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水稻基因APRT的克隆及其与温敏核雄性不育的关系(英文)被引量：4: 2003年; 在拟南芥中腺嘌呤磷酸核糖转移酶基因(APRT)突变导致植株雄性不育。本文首次报道从水稻(Oryza sa-tiva subsp.indica)中克隆了基因APRT(GenBank登录号AY238894),并将其定位于水稻第4染色体的一个BAC克隆(AL606604)的58000 bp至63 000 bp 区域。该基因长4 220 bp(起始密码子至终止密码子),含7个外显子、6个内含子,编码的APRT蛋白长212个氨基酸残基,与其他物种来源的APRT序列存在很高的同源性。与大麦、小麦、拟南芥1型及其2型的该蛋白同源性分别为54.9％、54.9％、49.6％和59.5％。经保守结构域搜索发现该蛋白中存在APRT催化结构域。从DNA、mRNA两个水平分析了该基因与水稻温敏核雄性不育(TGMS)的关系,结果表明:受温度诱导,水稻“安农S-1”APRT基因的表达变化可能与温敏核雄性不育表现型具相关性。; 李军梁春阳杨继良邢全华杨典洱邓启云翁曼丽王斌; 关键词：水稻克隆

水稻不育系安农S-1育性转换及相关基因的表达分析被引量：6: 2004年; 通过在自然环境和高温温室内对安农S 1的不同部位进行高温、低温诱导处理 ,对水稻温敏核不育系安农S 1的温度敏感时期和诱导部位进行了研究。总共进行了 8种处理 ,结果表明 :安农S 1的育性转换时期是从花粉母细胞形成到减数分裂的四分体时期之前。在育性转换时期 ,处于高温的条件下 ,根部低温处理不能诱导安农S 1可育 ,穗部低温处理可以使安农S 1保持可育 ,可见安农S 1的温度敏感部位在幼穗。aprt基因和育性相关 ,用RT PCR方法研究了aprt基因在安农S 1不同部位和不同温度环境的表达变化 ,结果显示 ,在幼穗中aprt基因的表达在高温环境中被大幅度下调 ,而在叶中和根中的变化比较小 ,这说明幼穗对温度最敏感 ,从侧面验证了引起安农S 1育性转换的温度敏感部位是在幼穗。; 梁春阳李军束静邓启云邓启云郭宝太; 关键词：水稻安农S-1 温敏不育系

Shotgun法测序制备高纯度水稻基因组DNA的方法探讨(英文): 2003年; 在用散弹 (shotgun)法测定水稻 (OryzasativaL .ssp .indica)基因组全序列的过程中 ,叶绿体和线粒体DNA的污染问题非常严峻 .应用脉冲场电泳 (PFGE)技术对水稻基因组DNA进行纯化 ,结果表明它能够有效去除叶绿体和线粒体DNA ,使其污染率从 3%降低到 0 2 % .同时 ,比较了水稻绿苗和黄化苗的DNA得率 ,以及HB法和NIB法制备大分子质量(HMW)DNA的异同 .最后提出一套制备水稻基因组DNA的方法 ,包括黄化苗培养 ;细胞核的分离、包埋和裂解 ;脉冲场电泳纯化、回收聚集在低熔点 (LMP)胶中的水稻HMWDNA .用该方法所得的水稻基因组DNA ,纯度高 (无叶绿体和线粒体DNA污染 )、基因组完整 (机械剪切和降解少 )、回收率高 (操作过程中DNA损失少 ) .另外 ,首次报道在融化的低熔点(LMP)胶中对水稻HMWDNA于 38℃进行超声波处理 ,能够获得用于shotgun文库和梯度文库构建所需要的各种DNA片段(1 5～ 3kb ,3～ 12kb) 。; 杨继良王辉王庆华李军刘斌金德敏王斌; 关键词：测序水稻基因组DNA 纯化

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李军