傅海英
- 作品数：20 被引量：98H指数：6
- 供职机构：福建医科大学附属协和医院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金漳州市科技计划项目福建省卫生厅青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术生物学更多>>
- 多发性骨髓瘤患者p16基因甲基化及砷剂诱导去甲基化的研究被引量：19
- 2005年
- 目的探讨p16基因启动子区CpG岛甲基化在多发性骨髓瘤(MM)患者发病中的作用以及三氧化二砷(As2O3)诱导p16基因的去甲基化作用。方法采用巢式甲基特异性PCR法检测MM患者以及利用As2O3作用前后人MM细胞株U266的p16基因的甲基化状态,RTPCR检测U266细胞用药前后p16基因mRNA的表达变化,生长曲线、MTT法检测As2O3对细胞的生长和增殖抑制。利用流式细胞仪检测DNA含量分析法探讨As2O3对骨髓瘤细胞系U266周期的影响。结果MM患者p16基因的甲基化比例为54.8%,U266细胞存在p16基因甲基化,p16基因不表达,As2O3作用后p16基因甲基化程度明显减弱至消失,与未处理组相比,不同剂量作用72h后p16基因表达阳性条带灰度值与βactin比值分别为0.22±0.10、0.59±0.11、0.68±0.09,阳性对照灰度比值为0.77±0.13,其差异有统计学意义(P<0.01)。结论p16基因甲基化在MM患者中较为常见,这可能为MM的诊断和治疗提供借鉴;As2O3可诱导p16基因去甲基化,使p16基因表达上调,恢复其活性,为去甲基化治疗提供新思路。
- 傅海英沈建箴
- 关键词：多发性骨髓瘤P16基因甲基化砷剂去甲基化
- 巢式MSP法检测急性白血病患者p16基因甲基化状态被引量：14
- 2007年
- 为了研究p16基因甲基化和缺失与急性白血病发病的关系,探讨其在成人急性白血病发生发展中的生物学意义,应用巢式甲基化特异性聚合酶链反应(nested methylation specific polymerase chain reaction,n-MSP)分析了82例各种亚型的急性白血病患者在初诊或复发不同阶段p16基因的甲基化和缺失状态,并且在基因组硫化修饰PCR后克隆测序验证结果的准确性。结果表明:82例急性白血病(AL)患者p16基因甲基化的出现率为39.0%,其中急性髓系白血病(AML)患者为41.4%,24例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者为33.3%;初治AL患者为36.6%,而复发患者则为54.5%。82例AL患者中有6例p16基因缺失,缺失率为7.3%,在AML、ALL患者中分别为1.7%和20.8%。16例健康自愿者或非恶性血液病患者p16基因则未发生甲基化或缺失。结论:在成人急性白血病的发生发展中,p16基因甲基化比p16基因纯合缺失更具有意义;p16基因表达异常与成人急性白血病的发生发展密切相关。
- 范丽萍沈建箴叶宝国林福安傅海英周华蓉沈松菲喻爱芳
- 关键词：P16基因基因甲基化急性白血病
- 砷剂对人骨髓瘤U266细胞系p16基因去甲基化诱导表达及其机制的研究
- 最近几年用砷剂治疗白血病引起关注。砷进人人体后还原发生甲基化,在甲基转移酶作用下,形成一甲或二甲砷酸而解毒。砷剂治疗与肿瘤抑制基因的甲基化有关,我们以人骨髓瘤(MM)细胞株U266为对象,用限制性内切酶PCR法、RT-P...
- 沈建箴傅海英沈松菲郑瑞玑
- 文献传递
- 半巢式甲基化特异性聚合酶链反应对肿瘤细胞株p15基因甲基化或缺失状态的检测被引量：12
- 2007年
- 本研究分析多种恶性肿瘤细胞株的p15基因甲基化或缺失状态,阐明p15基因甲基化或缺失在肿瘤发生发展中的作用。运用半巢式甲基化特异性聚合酶链反应(hemi-nested methylation specific polymerase chain reaction,hn-MSP)分析20种恶性肿瘤细胞株和正常人单个核细胞或细胞株的p15基因甲基化及缺失状态,并评价该方法的敏感性和特异性。结果表明:在所有的细胞中,Molt-4、Raji、KG1、CA46、SW480、NCE、SMMC-7221、NCI-H446细胞为部分甲基化,hn-MSP检测p15基因甲基化敏感性可达到1×10-5。正常人单个核细胞、HL-60、HeLa、HepG2、293、SGC7901、U266、CEM细胞则为p15非甲基化,而K562、NB4、GMC、Jurkat似乎显现p15基因缺失或突变。结论:p15基因甲基化或缺失在多种肿瘤,特别在恶性血液病中有较高的发生率,且对疾病的进展及预后有密切的关系,hn-MSP具有较高的敏感性和特异性,值得在临床推广应用。
