspⅠ、AluⅠ、HinfⅠ和HaeⅢ五种限制性内切酶对PCR产物进行了限制性酶切 ,通过酶切图谱可以将两种线虫区分开。
- 马以桂王金成蔡国瑞
- 关键词：剪股颖粒线虫寄主植物
- 改良方法检验冷冻海产品中副溶血性弧菌
- 2004年
- 【目的】建立一种有效、可靠的方法检验冷冻海产品中副溶血性孤菌，弥补传统法的局限。【方法】用改进碱性胨水(MAPW)和盐结晶紫增菌液(SVPE)同时对5种冷冻海产品50份样进行增菌后，分别接种至科玛嘉孤菌显色培养基(CV)和硫代硫酸钠柠檬酸胆盐蔗培养基(TCBS)，以评估两种增菌液和两种分离培养基的效果；随机选取改良方法检出的10个分离株，用。PGR技术扩增副溶血性弧菌特tI基因，以认证改良方法的准确性。【结果】当采用改良方法，即MAPW增菌CV分离时，检出率为100％；当采用传统法即SVPE增菌TCBS分离时，检出率为60％～80％；用PCR技术在选取的10个分离株中都扩增出了tI基因。[结论】改良方法是一种高效、准确的检验方法。
- 高旗利罗茂凰张海滨张海英蔡国瑞高虹
- 关键词：副溶血性弧菌改良法增菌液
- 改良方法检验冷冻海产品中副溶血性弧菌被引量：1
- 2003年
- [目的]建立一种有效、可靠的方法检验冷冻海产品中副溶血性弧菌,弥补传统方法的局限。[方法]用改进碱性胨水(MAPW)和盐结晶紫增菌液(SVPE)同时对5种冷冻海产品50份样进行增菌后,分别接种至科玛嘉弧菌显色培养基(CV)和硫代硫酸钠柠檬酸胆盐蔗糖培养基(TCBS),以评估两种增菌液和两种分离培养基的效果;随机选取改良方法检出的10个分离株,用PCR技术扩增副溶血性弧菌特有的t1基因,以认证改良方法的准确性。[结果]当采用改良方法,即MAPW增菌CV分离时,检出率为100％;当采用传统法即SVPE增菌 TCBS分离时,检出率为60～80％;用PCR技术在所选取的10个分离株中都扩增出了t1基因。[结论]改良方法是一种高效、准确的检验方法。
- 高旗利高虹罗茂凰张海滨张海英蔡国瑞
- 关键词：副溶血性弧菌病原菌卫生质量
- 荧光分析法快速检测水产品中副溶血性弧菌被引量：4
- 2005年
- 〔目的〕 提出一种新颖、简便、快速检测水产品中副溶血性弧菌的方法。〔方法〕 本方法用阿拉伯糖—葡萄糖醛酸盐培养基 (AG)在 37℃下对副溶血性弧菌进行增菌 ,以苯甲基 -L -精氨酸 - 7-氨甲基 -香豆素 (Bz-Arg - 7AMC)作荧光底物 ,用荧光分析法检测该菌的胰蛋白酶样活性 ,通过判读胰蛋白酶样活性 ,确定水产品中是否污染有副溶血性弧菌。〔结果〕 该方法的灵敏度为 2 0个 /g,相关分析表明 :荧光分析法与 5管MPN计数法呈正相关 ,相关系数为 0 .86。〔结论〕 用本方法只需 8个小时就可完成水产品中的副溶血性弧菌的检验 ,操作简便 ,灵敏度较高 ,适于快速检测需要。
- 高旗利张霞蔡国瑞张海英
- 关键词：荧光分析法水产品副溶血性弧菌大肠埃希氏菌
