姚超
- 作品数：7 被引量：8H指数：2
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- β肾上腺素能受体兴奋对大鼠急性肝损伤的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨β肾上腺素能受体兴奋对大鼠急性肝损伤的影响。方法使用异丙肾上腺素兴奋β肾上腺素能受体,在不同的用药剂量(1、10、100 mg/kg)和不同的损伤时相点(24、48、72、96 h)以及使用普萘洛尔抑制β肾上腺素能受体兴奋的情况下,检测肝功能指标[谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(Alb)和总胆红素(TBil)],观察组织病理学变化,探讨β肾上腺素能受体兴奋对大鼠急性肝损伤的影响。结果大鼠肝损伤程度随着异丙肾上腺素剂量的加大而加重[ALT(IU/L):对照组(336.2±140.5),1 mg/kg组(603.7±239.7),10 mg/kg组(838.6±448.5),100 mg/kg组(1 571.5±714.7),P<0.05];在急性肝损伤后第48小时对照组与实验组各项肝功能指标均有统计学差异[ALT(IU/L):(290.8±153.9)、(636.0±385.2),P<0.05;AST(IU/L):(521.0±296.8)、(2 289.1±1 361.5),P<0.05;Alb(g/L):(28.3±1.3)、(25.2±1.5),P<0.05;TBil(μmol/L):(4.1±1.2)、(24.8±16.9),P<0.05];应用普萘洛尔抑制β肾上腺素能受体兴奋,能有效防止大鼠急性肝损伤加重[ALT:兴奋组(606.0±154.9)IU/L,抑制组(210.0±176.1)IU/L,P<0.05]。结论β肾上腺素能受体的兴奋能有效调控大鼠急性肝损伤的进程。
- 李果夏锋吴林姚超钱程别平
- 关键词：Β肾上腺素能受体急性肝损伤炎症调控
- E-cadherin启动子调控的慢病毒荧光报告载体的构建
- 2012年
- E钙黏素(E-cadherin)的缺失是上皮-间质转化(EMT)的重要标志,而EMT可促进肿瘤细胞的侵润及转移。为进一步研究E-cadherin与EMT的关系,研究构建了E-cadherin启动子驱动的黄色荧光蛋白慢病毒表达载体,构建的载体经酶切鉴定正确;采用磷酸钙法包装出慢病毒,取病毒上清感染人肝癌PLC/PRF/5细胞株,通过荧光观察和qRT-PCR实验结果显示E-cadherin在靶细胞中稳定高表达。该载体的构建为深入研究E-cadherin相关的EMT现象提供了良好的工具。
- 何倩杨耿兵姚超钱程
- 关键词：E-CADHERIN慢病毒载体黄色荧光蛋白
- 应用Lv-pNanog-GFP慢病毒载体探讨Nanog在调控结直肠癌细胞的自我更新与转移能力中的作用被引量：3
- 2014年
- 目的探讨干细胞标记物Nanog对结直肠癌细胞的自我更新以及转移能力的影响。方法将本实验室已构建的Nanog启动子携带绿色荧光蛋白的慢病毒载体Lv-pNanog-GFP感染人结直肠癌细胞系HCT116,并经流式分选得到GFP表达阳性和阴性的细胞,通过Western blot检测病毒的有效性,克隆形成实验和成球实验检测肿瘤细胞的自我更新能力,Transwell实验检测肿瘤细胞的转移能力。结果细胞系在感染病毒12 h后,倒置荧光显微镜下可观察到GFP的荧光表达,说明病毒Lv-pNanog-GFP可稳定感染人结直肠癌细胞HCT116,且GFP的阳性率为5.9%。Western blot结果显示,根据GFP所分选出的细胞能准确的对应Nanog的表达量。Nanog阳性细胞的克隆形成率[(56.3±2.87)%]显著大于Nanog阴性细胞的克隆形成率[(19±2.16)%](P<0.05)。Nanog阳性细胞所形成的干细胞球体积明显增大且成球率[(34±4)%]显著大于Nanog阴性细胞[(10.67±6.43)%](P<0.05),说明Nanog阳性细胞具有更强的自我更新能力。Nanog阳性细胞穿过Transwell小室的细胞数(175.8±12.89)比Nanog阴性细胞(74.6±16.55)显著增多(P<0.05),说明Nanog阳性细胞具有更强的转移能力。结论在结直肠癌细胞中Nanog调控肿瘤细胞的自我更新以及转移能力。
