周文广
- 作品数：8 被引量：32H指数：4
- 供职机构：广西大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 克雷伯氏菌1,3-丙二醇氧化还原酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达被引量：8
- 2004年
- 以基因组DNA为模板,利用PCR技术从克雷伯氏菌(Klebsiellapneumoniae)中扩增得到含有1,3丙二醇氧化还原酶基因(dhaT)的DNA片段,将其定向连接到克隆质粒pGEM-3zf上,得到重组质粒pGEMdhaT。将此重组质粒转化到受体菌EscherichiacoliDH5α中,通过蓝白斑鉴定挑选出阳性菌株。DNA序列分析表明其基因全长为1185bp。将该片段插入表达载体pSE380,构建成重组子pSE-dhaT,并在E.coliJM109中获得表达,经SDS-PAGE检测,表达产物分子质量与天然纯1,3丙二醇氧化还原酶(DHAT)相同,约为43ku。
- 周文广黄日波
- 关键词：克雷伯氏菌1,3-丙二醇氧化还原酶大肠杆菌克隆
- 构建基因工程菌生产1,3-丙二醇的研究进展被引量：4
- 2003年
- 综述了近几年基因工程菌生产 1 ,3 PD的研究成果 ,包括其关键酶、策略及基因工程菌生产 1 ,3 PD的现状等 ,探讨了利用基因工程菌生产 1 ,3
- 周文广黄日波
- 关键词：1,3-丙二醇基因工程菌银环氧乙烷一氧化碳
- 从甘油富集菌宏基因组中克隆甘油脱水酶基因被引量：4
- 2006年
- 采用一种简便快速的方法从经甘油富集培养的土样中提取出质量较好宏基因组DNA。然后以此DNA为模板,以扩增肺炎克雷伯氏菌、弗氏柠檬酸菌和丁酸梭菌甘油脱水酶基因的引物进行PCR,分别扩增出目的条带,并将其克隆至T载体中。进行测序分析显示,PCR扩增出来的片段与其引物相应的甘油脱水酶序列同源性分别达到99%,90%和99%。这表明克隆出来的这3个基因为相应的甘油脱水酶基因。
- 吴杰群周文广杨登峰齐向辉韦宇拓黄日波
- 关键词：宏基因组甘油脱水酶基因克隆
- 克雷伯氏菌甘油脱水酶基因和1,3—丙二醇氧化还原酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
- 1,β—丙二醇是一种重要的化工原料,可用作溶剂、抗冻剂或保护剂、精细化工原料以及新型聚酯—聚埘苯二甲酸丙二醇酯(PTT)和聚氨酯的单体。PTT是一种新型聚酯材料,具有优异的回弹性、染色性、抗污性、较好的抗紫外变色性能等特...
- 周文广韦宇拓黄鲲黄日波
- 关键词：甘油脱水酶大肠杆菌
- 文献传递
- 克雷伯氏菌甘油脱水酶和1，3-丙二醇氧化还原酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
- 1,3-丙二醇是一种重要的化工原料,可用作溶剂、抗冻剂或保护剂、精细化工原料以及新型聚酯-聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)和聚氨酯的单体.PTT是一种新型聚酯材料,具有优异的回弹性、染色性、抗污性、较好的抗紫外变色性能等特...
- 周文广
- 关键词：1,3-丙二醇甘油脱水酶1,3-丙二醇氧化还原酶克隆大肠杆菌
- 文献传递
- 克雷伯氏菌甘油脱水酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达被引量：14
- 2004年
- 利用PCR技术从克雷伯氏菌 (KlebsiellapneumoniaeATCC4 9790 )总DNA中扩增得到甘油脱水酶 (glyceroldehydratase ,DHAB)基因的DNA片段 ,并将其连接到表达质粒 pSE380 ,携带有重组质粒 pSE dhaB的大肠杆菌JM 1 0 9实现了dhaB基因的表达 ;对含有dhaB工程菌进行表达研究 ,表明工程菌在 37℃ ,以 1 .0mmol LIPTG诱导 5h酶活力即达到 1 1 6 4.1 4U L ,比野生菌酶活力 (1 6 8.6 9U L)提高了 6 .9倍。
- 周文广韦宇拓黄鲲陈发忠黄日波
- 关键词：克雷伯氏菌甘油脱水酶大肠杆菌克隆质粒
- 产1,3-丙二醇基因工程菌发酵条件的研究被引量：3
- 2006年
- 利用途径工程的方法,将来源于克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)的甘油脱水酶基因dhaB和1,3-丙二醇氧化还原酶基因dhaT构建成多顺反子重组质粒pSE-dhaB-dhaT并在大肠杆菌JM 109中进行表达,在大肠杆菌中构建一条新的产1,3-丙二醇代谢途径。研究表明,重组菌株JM 109/pSE-dhaB-dhaT在微好氧条件下,尝试用廉价的乳糖为诱导物、维生素B12为辅酶,可以将甘油转化为1,3-丙二醇,产量达15.34 g/L,甘油转化率为35.7%,对低成本生产1,3-丙二醇作了有益的探索。
- 韦旭钦陈发忠罗兆飞韦宇拓周文广黄日波
- 关键词：1,3-丙二醇重组菌发酵条件
