孙小杰
- 作品数：8 被引量：17H指数：3
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人子宫内膜癌中p57^(kip2)、Cyclin D1的表达及意义被引量：4
- 2014年
- 目的探讨p57kip2、Cyclin D1在人子宫内膜癌发生、发展中的作用。方法选取子宫内膜样腺癌(endometrioid adenocarcinoma,EA)100例、子宫内膜上皮内瘤变(endometrial intraepithelial neoplasia,EIN)20例、子宫内膜增生性病变20例、增生期子宫内膜组织20例;选取不同子宫内膜细胞[高分化子宫内膜癌细胞(Ishikawa)、中分化子宫内膜癌细胞(JEC)、低分化子宫内膜癌细胞(KLE)及正常子宫内膜细胞(ESC)]进行细胞培养。应用免疫组化EliVision法检测不同子宫内膜组织中p57kip2、Cyclin D1蛋白的表达;Western blot法检测不同子宫内膜细胞中p57kip2、Cyclin D1蛋白的表达。结果 p57kip2蛋白在EIN组织中表达最高,在增生期子宫内膜、EA、子宫内膜增生性病变组织中表达逐渐降低,子宫内膜增生性病变与EIN组织中p57kip2蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。Cyclin D1蛋白在EA组织中表达最高,在增生期子宫内膜组织中表达最低,在子宫内膜增生性病变组织、EIN组织中表达依次增高,差异均有显著性(P<0.01)。p57kip2、Cyclin D1蛋白在EA组织中的表达随着组织学分级的增高呈依次递减趋势,但仅p57kip2蛋白表达和组织学分级有关(P<0.05)。p57kip2蛋白在KLE中表达最高,在ESC中表达最低,两组相比差异有显著性(P<0.05);Cyclin D1在JEC、Ishikawa中的表达高于ESC,差异均有显著性(P<0.05)。结论 p57kip2、Cyclin D1均参与子宫内膜癌的发生、发展。Cyclin D1表达是子宫内膜癌发生的早期事件,可能还存在异常合成的p57kip2蛋白,其协同Cyclin D1促进子宫内膜的恶性转化。联合检测p57kip2、Cyclin D1在子宫内膜癌中的表达,对预测子宫内膜癌患者预后有一定的临床意义。
- 格桑志玛周正平罗祖强肖庆邦孙小杰
- 关键词：子宫内膜癌子宫内膜样腺癌P57^KIP2CYCLIN
- ER拮抗剂对人子宫内膜样癌JEC细胞中ERα、ERβ、p57^(kip2)表达的影响被引量：3
- 2018年
- 目的探讨雌激素受体(estrogen receptor,ER)拮抗剂对人子宫内膜样癌(endometrioid carcinoma,EC)JEC细胞(中分化)中ER亚型ERα、ERβ及p57^(kip2)表达的影响。方法分别用两种ER拮抗剂[他莫昔芬(Tamoxifen,TAM)(10^(-6)mol/L)、氟维司群(Faslodex,ICI182780)(10^(-6)mol/L)]及雌二醇(β-Estradiol,E_2)(10^(-6)mol/L)干扰JEC细胞,体外培养24、48、72 h后,MTT法观察JEC细胞的生长曲线;光镜与电镜观察JEC细胞的形态变化;Western blot法检测JEC细胞中ERα、ERβ及p57^(kip2)蛋白表达的变化。结果 MTT结果显示,与对照组JEC细胞比较,E_2可明显促进JEC细胞增殖,ICI182780则明显抑制JEC细胞的增殖(P<0.05);与E_2组比较,E_2+ICI182780组JEC细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。