韩莉 作品数:18 被引量:31 H指数:3 供职机构: 郑州大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 河南省医学科技攻关计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活基因4剪切体Ns5atp4a基因原核表达载体的构建和表达 2010年 目的构建丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活基因4剪切体(NS5ATP4A)的原核表达载体并进行表达。方法用PCR扩增NS5ATP4A基因,克隆入pET32a(+)质粒,构建pET32a(+)-NS5ATP4A表达重组体,转化DH5α和BL21菌,经IPTG诱导。SDS-PAGE分析,Western Blot验证蛋白带。结果成功构建大肠杆菌原核表达载体。经IPTG诱导,得到了目的蛋白分子量为35kD,用Western Blot证实其具有良好的抗原性。结论构建原核表达载体pET32a(+)-NS5ATP4A,为抗原的制备及临床检测奠定了基础。 陈立冬 成军 洪源 张连峰 韩莉 郭江关键词:病毒非结构蛋白质类 肝炎病毒 下调Ets2表达对裸鼠食管鳞癌移植瘤生长及mTOR/p70S6K信号通路的影响 被引量:1 2016年 目的:探讨下调Ets2表达对裸鼠Eca109移植瘤生长及mTOR/p70S6K信号通路的影响。方法:选择已筛选出的在体外靶向下调Ets2基因表达的siRNA片段,构建包含此片段的慢病毒(LV-siE ts2)并感染Eca109,15只裸鼠随机分为空白对照组、阴性对照组和LV-siE ts2组,分别背部皮下接种Eca109、LV感染的Eca109和LV-siE ts2感染的Eca109,形成移植瘤,之后观察肿瘤生长情况、绘制肿瘤生长曲线并计算肿瘤抑制率。应用qRT-PCR检测肿瘤组织中Ets2 mRNA的表达,TUNEL法检测肿瘤组织细胞的凋亡,Western blot法检测肿瘤组织中Ets2、Caspase-3、Bcl-2、E-cadherin以及mTOR/p70S6K信号通路蛋白的表达。结果:LV-siE ts2组肿瘤生长速度明显变慢,肿瘤体积和质量显著小于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);LV-siE ts2组肿瘤组织中Ets2 mRNA及蛋白表达水平均显著降低;LV-siE ts2能引起Eca109细胞的凋亡,且上调Caspase-3和E-cadherin蛋白表达水平,而下调Bcl-2蛋白表达水平(P<0.05);LV-siE ts2能显著降低mTOR及p70S6K的蛋白表达。结论:LV-siE ts2在体内通过抑制mTOR/p70S6K信号通路促进细胞凋亡,从而抑制裸鼠Eca109移植瘤的生长。 韩康 马珊珊 李庆华 王欣欣 朱相展 孟楠 韩莉 关方霞关键词:SIRNA ECA109 裸鼠 酵母双杂交技术筛选p7TP2蛋白结合肝细胞蛋白的编码基因 2007年 目的筛选HCVp7蛋白反式调节蛋白p7TP2的结合蛋白,探讨HCV的致病机制及新蛋白p7TP2的生物学功能。方法应用酵母双杂交系统3,将多聚酶链反应(PCR)法扩增的p7TP2基因连接入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒,转化单倍体酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝细胞文库质粒pACT2的单倍体酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基和X-α-半乳糖(X-α-gal)上进行双重筛选,提取阳性酵母菌落的质粒转化大肠埃希菌氨苄青霉素-LB平板上选择并测序,结果在GenBank中进行生物信息学分析。然后将阳性文库质粒与诱饵质粒回交,以证实其相互作用。结果筛选出与p7TP2结合的蛋白基因10个,其中包括金属硫蛋白2A、载脂蛋白H、蛋白C、果糖二磷酸醛缩酶B、配对免疫球蛋白样2型受体α、CTL1基因类胆碱运输蛋白等已知功能蛋白基因相互作用,回交试验已经证实其相互作用。结论由本研究结果发现p7TP2蛋白可以结合一系列不同功能的肝细胞蛋白,作为一种新基因,对它的进一步作用机制的研究将为阐明HCV感染及慢性肝炎、肝纤维化和肝癌的病理机制提出新的思路。 袁菊 成军 洪源 靳亚平 韩莉 陶明亮 李越 王琦关键词:酵母双杂交 抗凝血 慢病毒介导的RNA干扰下调p16的表达对hUC-MSCs衰老的影响 2016年 目的:利用慢病毒(LV)介导的RNA干扰下调老龄人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)中p16基因的表达,研究p16表达下调与h UC-MSCs衰老的关系。方法:实验分为第3代(P3)h UC-MSCs组(P3组)、P15 h UC-MSCs组(P15组)、LV-sip16感染P15 h UC-MSCs组(LV-sip16组)和LV-NC感染P15 h UC-MSCs组(空病毒组)。采用CCK-8法检测细胞增殖,β-半乳糖苷酶染色计算衰老细胞率,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,qRT-PCR检测衰老相关基因p16、p21、p53、p CNA、sirt1、sirt2、Cyclin D1、CDK4 mRNA的表达。结果:LV-sip16感染能促进P15 h UCMSCs增殖,降低衰老细胞率,促使细胞周期进入S期,抑制h UC-MSCs的早期凋亡(P均<0.05);同时,LV-sip16组细胞中p16、p21、p53 mRNA表达量较P15组降低,而p CNA、sirt1、sirt2、Cyclin D1、CDK4 mRNA表达量升高(P均<0.05)。