张燕
- 作品数：11 被引量：72H指数：5
- 供职机构：浙江省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目公益性行业(农业)科研专项浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鹅与番鸭溃疡性胃肠炎病原的分离鉴定被引量：23
- 2002年
- 从患以胃肠道出血、溃疡为主要特征的急性、败血性传染病发病死亡的鹅和番鸭病料中各分离到 1株病毒 ,DQ和DQ M。病毒分离物对鸡胚、番鸭胚、鹅胚和番鸭均具有极强的致病性。血清学实验结果表明 ,DQ和DQ
- 张存叶伟成刘蔓雯张燕
- 关键词：鹅副粘病毒溃疡性病原
- 一种重组鸭α-干扰素的制备方法
- 本发明公开了一种重组鸭α-干扰素的制备方法，属于生物制药技术领域。该方法包括：(1)鸭α-干扰素基因合成；(2)引物的设计和合成；(3)表达载体的构建；(4)工程菌的诱导表达；(5)表达产物的提取、纯化、复性；(6)生物...
- 张存叶伟成刘蔓雯张燕
- 鹅副粘病毒HZ株F蛋白基因的克隆及序列分析被引量：5
- 2005年
- 以鹅副粘病毒HZ株的基因组RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增出F基因片段,然后将其克隆到pUCm-T载体中。经转化、筛选、酶切和PCR鉴定后,初步获得含鹅副粘病毒F基因的阳性克隆,并进行序列测定验证。结果表明,该基因由1 662个核苷酸组成,共编码553个氨基酸。与GenBank下载的9株参考毒株的F基因作同源性比较,发现HZ株与ZJ1、F48E9、Lasota等毒株的核苷酸同源性分别为98.3%、85.4%、82.7%;氨基酸同源性分别为97.8%、90.6%、88.1%。说明HZ株与经典的鸡新城疫病毒(NDV)在F基因上存在很大的差异,而与近年来的分离株亲缘关系较近。
- 叶伟成张存王一成刘蔓雯徐丽华袁秀芳张燕
- 关键词：鹅副粘病毒F蛋白基因
- 一种重组猪伪狂犬病毒及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种重组猪伪狂犬病毒及其构建方法和应用，该病毒含有由猪细小病毒VP2基因、口蹄疫病毒2A基因和猪圆环病毒Cap基因依次连接构成的外源基因。该方法包括：(1)构建包含PRV全基因组的细菌人工染色体pPRV；(2...
- 张存崔尚金叶伟成陈柳余斌倪征云涛华炯钢张燕
- 文献传递
- 绍兴鸭α-干扰素基因克隆、表达及活性测定被引量：6
- 2005年
- 采用PCR法从绍兴鸭的肝组织基因组DNA中扩增出α干扰素基因,插入pUC18载体,进行序列测定及分析;将成熟α干扰素基因亚克隆到表达载体pET 28α(+)中,并转化入大肠杆菌BL21进行表达;表达产物经复性后,进行抗病毒活性的测定。测序结果表明,该基因(sxDuIFN α)由576个核苷酸组成,共编码191个氨基酸。该基因与GenBank公布的鸭α干扰素基因(X84764,AB128861)的核苷酸序列同源性分别为99.3%和99.1%,氨基酸序列同源性均为97.9%。表达载体经IPTG诱导表达出相对分子量为20.7kD的DuIFN α。该产物经细胞病变抑制法测定,显示出具有明显的抗猪水泡性口炎病毒(VSV)及鸭瘟弱毒疫苗毒的活性。
- 叶伟成张存王一成刘蔓雯徐丽华袁秀芳张燕
- 关键词：Α-干扰素基因克隆原核表达
- 一种重组猪伪狂犬病毒及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种重组猪伪狂犬病毒及其构建方法和应用，该病毒含有由猪细小病毒VP2基因、口蹄疫病毒2A基因和猪圆环病毒Cap基因依次连接构成的外源基因。该方法包括：(1)构建包含PRV全基因组的细菌人工染色体pPRV；(2...
- 张存崔尚金叶伟成陈柳余斌倪征云涛华炯钢张燕
- 辐照灭菌的效果研究被引量：5
- 2005年
- 利用60Cor射线对细菌的杀灭作用,采用不同的辐照剂量对高免卵黄液及鸭肝炎血清中大肠杆菌杀灭效果进行研究,同时测定卵黄液ND、IBD的抗体效价。结果显示:辐照剂量在3KGY时即可完全杀灭卵黄液及鸭肝炎血清中的大肠杆菌,对卵黄液抗体效价则无明显影响,但最高辐照剂量不能超过12KGY。
- 刘蔓雯张存叶伟成韦强熊立东张燕
- 关键词：高免卵黄液大肠杆菌辐照灭菌
- 猪α干扰素在毕赤酵母中的高效表达和纯化被引量：6
- 2010年
- 为了研制新型的猪用抗病毒制剂,开展了猪α干扰素(PoIFNα)在毕赤酵母中的表达和产物纯化研究。将PCR扩增的PoIFNα基因插入pPIC9k的SnaBⅠ和EcoRⅠ位点,构建了表达转移载体pPIC9k/PoIFNα;经酶切和测序鉴定,转移载体构建正确。pPIC9k/PoIFNα以限制性内切酶SalⅠ线性化后电转化毕赤酵母GS115菌株,经抗性筛选获得4拷贝PoIFNα基因的重组菌株GS115/PoIFNα;重组菌株经BMMY培养基诱导后上清中有目的蛋白,表达量达136mg/L。表达产物经过SP-Sepharose阳离子交换层析,可以得到纯度较高的rPoIFNα,纯化产物在MDBK细胞上抑制VSV的活性高达2.27×108U/mg。
- 张存叶伟成王一成袁秀芳刘蔓雯张燕
- 关键词：猪Α干扰素毕赤酵母分泌表达
- 鹅副粘病毒的分离和鉴定被引量：3
- 2005年
- 采集疑似鹅副粘病毒病的鹅病料,通过鸡胚接种传代分离到1株病毒(HZ株)。该分离病毒经鸡红细胞凝集(HA)试验、凝集抑制(HI)试验、电镜形态学观察等,结果表明与NDV极为相似,属禽Ⅰ型副粘病毒。经动物回归试验,结果说明分离到的副粘病毒为临床疫病病原,毒力较强,能使15日龄的鹅、鸡、番鸭等禽类感染发病,发病率与死亡率均为100%。
- 叶伟成张存刘蔓雯徐丽华袁秀芳张燕
- 关键词：副粘病毒
- 鸭坦布苏病毒一步法RT-PCR检测方法的建立和应用被引量：24
- 2012年
- 鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)是一种新发现可引起鸭产蛋下降的新型黄病毒,建立一种病原学检测方法对于疫病的诊断和流行病学研究具有重要意义。在对DTMUV序列的比对分析的基础上,设计了1对特异性引物,通过优化PCR反应条件,建立了DTMUV的一步法RT-PCR检测方法。该方法具有特异、快速、敏感、准确等特点,可以检出1.82个TCID50的病毒核酸。对2010年至2011年6月份前的106份产蛋下降鸭群临床病料进行了检测,结果显示样品阳性率为46.2%,表明DTMUV在浙江及其周边省份的产蛋鸭群具有较高的感染率。
- 张帅云涛叶伟成邓晓辉崔言顺华炯钢张存张燕
- 关键词：一步法RT-PCR
