公共文化服务平台

张岩: 作品数：12 被引量：32H指数：4; 供职机构：内蒙古医科大学更多>>; 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金教育部“春晖计划”国家教育部博士点基金更多>>; 相关领域：生物学医药卫生更多>>

合作作者

大鼠精原干细胞的高效分离和纯化方法被引量：6: 2011年; 精原干细胞是精子发生的基础，是永久分化成精子的克隆源，它既可以自我更新维持体内干细胞的数量，又可以增殖分化形成各阶段的生精细胞直至成熟精子。本文以22～25日龄Wistar．Iamichi大鼠为研究对象，利用两步酶消化法分离得到睾丸曲细精管细胞悬液，根据精原干细胞与曲细精管细胞悬液中体细胞（支持细胞及少量的管周细胞）及各级分化的生精细胞贴壁能力及对细胞外基质粘附力的不同，将大鼠精原干细胞进行纯化。经纯化后，5只大鼠的睾丸可以得到约3×10’个精原干细胞，该精原干细胞在体外培养可形成克隆，并且该克隆可表达精原干细胞特异的标记基因GFRal和CDHl。本文所介绍的高效分离和纯化大鼠精原干细胞的方法，操作简便，且得到的精原干细胞具有很高的活力和增殖能力，该方法为今后大鼠精原干细胞的长期培养及操作研究奠定了基础。; 张岩罗奋华刘林洪萨初拉于泊洋吴应积; 关键词：精原干细胞

制备精原干细胞滋养层细胞条件的优化被引量：5: 2012年; 目的:优化精原干细胞培养滋养层细胞的制备条件。方法:首先根据文献资料报道和实践经验确定丝裂霉素C作用STO细胞的浓度范围和时间范围,利用双因素优选法缩短丝裂霉素C处理STO细胞的试验范围。然后采用MTT检测法确定丝裂霉素C处理STO细胞的最佳浓度和时间。结果:滋养层细胞处理后不经过冷冻保存的情况下,17.64μg/ml 2 h处理条件的STO细胞在培养14天内细胞数量基本保持稳定,其它处理条件的细胞数量均有所增加;经冷冻保存的情况下,14.72μg/ml 2 h处理条件的STO细胞在培养14天内细胞数量基本保持稳定,其它处理条件的细胞数目均有所降低。结论:滋养层细胞处理后不经过冷冻保存的情况下,17.64μg/ml 2 h的处理条件是丝裂霉素C处理STO细胞的最佳条件;经冷冻保存的情况下,14.72μg/ml 2 h的处理条件是丝裂霉素C处理STO细胞的最佳条件。; 刘海超张岩于泊洋吴应积; 关键词：精原干细胞滋养层丝裂霉素C MTT法

绒山羊Scp3基因的克隆及睾丸中第一轮减数分裂的发生被引量：5: 2009年; 联会复合体蛋白3(synaptonemal complex protein 3,Scp3)是雄性生殖细胞减数分裂中联会复合体形成必需的组成部分,在哺乳动物生殖细胞减数分裂中具有重要功能。通过RT-PCR扩增和分子克隆的方法首次克隆到了绒山羊Scp3基因的编码区片段。测序结果表明,绒山羊与牛的Scp3基因编码序列同源率达到98%。根据测得的DNA序列,设计引物,用RT-PCR方法分析测定了青春前期绒山羊不同个体中睾丸组织的Scp3的转录表达。结果显示,雄性绒山羊青春前期睾丸发育存在个体差异,已分析的样品第一轮减数分裂发生的时间普遍为73天之后。这一结果为绒山羊的睾丸发育和精子发生过程的相关研究打下了基础。; 侯越吴应积罗奋华苏慧敏张学明张岩白音巴图刘陶迪; 关键词：绒山羊克隆睾丸发育减数分裂

精原干细胞来源的多能干细胞的形成及其应用被引量：2: 2011年; 报道证实成体细胞可被重编程去分化为多能干细胞,即诱导多能干细胞(iPS细胞),然而这些去分化过程大多伴随着反转录病毒携带外源基因进入细胞内,而且有的外源基因是致癌基因。因此,目前来看,这些由成体细胞衍生的iPS细胞还不能在临床上用来治疗人类的疾病。另一些最近发表在权威期刊的文章再次受到人们的关注,这些文章显示,小鼠和人睾丸中的精原干细胞(SSCs)可被诱导为多能干细胞。这个转变过程不需要外源基因的介入,也不需要反转录病毒的介导,用于自体器官移植也没有伦理学上的问题。这个发现可能会催生从细胞水平上诱导自体或同源的器官再生来治疗人来各种疾病的方法。本文从SSCs出发,论述了SSCs的各种分离、纯化和培养方法,以及体外培养的SSCs向多能干细胞转变的方法,并介绍了该多能干细胞在再生医学和遗传医学中的应用潜能。; 张岩吴应积; 关键词：精原干细胞多能干细胞

微滴培养技术的新应用被引量：3: 2011年; 微滴培养技术在卵母细胞培养和胚胎早期发育研究中有广泛的应用。近期研究发现这项技术又有新的应用范围。有科学家发现将该技术应用于胚胎干细胞可以实现高效传代,在精原干细胞培养和精子发生相关过程的研究方面也可取得很好效果,同时,对早期人类胚胎干细胞的分离过程的监控和对精原干细胞生长过程的观察也相对容易。这些研究结果显示,微滴培养技术在这些新领域的研究与常规培养方法相比具有独特的优势。回顾微滴培养技术的主要发展过程,重点探讨微滴培养技术的最新应用及其优点。; 霍龙张岩吴应积; 关键词：体外培养胚胎干细胞精原干细胞

