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绵羊Gfrα1基因的部分cDNA克隆与抗原表位多肽的原核表达: 2012年; 旨在克隆绵羊Gfrα1基因序列,深入研究绵羊精原干细胞(SSCs)。本研究通过RT-PCR扩增和分子克隆的方法克隆到了绵羊Gfrα1基因的编码区大部分片段。结果,克隆得到的绵羊Gfrα1基因的大部分cDNA序列长1 312bp,包括1 311bp的开放阅读框(ORF),编码437个氨基酸,与牛、人、黑猩猩、大鼠和小鼠相应核苷酸序列的同源性分别为98.5%、91.3%、91.0%、88.9%和88.0%。根据获得的cDNA序列,预测已知片段的抗原表位区,并将抗原表位区序列插入pET-44a(+)载体,经转化得到重组菌,经IPTG诱导表达,并通过亲和柱层析,纯化制备GFRα1抗原表位多肽。Western blot检测发现,经诱导表达的GFRα1抗原表位多肽约为18.2ku,与预测的大小一致。绵羊Gfrα1基因的克隆和表达研究,为进一步制作该基因的多克隆抗体奠定基础,为绵羊SSCs的分子水平鉴定及功能分析提供了研究条件。; 刘燕罗奋华包佳婧刘林洪单飞彪吴应积; 关键词：绵羊克隆原核表达

皇甫川流域植物优势种间关系数量分析被引量：2: 2008年; 运用X2检验和Pearson相关系数和Spearm an秩相关系数检验分析了皇甫川流域植物群落中20个优势种的种间关系.结果表明:X2检验中31个种对为正关联,27个种对为负关联(p<0.05或p<0.01,下同),Pearson相关系数有16个种对为正相关,13个种对为负相关;Spearm an秩相关系数有36个种对呈正相关,27个种对呈负相关.分析表明优势种间具有一定的联结性,但存在相当独立的分布格局.根据测定结果将20种植物分为3个生态种组.; 张艳丽贾志斌刘燕; 关键词：皇甫川流域优势种种间联结

绵羊精原细胞Gfrα1基因的克隆与原核表达载体的构建: 本文研究结果表明，克隆的绵羊Gfral的序列与牛、人、小鼠、大鼠Gfral序列有很高的同源性。克隆绵羊Gfral基因编码区的全序列，制备Gfral基因的抗原蛋白并诱导产生多克隆抗体，从而对体培养体系中的绵羊精原干细胞进行...; 刘燕罗奋华吴应积; 关键词：绵羊精原细胞基因克隆原核表达载体; 文献传递

大鼠睾丸曲细精管组织支持细胞/生殖细胞长期共培养与精子发生分析被引量：3: 2012年; 睾丸体外生殖模型的发展为体外研究睾丸的精子发生分子机制和睾丸毒理学提供了实验工具。很多报道的模型都无法真正地模拟体内复杂的生化分子及功能性相互作用从而导致研究价值有限。该实验拟建立一个体外长期维持睾丸生殖细胞存在,并能持续产生精子细胞的支持细胞/生殖细胞共培养体系。体系中的支持细胞和生殖细胞均由曲细精管组织块迁移到培养皿上,在不添加任何生长因子的情况下维持体外精子发生至圆形精子细胞超过2个月。RT-PCR分析显示,共培养细胞稳定表达cdh1、scp3、tnp2;免疫荧光染色结果显示,CDH1、PLZF、SCP3以及SOX9阳性细胞存在。这些结果例证了体系中同时存在精原干细胞、精母细胞、精子细胞和支持细胞。简单高效的支持细胞/生殖细胞体外共培养体系可用于雄性生殖的分子机制和毒理学研究。; 刘林洪史小芳罗奋华于泊洋张岩刘燕吴应积; 关键词：睾丸生殖细胞

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刘燕