形态学改变:与对照组比较,E_2组细胞密度增大较明显,病理性核分裂象易见,ICI182780组细胞密度减小较明显;与E_2组比较,E_2+TAM组与E_2+ICI182780组细胞密度均有所减小,核分裂象不易见。Western blot结果显示:与对照组比较,E_2组ERβ蛋白表达增高,p57^(kip2)蛋白表达降低(P<0.05);ICI182780组与TAM组ERβ蛋白表达均降低,p57^(kip2)蛋白表达均增高,但仅ICI182780组差异有统计学意义(P<0.05)。与E_2组比较,E_2+ICI182780组与E_2+TAM组ERβ蛋白表达均降低,p57^(kip2)蛋白表达均增高,但仅E_2+ICI182780组差异有统计学意义(P<0.05)。实验各组及对照组JEC细胞中均无ERα蛋白表达。结论 JEC细胞不表达ERα蛋白。ICI182780有较强的拮抗雌激素的作用,可能通过下调JEC细胞中ERβ蛋白表达,诱导p57^(kip2)蛋白的表达,发挥其阻滞细胞周期进程的作用,从而抑制肿瘤细胞生长;TAM则对JEC细胞生长有较弱的雌激素样作用。联合检测ERα、ERβ、p57^(kip2)蛋白在EC中的表达,对EC患者内分泌治疗的个体化选择有重要的参考价值。
- 刘蒙蒙袁丹袁丹孙小杰孙小杰
- 关键词：雌激素受体拮抗剂ERΑERΒP57KIP2
- 雌激素对人子宫内膜样癌Ishikawa细胞中p57^(kip2)、Cyclin D1、CDK4表达及形态变化影响的研究被引量：3
- 2018年
- 目的:研究雌激素对人子宫内膜样癌(EC)Ishikawa细胞(高分化)中p57^(kip2)、Cyclin D1、CDK4表达及形态变化的影响。方法:分别采用含3种不同浓度雌二醇(E_2)(10^(-6)、10^(-8)、10^(-10)mol/L)的培养基培养Ishikawa细胞24、48、72h,MTT检测细胞增殖情况,光镜和电镜观察细胞形态变化,Western blot法检测p57^(kip2)、Cyclin D1、CDK4蛋白表达。结果:MTT结果显示,与对照组比较,低、中浓度E_2组Ishikawa细胞增殖明显(P<0.05),高浓度E_2组细胞增殖不明显(P>0.05)。光镜及电镜结果显示,与对照组比较,低、中浓度E2组Ishikawa细胞密度增加,部分细胞内线粒体、内质网轻微肿胀,随着作用时间延长,其肿胀程度增加;高浓度E_2组Ishikawa细胞密度减少,较多细胞内线粒体明显肿胀,可见细胞凋亡现象,随着作用时间延长,线粒体、内质网弥漫肿胀、空泡化,细胞凋亡增多。Western blot法结果显示,随着E_2作用时间延长及浓度增加,p57^(kip2)、Cyclin D1与CDK4蛋白表达均逐渐增加(P<0.05),其中p57^(kip2)、Cyclin D1、CDK4蛋白均在高浓度E_2组表达最高,而p57^(kip2)蛋白在低浓度E_2组表达最低,Cyclin D1与CDK4蛋白在对照组表达最低。Cyclin D1和CDK4蛋白表达呈正相关(P<0.05)。结论:E_2浓度较低时可能以上调Cyclin D1与CDK4蛋白表达为主,发挥正向调控细胞周期进程的作用,促进Ishikawa细胞增殖;E_2浓度较高时可能以上调p57^(kip2)蛋白表达为主,从而抑制Ishikawa细胞增殖,还可导致较强细胞损伤。
- 袁丹刘蒙蒙周正平刘俊江孙小杰
- 关键词：ISHIKAWA细胞雌激素P57KIP2
- 雌、孕激素对人子宫内膜癌JEC细胞中P57kip2、CyclinE表达影响的研究
- 目的： 了解雌、孕激素对人子宫内膜癌（endometrial carcinoma, EC）JEC细胞体外增殖及细胞周期分布的作用，并探讨雌、孕激素对JEC细胞中p57kip2、Cyclin E表达的影响，为进一步研究E...