检测生精过程中减数分裂完成的质粒载体的构建被引量：1: 2012年; 旨在构建在所有转染细胞中表达绿色荧光、在核分裂的次级精母细胞、圆形精子细胞及长形精子细胞中表达红色荧光蛋白的cmv-eGFP-Gsg2-DsRed载体。重组载体是以本实验室保存CMV-EGFP-pDsRed质粒载体为基础载体,在其多克隆位点插入Gsg2启动子,期待可以启动红色荧光蛋白基因的表达。经大鼠睾丸共培养细胞转染试验证实,成功构建了含有Gsg2启动子的表达双荧光蛋白质粒载体。; 于泊洋罗奋华张岩吴应积; 关键词：小鼠精子发生

双酚A对成年雄性小鼠的生殖毒性及其作用机制被引量：4: 2016年; 目的:探讨双酚A(BPA)对成年小鼠睾丸组织的损伤作用,阐明BPA对动物机体的生殖毒性及其作用机制。方法:8周龄昆明小鼠40只随机分为对照组(玉米油)和低(100 mg·kg^(-1) BPA)、中(200mg·kg^(-1)BPA)、高(400mg·kg^(-1)BPA)剂量BPA组。灌胃染毒4周后,取小鼠睾丸组织,采用流式细胞术检测小鼠睾丸组织中细胞凋亡率;免疫组织化学法检测Fas和FADD蛋白表达情况。结果:与对照组比较,低剂量BPA组小鼠睾丸组织中细胞凋亡率、Fas和FADD阳性细胞表达率无明显变化(P>0.05);中和高剂量BPA组小鼠睾丸组织中细胞凋亡率、Fas和FADD阳性细胞表达率明显升高(P<0.05)。与低剂量BPA组比较,中和高剂量BPA组小鼠睾丸组织中细胞凋亡率、FAS和FADD阳性细胞表达率明显升高(P<0.05);与中剂量BPA组比较,高剂量BPA组小鼠睾丸组织中细胞凋亡率、FAS和FADD阳性细胞表达率明显升高(P<0.05)。中剂量BPA组细胞凋亡率与FAS、FADD阳性细胞表达率呈正相关关系(r=0.430,P<0.05;r=0.238,P<0.01),高剂量组细胞凋亡率与Fas、FADD阳性细胞表达率呈正相关关系(r=0.637,P<0.01;r=0.359,P<0.01)。结论:一定剂量BPA会导致小鼠睾丸组织中细胞凋亡率升高,凋亡调控基因Fas和FADD表达上调;BPA对小鼠睾丸组织有损伤作用,其生殖毒性与激活Fas死亡受体信号通路从而导致细胞过度凋亡有关。; 郝兴霞张东泽于泊洋张岩周圆圆邱雪迎周好乐刘陶迪; 关键词：双酚A FAS蛋白细胞凋亡

大鼠曲细精管生殖细胞体外共培养和精子发生过程的观察被引量：9: 2007年; 目的建立体外长期共培养体系和观察方法,为精子发生过程的研究提供细胞模型。方法采用大鼠曲细精管生殖细胞及支持细胞共培养的方法,对睾丸生精细胞作显微镜观察。结果共培养的支持细胞和生精细胞在体外存活超过6个月。在共培养期间,观察到精母细胞、圆形精子细胞和长形精子细胞。结论在不添加任何细胞因子和生长因子的情况下,大鼠曲细精管生殖细胞长期增生分化,不断产生精子细胞。这一结果暗示组织块和共生的支持细胞可为生殖细胞的增生和分化提供必需的细胞因子。该方法为体外研究精子发生过程提供了实验依据。; 张岩罗奋华吴应积; 关键词：生殖细胞共同培养技术精子发生

绒山羊Sertoli细胞的长期培养及分析: Sertoli细胞从生精上皮基底膜延伸至管腔,是曲细精管中发现的极其重要的体细胞.近年来体内和体外研究显示,Sertoli细胞充当抚育细胞,在精子发生阶段为发育中的生精细胞提供营养.Sertoli细胞为精原干细胞(spe...; 苏慧敏罗奋华包佳婧萨初拉张学明张岩多曙光吴应积; 关键词：绒山羊睾丸 SERTOLI细胞

大鼠精原干细胞的微滴培养法被引量：2: 2014年; 精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)作为成体干细胞的一类,既具有自我更新和分化的潜能,又可向子代传递遗传信息。阐明其增殖过程及分化特性对SSCs的进一步应用具有重要意义。小鼠SSCs的微滴培养研究显示,微滴培养技术与常规培养方法相比具有独特的优势。然而其他物种的SSCs能否实现微滴培养尚有待证实。该研究旨在利用微滴培养法建立大鼠SSCs体外培养技术。5、8、10、20、40个大鼠SSCs分别置于20μL微滴中培养,用丝裂霉素处理的STO细胞作为滋养层。倒置显微镜观察记录大鼠SSCs的增殖状态。一个月后,对微滴培养的SSCs进行免疫荧光双标记染色鉴定。结果显示,一个微滴内接种5个SSCs就能实现扩增培养;培养一个月后,SSC仍然表达其特异的标记基因分子如CDH1、OCT4、PLZF、Thy1和Gfra1。体外诱导分析显示,微滴培养的大鼠SSCs具有分化为精母细胞的能力。大鼠SSCs微滴培养法的建立,为其他物种SSCs的培养提供了借鉴,也为再生医学和生命科学相关领域的研究提供了技术平台。; 霍龙罗奋华张岩全祺玮吴应积; 关键词：精原干细胞免疫荧光染色体外分化

张岩

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

张岩

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