- 林福安叶宝国沈建箴周华蓉傅海英范丽萍
- 关键词：P15INK4B基因甲基化基因缺失
- 半巢式甲基化特异性PCR在急性淋巴细胞白血病患者p15基因甲基化检测中的应用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨半巢式甲基化特异性PCR（hn—MSP）的特性并了解p15基因甲基化和缺失在急性淋巴细胞白血病（ALL）发病中可能起到的作用。方法运用hn—MSP方法和基因组硫化修饰PCR（BSP）后直接测序方法，分析在25例初诊或复发不同阶段ALL患者以及部分恶性血液病细胞株中p15基因的甲基化和缺失状态，以10名健康者或非恶性血液病患者为对照组。以Molt-4细胞株为阳性对照，以对照组单个核细胞为阴性对照，分析hn-MSP方法的敏感性和特异性。结果hn-MSP产物克隆测序结果与BSP结果一致，hn—MSP检测p15基因甲基化敏感性可达到1×10-5。25例ALL患者p15基因甲基化发生率为68．0％（17例）；25例ALL患者中3例p15基因外显子1缺失。对照组p15基因无甲基化或缺失。结论p15基因甲基化状态在ALL患者中有较高的检出率，hn—MSP对分析p15基因甲基化状态具有较高的特异性和敏感性。
- 林福安叶宝国沈建箴林聪猛范丽萍周华蓉傅海英
- 关键词：甲基化基因缺失MOLT-4细胞株
- 雷公藤内酯醇对急性淋巴细胞白血病Molt4细胞系p15基因表达的影响
- 目的:探讨雷公藤内酯醇(triptolide)对Molt4细胞系p15基因表达的影响,研究雷公藤内酯醇诱导p15抑癌基因去甲基化恢复表达其可能机制。方法:采用甲基敏感的限制性内切酶PCR法检测不同剂量雷公藤内酯醇作用不同...
- 沈建箴傅海英沈松菲郑瑞玑
- 文献传递
- 应重视血液病侵袭性真菌感染的诊治被引量：21
- 2005年
- 沈建箴傅海英
- 关键词：血液病侵袭性真菌感染皮肤疾病免疫抑制剂
- 以顽固性鼻部感染为首发症状的移植后早期EB病毒相关噬血细胞综合征
- 目的 探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后早期EB病毒(EBV)感染的监测、免疫反应特点、临床表现和治疗预后。材料和方法 回顾性分析2013年2月至2014年12月在我院行allo-HSCT并连续监测血浆EB...
- 杨婷元小红任金华陈萍傅海英林巧贤陈志哲胡建达
- 雷公藤内酯醇对急性淋巴细胞白血病Molt4细胞系p15基因表达的影响被引量：19
- 2005年
- 傅海英沈建箴
- 关键词：雷公藤内酯醇急性淋巴细胞白血病TRIPTOLIDE基因表达P15细胞周期素D
- 巢式MSP检测砷剂诱导人多发性骨髓瘤U266细胞系p16基因去甲基化及转录被引量：10
- 2007年
- 本研究探讨用高灵敏度的DNA甲基化检测方法及DNA克隆测序分析法检测三氧化二砷(As2O3)的去甲基化作用,并对其可能的去甲基化作用机制进行分析。采用巢式甲基特异性PCR法(nested-methylation specificPCR,n-MSP)、DNA克隆测序分析法检测As2O3作用前后U266细胞株p16基因甲基化状态,应用RT-PCR检测p16、DNA甲基转移酶1(DNMT1)、DNMT3A、DNMT3B基因mRNA的表达,以生长曲线、MTT法、集落形成实验检测As2O3对骨髓瘤细胞生长和增殖的抑制作用。利用流式细胞仪DNA含量分析法探讨As2O3对多发性骨髓瘤细胞系U266周期的影响。结果表明:①未处理组U266细胞基因组DNA的胞嘧啶保持不变,而经As2O3作用的U266细胞基因组DNA的胞嘧啶均已变为胸腺嘧啶,这说明U266细胞存在p16基因甲基化,As2O3作用后p16基因异常甲基化的现象被逆转;②未处理组细胞p16基因不表达,As2O3作用72小时后p16基因表达增强,0.5μmol/L组、1.0μmol/组和2.0μmol/组p16基因表达阳性条带灰度值与β-肌动蛋白比值分别为(0.22±0.10)、(0.59±0.11)、(0.68±0.09),阳性对照灰度比值为(0.77±0.13),差异有非常显著的统计学意义(P<0.01);③与未处理组相比,As2O3作用72小时后甲基转移酶(DNMT)1、DNMT3A、DNMT3B的表达下降并呈浓度依赖性;④与对照组相比,3组不同浓度As2O3均能明显抑制骨髓瘤细胞生长,G0-G1期细胞增加。结论:As2O3可能通过抑制甲基转移酶(DNMT1)、DNMT3A、DNMT3B和(或)直接对p16基因去甲基化,使p16基因表达上调,恢复其活性,从而实现其对细胞周期的调控功能,将细胞阻滞于G0-G1期,抑制骨髓瘤细胞的增长。
- 傅海英沈建箴沈松菲周华蓉
- 关键词：三氧化二砷多发性骨髓瘤U266细胞甲基转移酶
