- 5种方法提取弓形虫速殖子DNA的效果比较被引量：2
- 2010年
- 目的用5种方法提取弓形虫速殖子基因组DNA,比较其效果。方法分别以试剂盒法、直接裂解法、煮沸法、酚-氯仿法和盐析法提取10倍系列稀释的弓形虫速殖子DNA,通过分光光度计、琼脂糖凝胶电泳和PCR比较其效果。结果酚-氯仿法提取的DNA纯度最高,煮沸法、盐析法、直接裂解法和试剂盒法依次降低;琼脂糖凝胶电泳可检测出由直接裂解法、酚-氯仿法、盐析法提取1×106个速殖子的基因组DNA;试剂盒法、直接裂解法、煮沸法、酚-氯仿法、盐析法提取的DNA经PCR扩增可检测最少速殖子的数量依次为1×104,无目的条带,1×102,1×101,1×103个。结论酚-氯仿提取的DNA纯度高,用于PCR扩增具有较高的敏感性,但操作相对繁琐;煮沸法操作简单,与除酚-氯仿法外其他3种方法相比具有较高的敏感性。其它3种方法提取的DNA纯度不高,用于PCR扩增的效果不如前面2种。
- 沈海英王廷安周永华李冬娜申云侠诸葛洪祥
- 关键词：弓形虫速殖子DNA提取PCR电泳
- 刚地弓形虫RH株速殖子在鼠星形胶质细胞体外培养的实验观察
- 目的弓形虫感染可引起多种组织器官的病变,其中危害最为严重的是弓形虫穿越血脑屏障入侵人脑引起的弓形虫脑炎。本实验建立刚地弓形虫RH株速殖子体外感染SD大鼠脑星形胶质细胞的模型,研究自噬现象在弓形虫速殖子入侵星形胶质细胞过程...
- 李冬娜
- 关键词：星形胶质细胞弓形虫速殖子自噬
- 文献传递
- 刚地弓形虫速殖子与鼠星形胶质细胞体外共培养的实验观察被引量：5
- 2010年
- 原代培养星形胶质细胞,待其长至培养皿的80%时,将星形胶质细胞与弓形虫速殖子(细胞与虫体的比例为1∶10)共培养0～72h,吉氏染色观察星形胶质细胞和弓形虫速殖子的变化。共培养1h,此时定为0点,再培养0～48h,单磺酰戊二胺染色在荧光显微镜下观察星形胶质细胞内自噬囊泡的变化。结果发现共培养1h时,弓形虫速殖子开始进入星形胶质细胞,并出现荧光颗粒;8h星形胶质细胞内荧光颗粒最多;12h后显著减少,星形胶质细胞开始被破坏;48h星形胶质细胞内荧光颗粒消失;72h大部分星形胶质细胞已被涨破,留下大量增殖的弓形虫速殖子。说明自噬在弓形虫速殖子体外感染星形胶质细胞的过程中是受到抑制的。
- 李冬娜梁幼生周永华张焕相沈海英骆伟龚唯诸葛洪祥
- 关键词：星形胶质细胞弓形虫速殖子自噬
