何倩
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：浙江理工大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 索拉菲尼诱导的肝癌耐药细胞株的建立及其生物学特性被引量：3
- 2012年
- 目的建立索拉菲尼诱导的PLC/PRF/5和Huh7耐药细胞株,并研究其耐药细胞的生物学特性。方法通过药物敏感性实验CCK8法测定索拉菲尼的半数抑制浓度IC50值;采用体外间歇诱导法,使用PLC/PRF/5和Huh7各自IC50值作为筛选浓度,建立索拉菲尼诱导的耐药细胞株模型;Real time-PCR检测5种耐药基因(GST-π、LRP、MDR1、MRP、TopoⅡ)在耐药组和对照组中的表达差异;Western blot检测MAPK信号通路中关键信号因子细胞外调节蛋白激酶(extra-cellular regulated protein kinases,ERK)ERK1/2在不同组别细胞中的磷酸化水平差异。结果所筛选的PLC/PRF/5和Huh7耐药组细胞与对照组细胞相比较,其细胞生存率有显著性提高(P<0.05);5种耐药基因中MDR1的表达有显著性上调(P<0.05);索拉菲尼作用靶点的下游信号因子ERK1/2的磷酸化水平上调。结论成功地在体外建立索拉菲尼诱导的PLC/PRF/5和Huh7耐药细胞株,其耐药机制可能与ERK1/2的磷酸化水平上调导致耐药基因MDR1高表达有关。
- 姚超朱传琳何倩李果夏锋钱程
- 关键词：索拉菲尼肝细胞癌
- 携带EGFP报告系统的五型腺病毒对肝癌干细胞的感染效率
- 2012年
- 利用携带EGFP报告系统的五型腺病毒(Ad5-EGFP)作为工具,以发生上皮-间质转化(epithelial-mes-enchymal transition,EMT)前后的肝癌细胞系Huh7为研究对象,采用流式细胞仪、荧光定量PCR等技术开展腺病毒对发生EMT前后的肝癌细胞系Huh7的感染效率的对比研究。实验结果表明:Ad5-EGFP对上皮生产因子β1(TGF-β1)处理前的Huh7细胞系感染率比TGF-β1处理后的细胞系感染率更高。同时Ad5-EGFP的主要受体-CAR在肝癌细胞系Huh7发生EMT后表达有所降低。证实了肿瘤干细胞更难被腺病毒侵染,为了适应临床治疗的需要,腺病毒作为基因治疗的载体需要进一步被改造。
- 胡贲苏虹徐科姚超何倩钱程刘立
- 关键词：肝癌干细胞EMT
- E-cadherin启动子调控的慢病毒荧光报告载体的构建
- 2012年
- E钙黏素(E-cadherin)的缺失是上皮-间质转化(EMT)的重要标志,而EMT可促进肿瘤细胞的侵润及转移。为进一步研究E-cadherin与EMT的关系,研究构建了E-cadherin启动子驱动的黄色荧光蛋白慢病毒表达载体,构建的载体经酶切鉴定正确;采用磷酸钙法包装出慢病毒,取病毒上清感染人肝癌PLC/PRF/5细胞株,通过荧光观察和qRT-PCR实验结果显示E-cadherin在靶细胞中稳定高表达。该载体的构建为深入研究E-cadherin相关的EMT现象提供了良好的工具。
- 何倩杨耿兵姚超钱程
- 关键词：E-CADHERIN慢病毒载体黄色荧光蛋白
- 双靶向溶瘤腺病毒联合奥沙利铂对肿瘤细胞凋亡的研究
- 2011年
- 研究化疗药物奥沙利铂(Oxaliplatin)联合AdCN205-IL-24对人结肠癌细胞的体外杀伤作用。实验采用MTT法检测肿瘤特异性增殖腺病毒AdCN205-IL-24联合奥沙利铂对两种肿瘤细胞以及正常细胞增殖的抑制作用;Hoechest33342染色,在荧光显微镜对病毒联合化疗诱导的肿瘤细胞凋亡进行形态学观察。结果表明:AdCN205-IL-24联合奥沙利铂处理4 d后对结肠癌细胞株HT-29和SW620的增殖抑制率达到23.17%和22.98%,并且联合化疗并未增加对人正常细胞株L-02的毒性。
- 杨耿兵何倩黄青红胡徐庞刘立钱程骆菁菁
- 关键词：溶瘤腺病毒奥沙利铂结肠癌
- TGF-β1对肝癌细胞系Hep3B中干性相关基因表达的影响
- 2012年
- 有研究表明TGF-β1可以诱导诸多上皮来源的癌细胞和正常细胞发生EMT并使其功能发生改变。实验就TGF-β1对肝癌细胞系Hep3B的作用展开研究:通过CCK8检测TGF-β1对Hep3B细胞增殖的影响,RT-PCR实验检测TGF-β1处理后细胞中EMT及干性相关基因的表达变化。结果表明:TGF-β1对Hep3B细胞的增殖无抑制作用;TGF-β1处理Hep3B细胞6d后EMT相关基因的mRNA表达水平并无显著改变,但TGF-β1可上调Hep3B细胞干性基因Oct-4,Klf-4,Nanog,C-myc的表达,并下调分化基因albumin的表达。结果提示TGF-β1一定程度上影响肝癌细胞系的干性基因表达,但并不一定是以发生EMT为前提的。
- 苏虹胡贲徐科何倩姚超钱程刘立
- 关键词：TGF-Β1HEP3BEMT
