王晓虎
- 作品数：8 被引量：13H指数：3
- 供职机构：广东省农业科学院动物卫生研究所更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省农科院院长基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 鸭α-干扰素的真核与原核表达及生物活性的比较被引量：3
- 2014年
- 为了研究鸭α-干扰素在真核和原核中表达的不同,试验构建真核重组质粒Duifnα-pPICZα在巴斯德毕赤酵母X33株中实现高效分泌表达,构建原核重组质粒pET24α-Duifnα在大肠杆菌DH5α中表达蛋白,His·Tag包涵体蛋白纯化得到高纯度蛋白液,并进行了SDS-PAGE检测。结果表明:鸭α-干扰素分子质量为21 ku,通过鸭胚测得真核重组质粒表达的鸭α-干扰素能抑制水泡性口炎病毒(VSV)对鸭胚细胞的攻击,最高效价达1×105U/mL;通过IPTG诱导实现高蛋白表达,表达的量比真核质粒表达的多,纯化后的原核重组质粒表达的鸭α-干扰素也能抑制VSV对鸭胚细胞的攻击,最高效价达1×106U/mL。说明原核表达蛋白的活性比真核高10个单位。
- 邹欢刘宇黄元王晓虎陈晶张健騑向华
- 关键词：A-干扰素真核原核生物活性
- 一种复合鸭α干扰素基因、其重组载体及应用
- 本发明公开了一种复合鸭α干扰素基因、其重组载体及应用。所述复合鸭α干扰素基因的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。本发明经优化后的复合鸭α干扰素基因可在毕赤氏酵母基因工程菌中表达生产复合鸭α干扰素，所得到的复合鸭α干扰素...
- 向华黄元王晓虎陈晶张健騑
- 文献传递
- CRISPR-Cas9技术在疾病治疗中的应用被引量：4
- 2016年
- CRISPR-Cas系统广泛存在于细菌中,是一种高效、特异、操作简单易行、可对多种生物的基因组进行遗传改造的工具。与其他功能缺失的筛选技术(如RNAi、TALEN)相比,全基因组CRISPR-Cas9敲除技术显示出更大的优势。这种技术被广泛应用于世界各地的实验室以及各个领域,尤其是在疾病研究中。利用CRISPR-Cas系统,科学家在艾滋病、癌症、亨廷顿氏病研究中取得了重大突破。本文将就CRISPR-Cas系统的最新进展,尤其是在疾病研究中的最新应用成果作一综述,并对此技术在人类战胜病魔的斗争中将起到的关键作用进行探讨。
- 颜雯向蓉向华王晓虎
- 关键词：疾病
- 猫杯状病毒感染性克隆的构建
- 2014年
- 为了构建猫杯状病毒感染性克隆,在对FCV CH-GD株全长基因组测序基础上,引入单一酶切位点和T7 RNA聚合酶启动子,用重组PCR方法,获得全长基因组c DNA,体外转录后转染F81细胞。结果成功构建含单一酶切位点的FCV全长c DNA克隆,体外转录并转染F81细胞,培养物上清液对F81细胞有感染性,细胞出现典型病变。表明获得了FCV CH-GD株的感染性克隆,为进一步研究杯状病毒的生物学特性和致病机理及研发新的疫苗奠定了基础。
- 郑翠玲向华黄元陈晶王晓虎宣华
- 关键词：感染性克隆RT-PCRRNA
- 猪Torque teno病毒广东株的PCR检测和序列分析被引量：1
- 2012年
- 目的 Torque teno病毒(Torque teno virus,TTV)是近年来才发现的一种单股负链DNA病毒。猪Torque teno病毒(Torque teno sus virus,TTsuV)在猪群中大量流行,被认为与猪的断奶后多系统衰竭综合征(post-weaning multi-systemic wastingsyndrome,PMWS)等疾病有关。本文旨在为广东TTsuV的流行病学提供数据。方法本文根据TTsuV的非编码区(UTR)合成引物,对来自广东2个猪场的14份猪血清进行了PCR检测。将2个猪场的TTsuV1和TTsuV2PCR产物各取1份,共4份PCR产物,进行克隆,测序并分析。结果 PCR共获得10份TTsuV1阳性(71%),8份TTsuV2阳性(57%),其中TTsuV1和TTsuV2双重阳性的为5份(36%)。PCR产物与参考毒株相应序列的分析证实,GDT1-1和GDT1-2的UTR片段均与TTsuV1参考毒株高度相似,GDT2-1和GDT2-2的UTR片段与TTsuV2参考毒株高度相似。结论广东至少存在两种血清型的TTsuV,在一些猪场有较高的检出率。TTsuV可能具有潜在的致病性,其公共卫生意义不容忽视。
- 黄元徐敏陈少勤王晓虎向华张健騑
- 关键词：PCR
- 猪Torque teno病毒广东株的PCR检测和序列分析
- Torque teno病毒(Torque teno virus,TTV)是近年来才发现的一种单股负链DNA病毒。猪Torque teno病毒(Torque teno sus virus,TTsuV)在猪群中大量流行,被认...
- 黄元徐敏陈少勤王晓虎向华张健騑
- 关键词：PCR
- 文献传递
- 伪狂犬病病毒变异株的鉴定及伪狂犬病的防控被引量：5
- 2016年
- 2011年以来伪狂犬病病毒(PRV)变异株在中国大范围流行致伪狂犬病(PR)再次暴发。广东某猪场发生疑似PR引起母猪较大范围的流产,为此本试验展开对该病诊断和防控方法的研究。随机抽取流产和未流产母猪血清,应用ELISA检测PRV gE和gB抗体;同时采集发病仔猪脑组织PCR检测PRV gH片段。对全场母猪紧急接种PRV变异株灭活苗,分别应用ELISA和中和试验检测免疫前后的血清抗体。结果显示,已发生流产母猪血清PR gE抗体均为阳性,而未流产母猪血清抗体见弱阳性;流产母猪PRV gB抗体的S/P值高达4.0,未流产母猪也达3.3。PCR检测3头病仔的脑组织均为阳性,测序表明其gB基因与2012年流行毒株BJ-YT-2012序列相似性为100%。ELISA检测免疫灭活疫苗前母猪血清PRV gB抗体S/P值为1.603,免疫4周后升高到2.88;特别是中和抗体从1∶24升高到1∶213。这与免疫疫苗1周后母猪流产开始减少,2周后母猪少见流产的结果吻合。研究结果提示,PRV经典株疫苗产生的PRV gB抗体对变异株的保护作用不佳,而变异株疫苗的保护效果显著。
- 黄元陈晶赵翠玲陈锦良向蓉王晓虎向华黄忠
- 关键词：伪狂犬病病毒变异株免疫
- 一种复合鸭α干扰素基因、其重组载体及应用
- 本发明公开了一种复合鸭α干扰素基因、其重组载体及应用。所述复合鸭α干扰素基因的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。本发明经优化后的复合鸭α干扰素基因可在毕赤氏酵母基因工程菌中表达生产复合鸭α干扰素，所得到的复合鸭α干扰素...
- 向华黄元王晓虎陈晶张健騑
- 文献传递