- 朱传琳姚超钱程徐先林欧刚卫
- 关键词：结直肠癌NANOG
- 棉酚在肝癌细胞中作用机制的研究
- 2012年
- 棉酚是棉花中倍半萜(十五碳)的法尼基焦磷酸环化后合成的次生代谢产物。近来有研究显示棉酚具有抗肿瘤效果。本研究通过MTT、Hoechst染色、Western blot等生化技术开展棉酚对肝癌细胞系Bel-7404的增殖抑制及促凋亡作用研究。MTT实验结果表明5mmol棉酚即对肝癌细胞增殖具有强烈抑制作用,Hoechst染色表明5mmol/L棉酚即可对肝癌细胞具有促凋亡作用,Western blot结果表明棉酚能下调Bcl-2基因的表达。棉酚对肝癌细胞系Bel-7404具有很好的抑制增殖和促凋亡的效果。
- 黄青红姚超胡徐庞王刚杨耿兵刘立钱程魏旭斌
- 关键词：棉酚肝癌凋亡
- 携带EGFP报告系统的五型腺病毒对肝癌干细胞的感染效率
- 2012年
- 利用携带EGFP报告系统的五型腺病毒(Ad5-EGFP)作为工具,以发生上皮-间质转化(epithelial-mes-enchymal transition,EMT)前后的肝癌细胞系Huh7为研究对象,采用流式细胞仪、荧光定量PCR等技术开展腺病毒对发生EMT前后的肝癌细胞系Huh7的感染效率的对比研究。实验结果表明:Ad5-EGFP对上皮生产因子β1(TGF-β1)处理前的Huh7细胞系感染率比TGF-β1处理后的细胞系感染率更高。同时Ad5-EGFP的主要受体-CAR在肝癌细胞系Huh7发生EMT后表达有所降低。证实了肿瘤干细胞更难被腺病毒侵染,为了适应临床治疗的需要,腺病毒作为基因治疗的载体需要进一步被改造。
- 胡贲苏虹徐科姚超何倩钱程刘立
- 关键词：肝癌干细胞EMT
- TGF-β1对肝癌细胞系Hep3B中干性相关基因表达的影响
- 2012年
- 有研究表明TGF-β1可以诱导诸多上皮来源的癌细胞和正常细胞发生EMT并使其功能发生改变。实验就TGF-β1对肝癌细胞系Hep3B的作用展开研究:通过CCK8检测TGF-β1对Hep3B细胞增殖的影响,RT-PCR实验检测TGF-β1处理后细胞中EMT及干性相关基因的表达变化。结果表明:TGF-β1对Hep3B细胞的增殖无抑制作用;TGF-β1处理Hep3B细胞6d后EMT相关基因的mRNA表达水平并无显著改变,但TGF-β1可上调Hep3B细胞干性基因Oct-4,Klf-4,Nanog,C-myc的表达,并下调分化基因albumin的表达。结果提示TGF-β1一定程度上影响肝癌细胞系的干性基因表达,但并不一定是以发生EMT为前提的。
- 苏虹胡贲徐科何倩姚超钱程刘立
- 关键词：TGF-Β1HEP3BEMT
- 索拉菲尼诱导的肝癌耐药细胞株的建立及其生物学特性被引量：3
- 2012年
- 目的建立索拉菲尼诱导的PLC/PRF/5和Huh7耐药细胞株,并研究其耐药细胞的生物学特性。方法通过药物敏感性实验CCK8法测定索拉菲尼的半数抑制浓度IC50值;采用体外间歇诱导法,使用PLC/PRF/5和Huh7各自IC50值作为筛选浓度,建立索拉菲尼诱导的耐药细胞株模型;Real time-PCR检测5种耐药基因(GST-π、LRP、MDR1、MRP、TopoⅡ)在耐药组和对照组中的表达差异;Western blot检测MAPK信号通路中关键信号因子细胞外调节蛋白激酶(extra-cellular regulated protein kinases,ERK)ERK1/2在不同组别细胞中的磷酸化水平差异。结果所筛选的PLC/PRF/5和Huh7耐药组细胞与对照组细胞相比较,其细胞生存率有显著性提高(P<0.05);5种耐药基因中MDR1的表达有显著性上调(P<0.05);索拉菲尼作用靶点的下游信号因子ERK1/2的磷酸化水平上调。结论成功地在体外建立索拉菲尼诱导的PLC/PRF/5和Huh7耐药细胞株,其耐药机制可能与ERK1/2的磷酸化水平上调导致耐药基因MDR1高表达有关。
- 姚超朱传琳何倩李果夏锋钱程
- 关键词：索拉菲尼肝细胞癌