- 孙小杰
- 关键词：子宫内膜癌雌二醇孕酮
- 孕激素对人子宫内膜样癌JEC细胞中p57^(kip2)和Cyclin E表达的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨孕激素对体外培养的人子宫内膜样癌(endometrioid carcinoma,EC)JEC细胞中p57^(kip2)、Cyclin E表达的影响。方法分别采用高、中、低三种浓度(1×10^(-4)、1×10^(-6)、1×10^(-8) mol/L)的孕酮(progesterone,P)处理体外培养的JEC细胞,以未加药JEC细胞作为对照组,作用24、48、72 h后,分别采用光学显微镜和电子显微镜观察JEC细胞的形态变化,MTT法检测JEC细胞的生长情况,Western blot法检测JEC细胞中p57^(kip2)、Cyclin E蛋白的表达。结果 MTT法、光学显微镜、电子显微镜结果显示,中、低浓度P可促进JEC细胞的生长(P<0.05),高浓度P则抑制JEC细胞的生长(P<0.05);Western blot结果显示,P作用于JEC细胞后:(1)作用48、72 h时,随着P浓度的增加,p57^(kip2)蛋白的表达逐渐增高(P>0.05),Cyclin E蛋白的表达则逐渐降低(P<0.05);(2)同一浓度时,随着P作用时间的延长,p57^(kip2)蛋白在高、中、低浓度组中的表达均呈递增趋势(P<0.05),Cyclin E蛋白在中、高浓度组的表达均呈递减趋势(P<0.05);p57^(kip2)和Cyclin E蛋白的表达呈负线性相关关系(P<0.05)。结论在EC的发生发展中,孕酮对p57^(kip2)、Cyclin E蛋白的表达均具有一定的调控作用。
- 孙小杰格桑志玛周正平肖欣刘蒙蒙
- 关键词：子宫内膜样癌P57^KIP2CYCLIN
- 孕激素对人子宫内膜样癌JEC细胞ER亚型、PR亚型及p57^kip2表达的影响
- 2018年
- 目的研究孕激素干预治疗对人子宫内膜样癌JEC细胞中雌激素受体(estrogen receptor,ER)两种亚型、孕激素受体(progesterone receptor,PR)两种亚型及p57^(kip2)蛋白表达的影响。方法实验组:分别用3种不同浓度的孕酮(Progesterone,P)(10^(-4)mol/L、10^(-6)mol/L、10^(-8)mol/L)干预体外培养的中分化JEC细胞;对照组:用不含药物的等量培养基培养JEC细胞。分别培养24、48、72、96h后,用MTT法观察JEC细胞的生长情况;培养24、48、72h后,在光镜、电镜下观察JEC细胞的生长情况及超微结构变化,用免疫蛋白印迹(Western Blot,WB)法检测JEC细胞中ER亚型(ERα、ERβ)、PR亚型(PRA、PR-B)及p57^(kip2)蛋白的表达情况。结果光镜及MTT结果显示,P低、中浓度组可促进JEC细胞的生长,高浓度组则抑制JEC细胞的生长(P<0.05)。电镜结果显示,P各浓度组胞质内均可见自噬现象,高浓度组细胞表面微绒毛及胞质内分泌泡均增多。WB结果显示,随着药物作用浓度的增高,p57^(kip2)蛋白表达逐渐增加,ERβ蛋白在24、72h表达逐渐增加(P<0.05);随着药物作用时间的延长,p57^(kip2)蛋白在各组表达均逐渐增高,ERβ蛋白在高浓度组表达逐渐增高,在低、中浓度组则以72h表达最高,48h表达最低(P<0.05);对照组及P各组JEC细胞均无ERα、PR-A、PR-B蛋白的表达。结论孕酮可上调JEC细胞中ERβ、p57^(kip2)蛋白的表达,低浓度孕酮以ERβ蛋白促细胞生长为主,高浓度孕酮以p57^(kip2)蛋白阻滞细胞周期进程为主导。JEC细胞不表达ERα、PR-A、PR-B蛋白,且P干扰刺激后不能诱导其表达。联合检测ERα、ERβ、PR-A、PR-B、p57^(kip2)蛋白在EC中的表达,有利于评估EC的发生发展。
- 刘蒙蒙孙小杰孙小杰袁丹袁丹
- 关键词：子宫内膜样癌孕激素ERPRP57^KIP2
