翟春利
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
- 供职机构：南开大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 表达外源rhBMP2的CHO细胞株稳定性分析被引量：2
- 2008年
- 骨形态发生蛋白2(BMP2)属于TGF-β超家族,是诱导成骨活性最强的BMPs之一,具有广泛的临床应用的前景。本实验室已成功构建高效表达rhBMP2的重组CHO细胞株,现选取其中一株表达量最高的细胞rCHO(hBMP2)-C8进行长期体外培养,并在培养过程中比较了添加和去除压力筛选中使用的MTX对细胞生长,rhBMP2基因拷贝数及rhBMP2分泌蛋白表达的影响;检测了该细胞株在无血清培养基中可以连续表达rhBMP2的时间以及培养基中rhBMP2的温度敏感性等等。该研究为进一步采用动物细胞规模化培养技术生产rhBMP2奠定了基础。
- 翟春利闫继东杨爽杜君袁伟王兆奇朱天慧
- 关键词：BMP2稳定性
- 表达外源rhBMP2的CHO细胞株稳定性分析及rhBMP2的制备
- BMPs（Bone morphogentic protein，BMP）属于转化生长因子（Tansformation growth factor，TGF）-β超家族，BMPs最早是从骨中提取得到，能够在体内诱导异位骨和软骨...
- 翟春利
- 文献传递
- 不同蛋白标签对LMO2融合蛋白沉淀实验的影响被引量：3
- 2008年
- 融合蛋白沉淀技术是一种用来研究蛋白质相互作用的新的体外实验技术,通常利用蛋白亲和标签与探针蛋白融合表达来钓取未知相互作用蛋白或验证已知蛋白间的相互作用,其中以谷胱甘肽巯基转移酶(GST)标签最为常用。LMO2(由LIMonly缩写得名,也称Ttg-2或Rbtn2)是一种小分子量难溶蛋白。利用原核系统分别表达了含有GST和麦芽糖结合蛋白(MBP)两种标签的LMO2融合蛋白,发现GST-LMO2融合蛋白以包涵体的形式表达,而MBP-LMO2融合蛋白则能够以可溶形式表达,而且MBP-LMO2的表达量明显高于GST-LMO2融合蛋白。将可溶性的MBP-LMO2融合蛋白和复性后的GST-LMO2融合蛋白分别用于钓取K562细胞中LMO2的结合蛋白,结果显示二者都可以结合K562细胞中内源性的GATA1蛋白,而MBP-LMO2融合蛋白捕获的GATA1蛋白明显多于复性后的GST-LMO2融合蛋白。这一结果提示,在研究一些分子量小、疏水性强的蛋白质时改变标签蛋白可能是一种有益的尝试。
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- 关键词：麦芽糖结合蛋白
- 原癌基因LMO2短剪切模式的结合蛋白鉴定及功能分析
- 2008年
- 目的研究原癌基因LMO2短剪切模式（LMO2-C）的结合蛋白在白血病细胞K562中的表达及功能分析。方法利用麦芽糖结合蛋白（MBP）沉淀技术和哺乳动物双杂交技术研究LMO2-C的结合蛋白在K562细胞中的表达；半定量RT-PCR检测过表达LMO2-C的K562细胞中红系发育的标志性基因GPA的表达水平。结果MBP原核表达系统成功表达并被纯化出可溶性MBP-LMO2-C结合蛋白，利用MBP沉淀技术验证了LMO2-C能与K562细胞中内源性的GATA-1、LDB1结合；哺乳动物双杂交试验进一步证明LMO2-C能与LDB1结合，而且其过表达能够抑制LMO2-L与LDB1的结合，抑制率达（81．13±0．68）％；半定量RT-PCR结果显示在过表达LMO2-C的K562细胞中，GPA基因相对表达水平下调（51．00±1．58）％。结论LMO2-C能结合K562细胞中内源性GATA-1、LDB1蛋白，并能下调红系发育的标志性基因GPA的表达。
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- 关键词：基因双杂交系统技术
- DeltaEF1在成骨细胞分化过程中的功能研究
- 杨爽朱天慧张杰袁伟杜君翟春利王兆琪
- 本文研究了deltaEF1在调控rhBMP-2诱导成骨细胞分化过程中所发挥的功能，以及deltaEF1EF1在BMP/Smad信号转导途径中的呈递关系及与其他信号转导途径的相互作用（crosstalk），为进一步阐明δE...
- 关键词：
- 关键词：成骨细胞骨质疏松