结论:下调P15 h UC-MSCs中p16基因的表达能够延缓和改善h UC-MSCs的衰老。 韩康 马珊珊 朱相展 孟楠 王欣欣 邢衢 黄团结 韩莉 石振庆 杨波 关方霞关键词:P16 慢病毒 人脐带间充质干细胞 衰老 浅谈神经内科开展优质护理服务的体会 优质护理服务是医院文化传播的载体、宣传品牌、形像标志,它能让病人体会到被尊重、被信任、享公平的心理需求,提高病人满意度,又能让医院在当今日趋激烈的市场竞争中获得持久的胜利。我科自开展以来,用人性化的护理服务理念,以病人为... 韩莉关键词:优质护理 文献传递 HCV NS5A反式激活基因NS5ATP13在毕氏酵母中的表达研究 2007年 目的探讨NS5AATP13能否在毕氏酵母中成功表达。方法用BstXⅠ将pPICZαA-NS5ATP13线性化后,电转化毕氏酵母菌株KM71H,用Zeocin筛选高拷贝数的酵母菌落,在BMGY和BMMY培养基中进行诱导表达,以甲醇诱导,30℃培养4d,表达产物进行SDS-PAGE和Westernblot分析。结果预期分子量大小的NS5ATP13蛋白分泌至培养液。结论NS5ATP13在毕氏酵母中成功表达。 袁菊 成军 洪源 杨延平 陶明亮 靳亚平 韩莉关键词:毕氏酵母 分泌表达 HCV NS5A 血管性痴呆患者血浆同型半胱氨酸和巨噬细胞游走抑制因子的表达及与病情严重程度的相关性分析 被引量:6 2021年 目的分析血管性痴呆(vascular dementia,VD)患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)和巨噬细胞游走抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)的表达及与病情严重程度的相关性。方法我院临床确诊的113例血管性痴呆患者(VD组),同期健康体检者34例(健康组)及确诊脑血管病患者39例(非痴呆脑血管病组)。对比各组Hcy及MIF的变化及病情,以及VD组中不同病情严重程度者Hcy与MIF水平差异,分析Hcy、MIF的表达与病情的相关性。结果与健康组相比,VD组和非痴呆脑血管病组Hcy、MIF水平偏高,MMSE评分偏低,其中VD组Hcy、MIF水平最高,MMSE评分最低(P<0.05);VD组不同病情程度者Hcy、MIF表达水平比较,轻度组<中度组<重度组(P<0.05);血管性痴呆患者Hcy、MIF表达与MMSE评分呈负相关(P<0.05)。结论血管性痴呆患者Hcy、MIF的表达水平与疾病严重程度具有相关性,Hcy、MIF水平越高,患者病情越严重。 韩莉 聂贝贝 冯方 邓文静关键词:血管性痴呆 同型半胱氨酸 巨噬细胞游走抑制因子 需要层次理论指导下的术后康复护理干预模式在急性缺血性脑卒中患者中的应用 被引量:16 2023年 目的:探讨需要层次理论指导下的术后康复护理干预模式在急性缺血性脑卒中患者中的应用效果。方法:采用便利抽样法,选取2019年2月—2022年2月在郑州大学第一附属医院神经科行介入手术治疗的120例急性缺血性脑卒中患者,随机分为观察组和对照组,各60例。对照组术后给予常规护理,观察组术后给予需要层次理论指导下的术后康复护理。比较两组干预前后的美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、日常生活能力评分(Barthel指数)、匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)、17项汉密尔顿抑郁量表(HAMD-17)评分以及总体幸福感量表(GWB)评分。结果:干预后,观察组NIHSS评分低于对照组,Barthel指数高于对照组,观察组的PSQI、HAMD-17评分均低于对照组,观察组的GWB评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:需要层次理论指导下的术后康复护理干预模式有利于改善急性缺血性脑卒中患者的神经功能、负面情绪及睡眠质量,提高患者的日常生活能力和幸福感。 郭斌艳 韩莉 聂贝贝关键词:卒中 需要层次理论 急性缺血性脑卒中 酵母双杂交技术筛选与NS3TP2蛋白结合的肝细胞蛋白编码基因 一、背景和目的
丙型肝炎病毒(HCV)属黄病毒科,可引起慢性肝炎、肝硬化及肝癌,目前世界上有1.7亿人感染,治疗上只有干扰素和利巴韦林,而且疗效有限。对于HCV分子生物学机制的阐明是进行抗病毒治疗和最终战胜丙型... 韩莉关键词:酵母双杂交 脂肪代谢 蛋白质代谢 编码基因 文献传递 层级护理模式下的正念减压疗法对缓解ICU护士工作压力的影响 2024年 目的:探讨层级护理模式下的正念减压疗法对缓解ICU护士工作压力的影响。方法:将2022年2月1日~7月1日纳入的护士作为对照组,给予正念减压疗法;将2022年8月1日~2023年1月1日纳入的护士作为研究组,在对照组基础上实施层级护理管理模式;比较两组干预前后情绪应对能力[采用简易应对方式量表(SCSQ)]、正念水平[采用中文版五因素正念量表(FFMQ)]、工作幸福感(采用护士工作幸福感量表)、觉知压力[采用觉知压力量表(CPSS)]、工作压力(采用护士工作压力量表)及工作满意度(采用护士工作满意度评定量表)。结果:干预后,两组SCSQ中消极情绪应对、CPSS、工作压力评分均低于干预前(P<0.01),且研究组低于对照组(P<0.01);干预后,两组SCSQ中积极情绪应对、FFMQ、工作幸福感及工作满意度评分均优于干预前(P<0.01),且研究组优于对照组(P<0.01)。结论:层级护理模式下的正念减压疗法对缓解ICU护士的工作压力效果较好,能够有效改善护士的情绪应对能力、正念水平、工作幸福感、觉知压力、工作压力、从而提高对工作满意度。 韩莉 聂贝贝 金歌 冯方关键词:ICU护士 工作压力 幸福感 满意度