- 雌激素对人子宫内膜癌JEC细胞中p57^(kip2)和Cyclin E表达的影响被引量：5
- 2015年
- 目的探讨雌激素对体外培养的人子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)JEC细胞中p57^(kip2)和Cyclin E表达的影响。方法体外培养的JEC细胞分别用高、中、低三种浓度(10^(-6)、10^(-8)、10^(-10)mol/L)的雌二醇(β-Estradiol,E2)治疗处理,于作用24、48、72 h后,分别用倒置显微镜和透射电镜观察JEC细胞的形态变化,用MTT、流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞的生长情况和细胞周期分布的变化,用Western blot法检测p57^(kip2)、Cyclin E蛋白的表达。结果形态观察、MTT、FCM检测显示,在中、低浓度的E2对JEC细胞的生长有促进作用(P<0.05);E2作用72 h后,处于G0/G1期细胞明显减少,S期细胞明显增多(P<0.05)。Western blot结果显示,E2作用于JEC细胞:(1)24 h时,p57^(kip2)蛋白在中浓度组表达最低,高浓度组表达最高(P<0.05),Cyclin E蛋白在高浓度组表达最低,中浓度组表达最高(P<0.05),然而,在48 h时,随着浓度的升高,p57^(kip2)、Cyclin E蛋白的表达均逐渐增加(P<0.05),72 h亦然。(2)p57^(kip2)蛋白在中浓度组随着作用时间的延长,表达增高(P<0.05),高浓度组亦然;Cyclin E蛋白在中浓度组随着时间的延长,表达降低(P<0.05),低浓度组亦然。p57^(kip2)、Cyclin E蛋白表达之间无相关性(P>0.05)。结论 p57^(kip2)、Cyclin E蛋白在EC发生、发展中的作用均受到E2的影响。随着E2作用浓度增加、作用时间延长,JEC细胞由增殖促进状态变成增殖抑制状态,中、高浓度组p57^(kip2)蛋白表达逐渐增高;中、低浓度组则随着E2作用时间的延长,Cyclin E蛋白表达逐渐降低。
- 孙小杰格桑志玛周正平肖欣刘蒙蒙
- 关键词：子宫肿瘤子宫内膜癌P57KIP2CYCLINE
- 雌激素对人子宫内膜样癌JEC细胞中ERα、ERβ及p57^(kip2)表达的影响被引量：2
- 2016年
- 目的研究雌激素干扰人子宫内膜样癌(endometrioid carcinoma,EC)JEC细胞后雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型ERα、ERβ及p57^(kip2)在细胞中的表达变化。方法分别用含有3种不同浓度的雌二醇(β-Estradiol,E_2)(10^(-6)mol/L,10^(-8)mol/L,10^(-10)mol/L)的培养基进行JEC细胞的体外培养,用不含药物的培养基进行培养,作为对照,于培养24、48、72h后,用光镜及电镜观察E_2干扰后JEC细胞的形态改变,用MTT法检测JEC细胞的增殖情况,用Western Blot(WB)法检测JEC细胞中ERα、ERβ、p57^(kip2)蛋白的表达情况。结果形态改变及增殖情况:E_2浓度较低时可促进JEC细胞的生长(P<0.05),高浓度的E_2则抑制JEC细胞的生长,但差异无统计学意义(P﹥0.05);与对照组比较,E_2低浓度组JEC细胞微绒毛及胞质中分泌泡均有所减少,E_2高浓度组JEC细胞微绒毛及胞质中分泌泡均有所增多。WB结果显示,实验各组及对照组ERα均不表达,ERβ则弱表达;随着E_2作用浓度的增加、作用时间的延长,ERβ与p57^(kip2)蛋白的表达均呈递增趋势(P<0.05)。结论 JEC细胞中ERα表达缺失。雌激素可上调ERβ、p57^(kip2)在EC中的表达,具有时间依赖性和浓度依赖性;雌激素浓度较低时可以促进JEC细胞增殖,细胞的分化向较差的方向发展。
- 刘蒙蒙孙小杰周正平肖欣袁丹
- 关键词：雌激素ERΑERΒP57KIP2
